HiMedia MV434-100G Основа GC HiVeg агара

Основа GC HiVeg агара HiMedia MV434-100G — сухая питательная среда на растительной основе для селективного выделения и культивирования гонококков. При добавлении крови, гемоглобина и других добавок используется для изоляции Neisseria gonorrhoeae и других требовательных микроорганизмов.

Принцип измерения

Среда разработана для обеспечения роста Neisseria в течение 24 часов. Использование растительных пептонов (HiVeg®) вместо животных исключает риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией).

Основные компоненты и их функции:

• Специальный пептон: обеспечивает необходимые питательные вещества.
• Крахмал: нейтрализует токсичные метаболиты, вырабатываемые Neisseria.
• Фосфаты: поддерживают стабильный pH, предотвращая его изменение при производстве аминов.
• Гемоглобин (добавляется отдельно): источник фактора X (гемин), необходимого для роста видов Haemophilus.
• Добавки (добавляются отдельно): обеспечивают фактор V (НАД — никотинамидадениндинуклеотид), аминокислоты, коферменты и ионы железа для улучшения роста патогенных Neisseria.

Область применения

Применяется для анализа клинических образцов: мочи, респираторных экссудатов и других биологических жидкостей.

Особенности работы с образцами

• Не используйте ватные тампоны для сбора образцов.
• Посев следует проводить немедленно после сбора.
• Образцы наносят на поверхность чашек штрихом так, чтобы были созданы как зоны с высокой, так и с низкой плотностью посева.
• Инкубация проводится при 37 °C в атмосфере с влажностью 70 % и содержанием CO₂ 5–10 %.
• Все предполагаемые культуры Neisseria должны быть подтверждены тестами на ферментацию углеводов и серологическими тестами.

Методика приготовления

Приготовление базовой среды двойной концентрации

1. Суспендируйте 36,0 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Отдельно суспендируйте 10 г добавки для роста FO (FD022) в 500 мл очищенной или дистиллированной воды (получая 2 % раствор).
4. Стерилизуйте оба раствора в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Охладите до 45–50 °C.
6. Равномерно смешайте оба раствора и в асептических условиях добавьте содержимое двух флаконов селективной добавки GC (FD021).
7. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Приготовление шоколадного кровяного агара (Chocolate Blood Agar)

1. Приготовьте среду одинарной концентрации, используя 3,6 г порошка на 100 мл дистиллированной воды.
2. Стерилизуйте в автоклаве при 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
3. Добавьте 5 % (об/об) дефибринированной крови.
4. Тщательно перемешайте и прогрейте при 80 °C в течение 10 минут.

Дополнительная модификация

Для повышения селективности среды можно добавить следующие антибиотики (2 флакона на литр):

• V.C.N. Supplement (FD023)
• V.C.N.T. Supplement (FD024)
• Linco T Supplement (FD026)
• Vanclo T Supplement (FD028)

Для улучшения питательных свойств можно добавить (2 флакона на литр):

• Vitamino Growth Supplement (FD025)
• Yeast Autolysate Supplement (FD027)

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,0 % раствором агара.
• Цвет и прозрачность: базовая среда — светло-желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель; после добавления 2 % гемоглобина — непрозрачный гель шоколадно-коричневого цвета.
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются в присутствии 5–10 % CO₂ и влажности 70 % с добавлением стерильной добавки FO (FD022) и селективной добавки GC (FD021) после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.
• Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.

Ограничения и меры предосторожности

• Для роста требовательных организмов (Haemophilus и гонококки) обязательно добавление гемоглобина и витаминных добавок.
• Все полученные колонии должны пройти подтверждающие тесты.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры микробиологической безопасности: используйте защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Контаминированные материалы перед утилизацией подлежат обязательному автоклавированию или инсинерации.