HiMedia MV413-100G Основа HiVeg среды Тайера-Мартина

Основа питательной среды HiMedia MV413-100G Основа HiVeg среды Тайера-Мартина — порошкообразная основа массой 100 г для приготовления селективной среды. Применяется для селективного выделения гонококков из патологических образцов; готовую среду хранят при 2–8 °C, а сухой препарат — при 10–30 °C в плотно закрытой упаковке.

Назначение

Рекомендуемое назначение: селективное выделение гонококков из патологических образцов.

Тип образцов:

• Клинические образцы из горла.
• Влагалищные образцы.
• Ректальные образцы.
• Уретральные образцы.

Среда предназначена только для диагностики in vitro и профессионального применения.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Технические характеристики

Приготовление среды

Основной способ приготовления

1. Суспендируйте 21,0 г препарата в 450 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин; давление 15 фунтов соответствует приблизительно 0,103 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 50 мл стерильной гемолизированной крови, регидратированное содержимое одного флакона витаминной ростовой добавки FD025 и добавку V.C.N. FD023 либо V.C.N.T. FD024.
6. При необходимости используйте добавку GC с антибиотиками FD021 как единственную добавку.
7. Тщательно перемешайте среду перед разливом в стерильные чашки Петри.

Приготовление с гемоглобином

1. Суспендируйте 21,0 г основы среды Тайера—Мартина в 250 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Приготовьте 250 мл 2%-ного раствора гемоглобина.
4. Стерилизуйте раствор гемоглобина отдельно автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин; давление 15 фунтов соответствует приблизительно 0,103 МПа.
5. Охладите компоненты до 45–50 °C.
6. Смешайте основу и раствор гемоглобина.
7. Добавьте добавки, перечисленные для основного способа приготовления.

Принцип действия и интерпретация

Улучшенная среда для выделения гонококков в течение 24 ч была описана Carpenter и Morton. Позднее была продемонстрирована эффективность среды GC с добавлением гемоглобина и дрожжевого концентрата для выделения гонококков. Среда Тайера—Мартина разработана для первичного выделения Neisseria gonorrhoeae и Neisseria meningitidis из образцов со смешанной микрофлорой, полученных из горла, влагалища, прямой кишки и уретры.

В составе селективной среды используются ванкомицин, колистин и нистатин. Для повышения селективности Martin и Lester дополнительно применяли антибиотик триметоприм. Основа HiVeg® содержит растительные пептоны вместо пептонов животного происхождения, поэтому не несёт рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE).

Функции компонентов:

• Специальный пептон HiVeg® обеспечивает микроорганизмы питательными веществами.
• Крахмал нейтрализует токсичные жирные кислоты, если они присутствуют в агаре.
• Гемоглобин обеспечивает фактор X.
• Фактор V — НАД — поступает с добавленной ростовой добавкой.
• Добавка FD025 также поставляет витамины, аминокислоты, коферменты и другие компоненты, усиливающие рост патогенных видов Neisseria.
• Ванкомицин подавляет грамположительные бактерии.
• Колистин подавляет грамотрицательные бактерии.
• Нистатин подавляет грибы.

Среда может подавлять виды Haemophilus. Некоторые штаммы видов Capnocytophaga могут расти на этой среде при посеве образцов из ротоглотки.

Техническое отличие основы HiVeg® от традиционных основ среды Тайера—Мартина заключается в использовании растительных пептонов вместо пептонов животного происхождения.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после добавления стерильной гемолизированной крови или раствора гемоглобина FD022, витаминной ростовой добавки FD025 и добавки V.C.N. FD023 либо V.C.N.T. FD024; инкубация проводится при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,3%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.
• После добавления гемоглобина или стерильной гемолизированной крови и добавок: в чашках Петри образуется непрозрачный гель шоколадного цвета.

Реакция

Реакция 4,2%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2.

Диапазон pH

6,80–7,20.

Сбор и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Из-за вариабельности потребностей в питательных веществах и требовательности микроорганизмов некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.
2. Некоторые штаммы видов Capnocytophaga могут расти на этой среде при посеве образцов из ротоглотки.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Для получения указаний по безопасности обращайтесь к соответствующим паспортам безопасности.

Условия хранения и срок годности

• Сухой продукт хранить при 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду хранить при 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрывать и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности препарата.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Для сохранения рабочих характеристик использовать продукт в пределах