HiMedia MV393-100G Основа декарбоксилазного HiVeg бульона Мёллера

Сухая основа декарбоксилазного бульона Мёллера HiMedia MV393-100G на растительной основе (HiVeg). Применяется для дифференциации бактерий на основании их способности декарбоксилировать соответствующие L-аминокислоты; вес упаковки 100 г.

Принцип измерения

Основа декарбоксилазного бульона Мёллера используется для дифференциации грамотрицательных энтеробактерий по их способности декарбоксилировать аминокислоты. Среда содержит HiVeg-пептон и HiVeg-экстракт, которые обеспечивают азот- и углеродсодержащие соединения, длинноцепочечные аминокислоты и другие питательные вещества. Декстроза служит ферментируемым углеводом, а пиридоксаль является кофактором фермента декарбоксилазы.

В качестве индикаторов pH используются бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный. При инокуляции бактериями, ферментирующими декстрозу, pH снижается из-за образования кислоты, и цвет индикатора меняется с пурпурного на жёлтый. Образовавшаяся кислота стимулирует фермент декарбоксилазу. Декарбоксилирование лизина приводит к образованию кадаверина, а орнитина — путресцина. Аргинин сначала гидролизуется до орнитина, который затем декарбоксилируется с образованием путресцина. Образование этих аминов повышает pH среды, возвращая цвет индикатора из жёлтого в пурпурный. Если микроорганизмы не вырабатывают соответствующий фермент, среда остаётся кислой (жёлтого цвета).

Для контроля каждый изолят должен быть также инокулирован в пробирку с основой бульона Мёллера, не содержащую аминокислоту.

Методика проведения анализа

1. Растворите 10,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 10 г L-лизина, L-аргинина, L-орнитина или других необходимых L-аминокислот. При использовании DL-аминокислот применяйте концентрацию 2 %.
3. При добавлении L-орнитина требуется повторная корректировка pH.
4. При необходимости прогрейте среду для полного растворения компонентов.
5. Разлейте среду по 5 мл в пробирки с винтовыми крышками.
6. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 10 минут.
7. После инокуляции пробирки необходимо защитить от воздуха слоем стерильного минерального масла. Контакт с воздухом может вызвать защелачивание поверхности среды, что сделает результат теста недостоверным.

Область применения

• Образцы пищевых продуктов и молочной продукции.
• Пробы воды.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Дополнительные параметры:

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный прозрачный раствор без осадка в пробирках.
• Реакция: pH 1,05% (м/об) водного раствора при 25 °C составляет 6,0 ± 0,2.
• Диапазон pH: 5,80–6,20.

Культуральные характеристики

Характеристики определены после инкубации при 35–37 °C в течение до 4 суток с добавлением соответствующих аминокислот и созданием слоя стерильного минерального масла.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 15–25 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Некоторые требовательные (fastidious) организмы могут демонстрировать замедленную реакцию.
• Наличие слоя минерального масла обязательно для получения достоверных результатов.
• При работе с образцами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности и использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, защитная одежда, очки).
• Контаминированные материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.