HiMedia MV472-500G Основа HiVeg среды Левинталя

Основа питательной среды HiMedia MV472-500G Основа HiVeg среды Левинталя — порошкообразный продукт массой 500 г на растительной основе без компонентов животного происхождения. Основа предназначена для приготовления среды с добавлением крови и культивирования видов Haemophilus, включая Haemophilus influenzae, при контролируемых условиях инкубации.

Назначение

Основа HiVeg среды Левинталя предназначена для приготовления питательной среды с добавлением стерильной кроличьей или человеческой крови для культивирования видов Haemophilus.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с установленными параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Род Haemophilus включает виды, вызывающие различные инфекции. Для представителей этого рода характерны общая морфология и потребность в факторах роста, происходящих из крови.

Haemophilus influenzae является основным патогеном группы и наиболее вирулентным видом; инфекция может приводить к проникновению микроорганизма в кровоток и развитию менингита у детей младше 2 лет. Другие виды Haemophilus вызывают заболевания реже.

Виды Haemophilus представляют собой крупную группу грамотрицательных палочковидных бактерий, которые растут на кровяном агаре. Кровь обеспечивает два фактора, необходимые для роста многих видов Haemophilus: фактор X и фактор V.

Среда Левинталя применяется для культивирования видов Haemophilus. Для роста в культуральной среде видам Haemophilus требуется гемоглобин.

Основа HiVeg среды Левинталя изготовлена с полной заменой пептона животного происхождения на растительные пептоны, что позволяет избежать рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE), ассоциируемых с пептонами животного происхождения.

Цельная кровь кролика или человека содержит два важных фактора — фактор X и фактор V, необходимые для роста типового вида H. influenzae:

• фактор X — термостабильное вещество, гемин, связанный с гемоглобином;
• фактор V — термолабильный кофермент никотинамид-адениндинуклеотид (NAD).

Другие питательные вещества, включая соединения азота, поступают из пептона HiVeg® и экстракта HiVeg®, входящих в состав среды. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.

Патогенные виды Haemophilus могут быть предварительно идентифицированы по потребности в факторах X и V для роста в условиях лабораторного культивирования, а также по гемолитическим реакциям.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 45,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте среду порциями по 100 мл.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Добавьте 5 мл стерильной крови кролика или человека на каждые 100 мл среды.
7. Нагрейте полученную смесь на кипящей водяной бане.
8. Дайте осадку осесть.
9. Разлейте прозрачный надосадочный слой.

Культурные характеристики

Культурные характеристики определяют после добавления стерильной крови кролика или человека, в атмосфере с содержанием CO₂ 5–10 % и относительной влажностью 70 %, после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MV472-500G
• Тип продукта: HiVeg™
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Физическая форма: порошок
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Материал упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Масса: 500 г
• Температура хранения продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Конечный pH при 25 °C: 7,6 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,40–7,80

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем 2,0%-ного агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.
• После добавления крови и нагревания: в чашках Петри образуется непрозрачный гель шоколадно-коричневого цвета.

Реакция

Реакция 4,5%-ного водного раствора при 25 °C.

• pH: 7,6 ± 0,2

Пробоподготовка, обращение с образцами и безопасность

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Перед открыванием контейнера следует прочитать маркировку. При работе с образцами и культурами необходимо использовать:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При работе с образцами и культурами следует соблюдать правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Рекомендации по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Патогенные виды Haemophilus могут быть предварительно идентифицированы по потребности в факторах X и V для роста в условиях лабораторного культивирования и по гемолитическим реакциям.

Оценка эффективности

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C.

Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке. После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительный технический контекст

Отличительной особенностью основы HiVeg среды Левинталя является полная замена пептона животного происхождения на растительные пептоны при сохранении применения среды для культивирования Haemophilus после добавления крови.