HiMedia MV393-500G Основа декарбоксилазного HiVeg бульона Мёллера

Питательная микробиологическая среда — основа декарбоксилазного HiVeg бульона Мёллера HiMedia MV393-500G, порошок массой 500 г с конечным pH 6,0 ± 0,2. Основа применяется с добавлением соответствующей L-аминокислоты для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты; для получения достоверного результата инокулированные пробирки необходимо защищать от воздуха слоем стерильного минерального масла.

Назначение

Основа декарбоксилазного HiVeg бульона Мёллера предназначена для дифференциации бактерий, преимущественно грамотрицательных энтеробактерий, по способности декарбоксилировать аминокислоты. Среду используют после добавления L-лизина, L-аргинина, L-орнитина или другой необходимой L-аминокислоты.

Типы исследуемых образцов:

• пищевые продукты и молочные образцы;
• образцы воды.

Для пищевых и молочных образцов применяют соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно действующим руководствам. Для образцов воды применяют соответствующие методы отбора и обработки проб с учётом руководств и местных нормативов.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Пептон и экстракт HiVeg® изготовлены на основе растительных компонентов вместо пептонов животного происхождения. Компоненты среды обеспечивают азотистые и углеродистые соединения, аминокислоты с длинной цепью и другие необходимые питательные вещества для роста бактерий.

Принцип измерения и интерпретация

Среда используется для выявления продукции лизиндекарбоксилазы, орнитиндекарбоксилазы и аргининдегидролазы.

• Декстроза является сбраживаемым углеводом.
• Пиридоксаль выполняет функцию кофактора фермента декарбоксилазы.
• Бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный используются как индикаторы pH.
• При внесении бактерий, сбраживающих декстрозу, pH снижается из-за образования кислоты, а окраска индикатора изменяется с пурпурной на жёлтую.
• Образовавшаяся кислота стимулирует активность фермента декарбоксилазы.
• При декарбоксилировании лизина образуется кадаверин.
• При декарбоксилировании орнитина образуется путресцин.
• Аргинин сначала гидролизуется до орнитина, который затем декарбоксилируется с образованием путресцина.
• Образование аминов повышает pH среды, из-за чего окраска изменяется с жёлтой обратно на пурпурную.
• Если микроорганизм не продуцирует соответствующий фермент, среда остаётся кислой и жёлтой.

Продукция орнитиндекарбоксилазы может использоваться как критерий дифференциации видов Klebsiella и Enterobacter: Klebsiella неподвижны и не продуцируют орнитиндекарбоксилазу, тогда как Enterobacter подвижны и продуцируют орнитиндекарбоксилазу, за исключением Enterobacter agglomerans.

Каждый исследуемый изолят также инокулируют в пробирку с основой декарбоксилазного бульона Мёллера без добавления аминокислоты.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 10,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 10 г L-лизина, L-аргинина, L-орнитина или другой необходимой L-аминокислоты.
3. При использовании D,L-аминокислот применяйте концентрацию 2 %.
4. При добавлении L-орнитина повторно отрегулируйте pH.
5. При необходимости нагрейте смесь для полного растворения среды.
6. Разлейте среду порциями по 5 мл в пробирки с завинчивающимися крышками.
7. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 10 мин.

Условия проведения анализа

Инокулированные пробирки необходимо защищать от воздуха слоем стерильного минерального масла. Контакт среды с воздухом может вызвать ощелачивание её поверхности и сделать результат теста недействительным.

Культуральные характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение до 4 суток с добавлением соответствующих аминокислот и покрытием стерильным минеральным маслом.

* Соответствующие номера WDCM.
# Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Контроль качества

Внешний вид порошка: однородный, хорошо сыпучий порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор пурпурного цвета без осадка в пробирках.

Реакция: реакция водного раствора концентрацией 1,05 % масс./об. при 25 °C.

pH: 5,80–6,20.

Технические характеристики

• Назначение изделия: основа питательной среды
• Масса: 500 г
• Рабочий диапазон температуры хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C
• Реакция среды: pH 6,0 ± 0,2 для 1,05%-ного водного раствора при 25 °C
• Условия каталога по температуре: 10–30 °C

Ограничения применения

• Некоторые требовательные микроорганизмы могут давать замедленную реакцию.
• Покрытие среды минеральным маслом необходимо для получения корректных результатов.
• Поверхностное ощелачивание при контакте с воздухом может сделать тест недействительным.

Отбор проб, безопасность и утилизация

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Перед открытием контейнера прочитайте маркировку. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или