HiMedia MV386-500G Основа HiVeg агара Макбрайда для листерий

Порошкообразная питательная среда HiMedia MV386-500G Основа HiVeg агара Макбрайда для листерий массой 500 г изготовлена на растительной основе без компонентов животного происхождения. Основа предназначена для селективного выделения и культивирования видов Listeria из молочных образцов; рабочая среда готовится с добавлением 5 % стерильной дефибринированной крови и селективной добавки McBride Listeria FD070.

Назначение

Основа HiVeg агара Макбрайда применяется для селективного выделения и культивирования видов Listeria из различных образцов, включая молочные продукты и сырое молоко.

Тип образца: молочные образцы.

Среда используется для выявления небольшого количества L. monocytogenes в пищевых образцах. McBride Listeria Agar может применяться как плотная среда с добавлением крови или без него.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

Технические характеристики

Принцип действия и интерпретация результатов

Листериоз часто вызывает аборты у крупного рогатого скота и овец. У человека заболевание может проявляться септицемией, энцефалитом и циркулирующим моноцитозом.

Listeria размножается в широком диапазоне температур — от 3 до 45 °C — и при pH от 5,0 до 9,6. Бактерия также сохраняется в пищевых продуктах со значениями pH за пределами этого диапазона, поэтому может выживать после различных технологических способов обработки пищевого сырья.

Агар McBride Listeria, рекомендованный APHA, применяется для выделения Listeria из клинических образцов и пищевых продуктов, включая сырое молоко. Основа McBride Listeria HiVeg® Agar Base изготовлена с использованием растительных пептонов вместо пептонов животного происхождения.

• Гидролизат HiVeg® № 1 и экстракт HiVeg® обеспечивают среду азотом, углеродом, серой и микроэлементами, необходимыми для роста Listeria.
• Фенилэтанол оказывает бактериостатическое действие на грамотрицательные бактерии, избирательно подавляя синтез ДНК.
• Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс среды.
• Глицин подавляет некоторые грамотрицательные и грамположительные бактерии, включая Escherichia coli и Enterococcus faecalis, которые относятся к распространённым сопутствующим контаминантам.
• Хлорид лития обладает антибактериальной активностью.
• Дополнительную селективность обеспечивает добавление селективной добавки McBride Listeria FD070.

Предварительное обогащение в жидкой среде в один или два этапа значительно повышает выявляемость L. monocytogenes.

Одноэтапный метод:

1. Инфицированный материал непосредственно засевают в основу селективного бульона для Listeria HiVeg® — Listeria Selective HiVeg® Broth Base (MV889).

Двухэтапный метод:

1. Инфицированный материал засевают в основу обогатительной среды для Listeria HiVeg® — Listeria Enrichment HiVeg® Medium Base (UVM) (MV890A).
2. Инкубируют при температуре 4 °C в течение нескольких недель. Это холодовое обогащение использует способность микроорганизма расти при низкой температуре.
3. Материал пересевают в основу вторичного обогатительного бульона Fraser HiVeg® — Fraser Secondary Enrichment HiVeg® Broth Base (MV1083).
4. После этого выполняют посев на селективный агар, например McBride Listeria Agar.

Предположительные колонии Listeria отбирают при трансиллюминации под углом 45°. Колонии Listeria имеют плотную белую или переливчато-белую окраску и напоминают измельчённое стекло. Мелкие колонии обычно имеют синюю окраску. Колонии, не относящиеся к Listeria, имеют желтовато-оранжевую окраску и подлежат дальнейшей очистке.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 46,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа или 1,03 бар, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду ниже 45–50 °C.
5. До начала гелеобразования асептически добавьте стерильную дефибринированную кровь до конечной концентрации 5 % об./об.
6. Добавьте фильтр-стерилизованную селективную добавку McBride FD070.
7. Тщательно перемешайте среду.
8. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают в анаэробной атмосфере с добавлением селективной добавки McBride Listeria FD070 и 5 % об./об. стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет: от кремового до жёлтого.

Состояние: однородный, сыпучий порошок.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Базальная среда: прозрачный гель светло-янтарного цвета, от прозрачного до слегка опалесцирующего.

После добавления 5 % об./об. стерильной крови: в чашках Петри образуется непрозрачный гель вишнёво-красного цвета.

Реакция среды

Реакцию определяют для водного раствора с концентрацией 4,6 % масса/объём при 25 °C.

pH: 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,10–7,50.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилиз