HiMedia MV460-500G Модифицированная основа CPLM HiVeg среды

Основа питательной среды HiMedia MV460-500G Модифицированная основа CPLM HiVeg среды производства HiMedia — порошковая среда на основе растительных пептонов без компонентов животного происхождения. Продукт используют для культивирования видов Trichomonas с добавлением лошадиной сыворотки и антибиотиков, при этом для клинических диагностических культур и выделения аксенических культур добавление антибиотиков обязательно.

Назначение

Основа предназначена для приготовления модифицированной среды CPLM HiVeg для культивирования видов Trichomonas, включая Trichomonas vaginalis. Перед использованием в среду добавляют лошадиную сыворотку, раствор пенициллина со стрептомицином и раствор нистатина.

Антибиотики не требуется добавлять при обычных пересевных культурах, однако их добавление необходимо для клинических диагностических культур и выделения аксенических культур.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 56,0 г порошка в 900 мл раствора Рингера четвёртой концентрации.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Распределите среду по флаконам порциями по 90 мл.
4. Стерилизуйте автоклавированием при 115 °C в течение 10 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. В асептических условиях добавьте на каждые 90 мл среды:
   • стерильную инактивированную лошадиную сыворотку — 10 мл;
   • стерильный раствор пенициллина со стрептомицином — 1 мл;
   • стерильный раствор нистатина — 1 мл.
7. Тщательно перемешайте среду и распределите её на подходящие объёмы с соблюдением стерильности.

Раствор пенициллина со стрептомицином

Раствор нистатина

Принцип действия и интерпретация

Trichomonas — простейший организм, по ряду характеристик сходный с бактериями. Trichomonas vaginalis является возбудителем трихомониаза — наиболее распространённой протозойной инфекции человека. Микроорганизм может инфицировать влагалище и уретру у женщин, а также иногда предстательную железу у мужчин.

Продолжительность выживания T. vaginalis в транспортной среде сравнительно ограничена. На высохшем тампоне микроорганизмы быстро погибают. Альтернативный подход заключается в незамедлительном помещении тампона с материалом в пробирку со средой для культивирования Trichomonas, дополненной лошадиной сывороткой, пенициллином и стрептомицином.

Среды для культивирования T. vaginalis обеспечивают микроорганизмы необходимыми солями, питательными веществами, восстановителями и антибиотиками, подавляющими рост бактерий в отсутствие или при низкой концентрации кислорода.

Среда CPLM — цистин-пептонная среда с печёночным экстрактом и мальтозой — была рекомендована Johnson и Trussell. Впоследствии среду модифицировали, исключив агар и метиленовый синий. В строго анаэробных условиях среда поддерживает рост даже из одной клетки простейшего. В аэробных условиях для роста требуются массивные инокуляты.

T. vaginalis является анаэробным организмом и не содержит каталазу. В основе модифицированной среды CPLM HiVeg® животные пептоны полностью заменены растительными пептонами, что позволяет избежать рисков, связанных с BSE/TSE и использованием пептонов животного происхождения.

Пептон HiVeg® и экстракт HiVeg® № 2 обеспечивают среду азотистыми соединениями и другими необходимыми питательными веществами. Гидрохлорид L-цистина действует как восстановитель. Цистин не является необходимым при анаэробной инкубации культур, но способствует поддержанию анаэробных условий. Антибиотики подавляют рост бактерий и поддерживают рост одного простейшего в строго анаэробных условиях.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Высушивание материала на тампоне приводит к быстрому отмиранию микроорганизмов. Загруженный тампон следует как можно быстрее помещать в пробирку со средой для культивирования Trichomonas, содержащей лошадиную сыворотку, пенициллин и стрептомицин.

Ограничения метода

После исследования инфицированного материала следует дополнительно выполнить микроскопическое исследование влажного препарата.

Меры безопасности

Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности в соответствии с утверждёнными руководствами. Рекомендации по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель: MV460-500G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Компоненты животного происхождения: отсутствуют; растительная основа
• Материал упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Масса: 500 г
• Температура хранения продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C
• Конечный pH при 25 °C: 6,0 ± 0,2
• Диапазон pH: 5,80–6,20

Контроль качества

Внешний вид

Однородный свободно сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор коричневато-жёлтого цвета без осадка.

Реакция среды

Реакция 5,6 % водного раствора при 25 °C: pH 6,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение до 4 суток.

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при 15–25 °C. Используйте до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо обеззараживать автоклавированием и/или уничтожать сжиганием.