Питательная среда HiMedia MV393-100G «Основа декарбоксилазного HiVeg бульона Мёллера» — порошкообразная основа без компонентов животного происхождения для приготовления дифференциальной среды. Основа применяется с добавлением соответствующей L-аминокислоты для выявления способности бактерий декарбоксилировать аминокислоты; масса упаковки составляет 100 г, температура хранения — 10–30 °C.

Назначение

Основа декарбоксилазного HiVeg бульона Мёллера предназначена для дифференциации бактерий по способности декарбоксилировать аминокислоты после добавления соответствующей L-аминокислоты.

Среда используется для дифференциации грамотрицательных энтеробактерий по способности образовывать лизиндекарбоксилазу, орнитиндекарбоксилазу и аргининдегидролазу. Выработка орнитиндекарбоксилазы может использоваться как критерий дифференциации видов Klebsiella и Enterobacter: Klebsiella неподвижны и не образуют орнитиндекарбоксилазу, тогда как Enterobacter подвижны и обычно образуют орнитиндекарбоксилазу, за исключением Enterobacter agglomerans.

Типы образцов:

• пищевые продукты и молочные образцы;
• пробы воды.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Основа содержит пептон и экстракт HiVeg®, полученные из растительного сырья вместо пептонов животного происхождения, поэтому приготовленная среда не связана с рисками BSE/TSE. Компоненты HiVeg® обеспечивают среду азотистыми и углеродсодержащими соединениями, аминокислотами с длинной цепью и другими питательными веществами, необходимыми для роста бактерий.

Декстроза является сбраживаемым углеводом, а пиридоксаль — кофактором фермента декарбоксилазы. Бромкрезоловый пурпурный и крезоловый красный используются как индикаторы pH.

При внесении бактерий, сбраживающих декстрозу, образуется кислота и pH среды снижается. Цвет индикатора изменяется с пурпурного на жёлтый. Кислая реакция стимулирует активность фермента декарбоксилазы:

• при декарбоксилировании лизина образуется кадаверин;
• при декарбоксилировании орнитина образуется путресцин;
• аргинин сначала гидролизуется до орнитина, который затем декарбоксилируется с образованием путресцина.

Образование аминов повышает pH среды и изменяет цвет индикатора с жёлтого на пурпурный. Если микроорганизм не образует соответствующий фермент, среда остаётся кислой и сохраняет жёлтую окраску.

Каждый исследуемый изолят также необходимо инокулировать в пробирку с основой декарбоксилазного бульона Мёллера без добавления аминокислоты.

Приготовление среды и методика проведения

1. Приостановите 10,52 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 10 г одной из требуемых L-аминокислот: L-лизина, L-аргинина, L-орнитина или другой L-аминокислоты.
3. При использовании DL-аминокислот применяйте концентрацию 2 %.
4. При добавлении L-орнитина выполните повторную корректировку pH.
5. При необходимости нагрейте смесь для полного растворения среды.
6. Разлейте среду по 5 мл в пробирки с завинчивающимися крышками.
7. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 10 мин.
8. Инокулированные пробирки защитите от контакта с воздухом слоем стерильного минерального масла.

Контакт с воздухом может вызвать защелачивание поверхности среды и сделать результат теста недействительным. Покрытие среды минеральным маслом необходимо для получения корректных результатов.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно применяемым методическим руководствам.

Для проб воды используйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно методическим руководствам и местным нормативным требованиям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

• Некоторые требовательные микроорганизмы могут давать замедленную реакцию.
• Покрытие среды минеральным маслом является обязательным условием получения корректных результатов.

Контроль качества

Ожидаемые характеристики среды:

• Внешний вид порошка: однородный, свободно сыпучий порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор пурпурного цвета без осадка в пробирках.
• Реакция: реакция водного раствора концентрацией 1,05 % масс./об. при 25 °C; pH 6,0 ± 0,2.
• Диапазон pH: 5,80–6,20.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдали после инкубации при 35–37 °C в течение не более 4 суток с добавлением соответствующих аминокислот и покрытием стерильным минеральным маслом.

* Соответствующие номера WDCM.

Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хран