HiMedia MV433-500G Основа HiVeg агара с глюкозой и цистеином

Питательная среда HiMedia MV433-500G Основа HiVeg агара с глюкозой и цистеином производства HiMedia предназначена для культивирования и количественного учёта Francisella tularensis после добавления крови, гемоглобина или гемина. Основа применяется в микробиологических лабораториях для анализа проб воды и требует работы с подозрительными материалами по процедурам уровня биологической безопасности 2 (BSL-2).

Назначение

После добавления крови, гемоглобина или гемина среда предназначена для культивирования и количественного учёта Francisella tularensis. Рекомендуемый тип образца — вода.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 58,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильные концентрированные эритроциты до конечной концентрации 2 % или стерильную дефибринированную кроличью кровь концентрацией 4–5 %.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Francisella tularensis — грамотрицательная аэробная палочка, являющаяся возбудителем туляремии. Туляремия преимущественно поражает диких животных и поддерживается в природе эктопаразитами, загрязнённой окружающей средой, каннибализмом, а также острыми и хроническими носителями. Кровососущие и жалящие насекомые служат переносчиками инфекции.

Бактерии рода Francisella, ранее относимые к роду Pasteurella, не культивируются на обычных питательных средах и требуют сложной среды, содержащей кровь или тканевые экстракты, тиамин и цистеин. Основа агара с глюкозой, цистеином и тиамином при добавлении крови или гемоглобина предназначена для культивирования и количественного учёта F. tularensis, также обозначаемой как Pasteurella tularensis.

Среда Glucose Cysteine HiVeg® Agar Base с тиамином изготовлена с использованием пептонов растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения. Пептон HiVeg® № 1 и соевый пептон обеспечивают основные питательные вещества для роста. Декстроза служит легко метаболизируемым источником углеводов, хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а тиамин и гидрохлорид цистеина выступают стимуляторами роста, необходимыми для культивирования Pasteurella. Мелкие каплеобразные колонии развиваются через 48 ч.

Подготовка, сбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с действующими руководствами и локальными нормативами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности материалов.

Ограничения применения

F. tularensis обладает высокой вирулентностью; заражение в лаборатории возможно через аэрозоли и капли. Образцы необходимо обрабатывать с особой осторожностью, а материалы с подозрением на наличие F. tularensis — в соответствии с процедурами уровня биологической безопасности 2 (BSL-2).

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,4%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базальная среда: гель янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.
• После добавления 4–5 % стерильной дефибринированной овечьей или кроличьей крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция среды

Реакция 5,8%-ного водного раствора по массе/объёму при 25 °C.

• pH: 6,9 ± 0,2.
• Диапазон pH: 6,70–7,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 4–5 % дефибринированной овечьей крови, инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 ч и наличии 10 % CO₂.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при 2–8 °C. Используйте до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия бутылку необходимо плотно закрывать и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к комкованию. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются лучше всего при использовании в пределах указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.