HiMedia MV470-500G BYE HiVeg агар

Агар HiMedia MV470-500G BYE HiVeg агар — порошковая агаризованная питательная среда растительного происхождения массой 500 г для культивирования микоплазм и L-форм бактерий. Применяется для рутинных исследований и выделения плевропневмониеподобных организмов (PPLO) из клинических образцов с добавлением стерильной крови или сыворотки и последующей аэробной и анаэробной инкубацией.

Назначение

Среда рекомендована для культивирования и рутинного изучения распространения микоплазм, или плевропневмониеподобных организмов (PPLO), а также L-форм бактерий.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных параметров.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 52,0 г порошка в 850 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (ориентировочно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 150 мл стерильной крови или сыворотки человека либо животного.
6. Осторожно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Микоплазмы, или молликуты, относятся к наиболее мелким свободноживущим микроорганизмам. Ранее семейство Mycoplasmataceae обозначали общим термином «плевропневмониеподобные организмы» (PPLO) из-за сходства с Mycoplasma mycoides subsp. mycoides, возбудителем плевропневмонии крупного рогатого скота.

Среды BYE представляют собой простые питательные среды, разработанные Barile, Yaguchi и Eveland для культивирования и рутинного изучения распространения, среды обитания и возможного патогенеза микоплазм, плевропневмониеподобных организмов и L-форм бактерий.

Среда может применяться:

• для выделения PPLO из образцов при уретрите;
• для исследования язв полового члена;
• для анализа образцов из шейки матки;
• для выделения L-форм Corynebacterium, Neisseria и Streptococcus;
• для выявления контаминации PPLO тканевых культур и клеточных линий;
• для работы с мембранными фильтрами.

В агаре BYE HiVeg® пептон животного происхождения полностью заменён растительными пептонами. Специальный настой HiVeg®, настой HiVeg® и дрожжевой экстракт обеспечивают углерод, азот, витамины и другие факторы роста, необходимые для метаболизма микоплазм и плевропневмониеподобных организмов.

Посев выполняют в двух параллельных вариантах: одну серию инкубируют в аэробных условиях, вторую — в анаэробных в течение 48 ч или дольше. Обычно рост наблюдается через 3–5 суток, однако отрицательный результат регистрируют после 10 суток. Анаэробные условия особенно важны в течение первых 3 суток; последующие пересевы можно инкубировать в аэробных условиях.

Типы образцов

Клинические образцы:

• мазки мокроты;
• ткань;
• жидкость бронхоальвеолярного лаважа (BAL);
• бронхиальные смывы;
• спинномозговая жидкость (CSF).

Обращение с образцами и утилизация загрязнённых материалов

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой. При работе с образцами и культурой используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

Соблюдайте правила надлежащей практики микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами. При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Некоторые микроорганизмы могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций питательных потребностей.

Ожидаемые эксплуатационные характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении в соответствии с указаниями на этикетке и в пределах срока годности при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,3%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакция 5,2%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,9 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,70–8,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют для среды с добавленной сывороткой в увлажнённых анаэробных условиях после инкубации при 35–37 °C в течение 5–10 суток.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните сухой продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Эксплуатационные характеристики продукта сохраняются при использовании в пределах указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.