HiMedia MV434-500G Основа GC HiVeg агара

Основа GC HiVeg агара HiMedia MV434-500G — сухая питательная среда на растительной основе для селективного выделения и культивирования гонококков. При добавлении крови, гемоглобина и специализированных добавок используется для изоляции Neisseria gonorrhoeae и других требовательных микроорганизмов.

Принцип измерения и действия

Среда разработана для культивирования возбудителей гонококковых инфекций, таких как Neisseria gonorrhoeae. Большинство штаммов Neisseria имеют сложные требования к питанию и могут быть чувствительны к жирным кислотам, поэтому в состав среды включен растворимый крахмал для нейтрализации токсичных метаболитов. Фосфаты поддерживают стабильный уровень pH, предотвращая его изменение при производстве аминов.

Для роста требовательных видов Haemophilus необходим фактор X (гемин), который обеспечивается гемоглобином. Дополнительные добавки предоставляют фактор V (НАД — никотинамидадениндинуклеотид), аминокислоты, коэнзимы и ионы железа, что стимулирует рост патогенных Neisseria. Использование растительных пептонов вместо животных делает среду безопасной (отсутствие рисков BSE/TSE).

Методика приготовления

Приготовление базовой среды двойной концентрации

1. Суспендируйте 36,0 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте раствор в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.

Приготовление раствора добавки FO Growth Supplement (FD022)

1. Суспендируйте 10 г добавки FD022 в 500 мл очищенной или дистиллированной воды (получение 2 % раствора).
2. Стерилизуйте раствор в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
3. Охладите до 45–50 °C.

Сборка конечной среды

1. Равномерно смешайте два стерильных раствора (базу и добавку FD022).
2. В асептических условиях добавьте содержимое двух флаконов селективной добавки GC Selective Supplement (FD021).
3. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Варианты модификации

• Повышение селективности: можно добавить антибиотики V.C.N. Supplement (FD023), V.C.N.T. Supplement (FD024), Linco T Supplement (FD026) или Vanclo T Supplement (FD028) из расчета два флакона на литр.
• Улучшение питательных свойств: добавьте Vitamino Growth Supplement (FD025) или Yeast Autolysate Supplement (FD027) (два флакона на литр).
• Приготовление шоколадного агара (Chocolate Blood Agar):
  1. Приготовьте среду одинарной концентрации: 3,6 г порошка на 100 мл дистиллированной воды.
  2. Стерилизуйте в автоклаве при 121 °C ($\approx$0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
  3. Добавьте 5 % (об/об) дефибринированной крови.
  4. Тщательно перемешайте и прогрейте при 80 °C в течение 10 минут.

Область применения и работа с образцами

Среда применяется для анализа клинических образцов: мочи, респираторных экссудатов и др.

Особенности посева и инкубации

• Не используйте ватные тампоны для сбора образцов.
• Посев следует проводить немедленно после сбора материала.
• Образцы наносят на поверхность чашек штрихом так, чтобы были созданы зоны как с высокой, так и с низкой плотностью обсеменения.
• Условия инкубации: температура 37 °C, относительная влажность 70 %, атмосфера с содержанием $\text{CO}_2$ 5–10 %.
• Все предполагаемые колонии Neisseria должны быть подтверждены тестами на ферментацию углеводов и серологическими тестами.

Технические характеристики

Состав, г/л

Общие параметры

Культуральные характеристики

Характеристики определены при инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 часов в атмосфере с 5–10 % $\text{CO}_2$ и влажностью 70 %, с добавлением стерильных компонентов FO Growth Supplement (FD022) и GC Selective Supplement (FD021).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре от +10 до +30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом месте, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и предостережения

1. Для роста требовательных организмов (Haemophilus и гонококки) обязательно добавление гемоглобина и добавок Vitamino.
2. Все полученные колонии подлежат подтверждающим тестам.
3. При работе с образцами соблюдайте стандартные правила микробиологической безопасности; используйте защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
4. Контаминированные материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве.