HiMedia MV393-500G Основа декарбоксилазного HiVeg бульона Мёллера

Сухая питательная среда HiMedia MV393-500G Основа декарбоксилазного HiVeg бульона Мёллера на растительной основе. Применяется для дифференциации бактерий на основании их способности декарбоксилировать L-аминокислоты; вес упаковки 500 г.

Принцип измерения

Основа бульона Мёллера используется для дифференциации грамотрицательных энтеробактерий по их способности декарбоксилировать аминокислоты. Среда позволяет определить продукцию лизин- и орнитин-декарбоксилазы, а также аргинин-дигидролазы.

В состав среды входят HiVeg® пептон и HiVeg® экстракт, которые обеспечивают азот- и углеродсодержащие соединения, длинноцепочечные аминокислоты и другие питательные вещества. Декстроз служит ферментируемым углеводом, а пиридоксаль является кофактором фермента декарбоксилазы. В качестве индикаторов pH используются бромокрезоловый пурпурный и крезоловый красный.

Механизм реакции:

1. При инокуляции бактериями, ферментирующими декстрозу, pH среды снижается из-за образования кислоты, и цвет индикатора меняется с пурпурного на жёлтый.
2. Образовавшаяся кислота стимулирует работу фермента декарбоксилазы.
3. Декарбоксилирование лизина приводит к образованию кадаверина, орнитина — к путресцину. Аргинин сначала гидролизуется до орнитина, который затем декарбоксилируется в путресцин.
4. Образование этих аминов повышает pH среды, возвращая цвет индикатора из жёлтого в пурпурный.
5. Если микроорганизм не вырабатывает соответствующий фермент, среда остаётся кислой (жёлтого цвета).

Для контроля каждый изолят должен быть также инокулирован в пробирку с основой бульона Мёллера без добавления аминокислоты.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворить 10,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавить необходимые L-аминокислоты (L-лизин, L-аргинин, L-орнитин или другие) в количестве 10 г. При использовании DL-аминокислот применять концентрацию 2 %.
3. При добавлении L-орнитина требуется повторная корректировка pH.
4. При необходимости прогреть раствор до полного растворения компонентов.
5. Разлить по 5 мл в пробирки с винтовыми крышками.
6. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 10 минут.

Процедура анализа

• Инокулированные пробирки необходимо защитить от воздуха слоем стерильного минерального масла. Контакт с воздухом может вызвать защелачивание поверхности среды, что сделает результат теста недостоверным.

Область применения

• Анализ проб пищевых продуктов и молочной продукции.
• Анализ проб воды.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

• Происхождение: без содержания компонентов животного происхождения (растительная основа, Veg)
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Внешний вид: светло-жёлтый или зеленовато-жёлтый гомогенный свободнотекучий порошок
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный раствор, прозрачный, без осадка
• pH водного раствора (1,05 % масс./об. при 25 °C): 5,80–6,20

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение до 4 суток с добавлением соответствующих аминокислот и созданием слоя стерильного минерального масла.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–25 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и предупреждения

• Некоторые требовательные (fastidious) организмы могут демонстрировать замедленную реакцию.
• Наличие слоя минерального масла является обязательным условием для получения корректных результатов.
• При работе с образцами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Контаминированные материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.