HiMedia MV433-500G Основа HiVeg агара с глюкозой и цистеином

Основа HiVeg агара с глюкозой и цистеином HiMedia MV433-500G для культивирования и количественного учёта Francisella tularensis. При добавлении крови, гемоглобина или гемина среда обеспечивает рост данной бактерии; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Francisella tularensis (ранее известная как Pasteurella tularensis) представляет собой грамотрицательную аэробную бациллу, являющуюся возбудителем туляремии. Данный микроорганизм не растёт на обычных питательных средах и требует комплексного состава, содержащего кровь или экстракты тканей, тиамин и цистеин.

В основе среды MV433 лежит использование растительных пептонов вместо компонентов животного происхождения, что исключает риски заражения BSE/TSE (болезнь коровьего или другого вида губчатого мозга). Пептон HiVeg® № 1 и соевый пептон обеспечивают основные питательные вещества, декстроза (глюкоза) служит легкоусвояемым источником углеводов, а хлорид натрия поддерживает осмотический баланс. Тиамин и гидрохлорид цистеина выступают в роли факторов роста, необходимых для культивирования Pasteurella. В результате инкубации через 48 часов развиваются колонии, напоминающие мельчайшие капли.

Область применения

Среда рекомендуется для выделения и подсчёта Francisella tularensis из проб воды.

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 58,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильные упакованные эритроциты до конечной концентрации 2 % или стерильную дефибринированную кровь кролика в концентрации 4–5 %.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Происхождение: без компонентов животного происхождения (растительная основа)
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до жёлтого цвета
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,4 % раствором агара
• Цвет и прозрачность базовой среды: янтарный цвет, от прозрачного до слегка опалесцирующего геля
• Цвет среды с добавлением 4–5 % крови: вишнёво-красный непрозрачный гель
• Диапазон pH: 6,70–7,10

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 4–5 % дефибринированной крови овцы после инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 часов в присутствии 10 % CO₂.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников возгорания.

Ограничения и меры предосторожности

F. tularensis обладает высокой вирулентностью. Лабораторные инфекции могут быть приобретены через аэрозоли или капли. Работа с образцами, которые могут содержать F. tularensis, должна проводиться с крайней осторожностью в соответствии с протоколами уровня биологической безопасности 2 (BSL-2).

Утилизация

Использованные или непригодные препараты, а также материалы, контактировавшие с пробами, подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.