HiMedia MV386-500G Основа HiVeg агара Макбрайда для листерий

Основа сухой питательной среды HiVeg агара Макбрайда для листерий HiMedia MV386-500G для селективного выделения и культивирования видов Listeria. Применяется для анализа различных образцов, включая молочные продукты и клинический материал; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения

Среда предназначена для выделения Listeria из клинических образцов и пищевых продуктов, включая сырое молоко. Использование растительных пептонов в составе HiVeg® исключает риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией).

Механизм селективности:

• HiVeg® гидролизат № 1 и HiVeg® экстракт обеспечивают азот, углерод, серу и микроэлементы, необходимые для роста Listeria.
• Фенилэтиловый спирт подавляет рост грамотрицательных бактерий, селективно ингибируя синтез ДНК.
• Глицин подавляет рост ряда грамположительных и грамотрицательных бактерий, включая Escherichia coli и Enterococcus faecalis.
• Хлорид лития обладает дополнительной антибактериальной активностью.
• Дополнительная селективность достигается путем добавления добавки Макбрайда (McBride Listeria Supplement FD070).

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 46,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 lbs) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. До начала застывания асептически добавьте стерильную дефибринированную кровь до конечной концентрации 5 % и добавьте стерилизованную фильтрованием добавку Макбрайда (McBride Selective Supplement FD070).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Процедура выделения и интерпретация

Для повышения эффективности обнаружения L. monocytogenes рекомендуется предварительное обогащение в жидких средах:

• Одноэтапный метод: инокуляция материала непосредственно в селективный бульон HiVeg® для листерий (MV889).
• Двухэтапный метод: инокуляция в обогатительную среду HiVeg® (UVM) (MV890A) с инкубацией при температуре +4 °C в течение нескольких недель («холодное обогащение»), затем перенос в вторичный обогатительный бульон Фрейзера HiVeg® (MV1083) и последующий посев на агар Макбрайда.

Интерпретация результатов: Предположительные колонии Listeria отбирают при трансмиссионном освещении под углом 45°. Колонии Listeria плотные, от белого до переливчато-белого цвета, напоминают «дроблёное стекло». Малые колонии могут иметь синеватый оттенок. Не-листерии обычно образуют желтовато-оранжевые колонии.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Физико-химические показатели

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: светло-янтарный прозрачный или очень слабо опалесцирующий гель.
  • После добавления 5 % крови: вишнёво-красный непрозрачный гель.
• Реакция (pH 4,6 % водного раствора при 25 °C): 7,3 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Спецификации производителя

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдались в анаэробной атмосфере с добавлением добавки Макбрайда (FD070) и 5 % v/v стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Область применения и ограничения

• Тип образцов: молочные продукты, клинические образцы.
• Ограничения: для окончательного подтверждения идентификации микроорганизма необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: при температуре +10…+30 °C в плотно закрытом контейнере. Из-за гигроскопичности продукта следует избегать попадания влаги для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные материалы подлежат стерилизации в автоклаве или сжиганию в соответствии с лабораторными правилами работы с инфекционными материалами.

Меры предосторожности

При работе со средой и культурами следует использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности.