HiMedia MV352-100G C.L.E.D. HiVeg агар с индикатором Андраде

Агар HiMedia MV352-100G C.L.E.D. HiVeg с индикатором Андраде — сухая питательная среда для микробиологического анализа, предназначенная для выделения и дифференциации возбудителей инфекций мочевых путей по ферментации лактозы. Среда применяется для клинических образцов мочи, при этом Shigella может не расти, а инкубацию не следует проводить более 24 ч.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для выделения и дифференциации возбудителей инфекций мочевых путей на основании ферментации лактозы.

Тип образца: клинический образец.

Среда применяется в бактериологии мочи для стимуляции роста возбудителей инфекций мочевых путей, а также для процедур с тест-полосками и в качестве транспортной среды для посевного материала мочи методом погружения.

Принцип действия и интерпретация

Метод основан на применении среды C.L.E.D. — среды с пониженным содержанием электролитов, лактозой и цистином:

• Sandys описал методику предотвращения роения Proteus на агаризованной среде за счёт ограничения содержания электролитов.
• Mackey и Sandys модифицировали среду Sandys, заменив маннитол лактозой и сахарозой, а также повысив концентрацию агара и бромтимолового синего.
• В последующей модификации была сохранена лактоза, исключена сахароза и добавлен L-цистин для стимуляции роста карликовых колоний колиформных бактерий, зависимых от цистина.
• Полученная среда получила обозначение C.L.E.D. — Cystine-Lactose-Electrolyte-Deficient, то есть цистин-лактозная среда с пониженным содержанием электролитов.
• Индикатор Андраде, добавленный в состав среды, обеспечивает более выраженное различие между ферментирующими лактозу микроорганизмами (LF) и неферментирующими лактозу микроорганизмами (NLF), улучшает визуализацию колоний и помогает идентифицировать микроорганизмы.
• В составе C.L.E.D. HiVeg агара используются пептоны растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения.

При различных значениях pH цвет среды изменяется следующим образом:

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 36,25 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Состав

Состав, г/л:

Требования к посеву и инкубации

Для получения корректных результатов:

• инокулируйте среду сразу после сбора мочи;
• не инкубируйте среду более 24 ч;
• учитывайте, что при преобладании лактозоферментирующих микроорганизмов вся среда может стать розовой, что маскирует присутствие неферментирующих лактозу микроорганизмов;
• низкий pH мочи — менее 5 — может приводить к заниженному количеству микроорганизмов в образцах инфицированных пациентов;
• предварительное начало антибиотикотерапии также может приводить к низкому количеству микроорганизмов в моче.

Ограничения

1. Выделение микроорганизмов зависит от их количества в моче.
2. Среду необходимо инокулировать сразу после сбора мочи.
3. Shigella может не расти на этой среде.
4. Для получения корректных результатов среду не следует инкубировать более 24 ч: при преобладании лактозоферментирующих микроорганизмов вся среда может стать розовой и замаскировать присутствие неферментирующих лактозу микроорганизмов.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.
# Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Контроль качества

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до серовато-жёлтого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель зеленовато-синего цвета.

Реакция: реакция водного раствора с концентрацией 3,62 % масс./об. при 25 °C; pH 7,5 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,30–7,70.

Ожидаемые рабочие характеристики обеспечиваются при использовании среды в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель/артикул: MV352-100G
• Назначение изделия: агар
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Масса: 100 г
• Материал упаковки: ПЭВП (HDPE)
• Конечный pH при 25 °C: 7,5 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,30–7,70

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Условия хранения: в плотно закрытой ёмкости, в сухом проветриваемом помещении
• Защита при хранении: от экстремальных температур и источников воспламенения
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии. Продукт обладает гигроскопичностью; при недостаточно плотном закрытии или неправильном хранении возможно образование комков. После каждого использования ёмкость следует герметично закрывать.

Обращение с образцами и безопасность

При работе с клиническими образцами применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными руководствами.

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте надлежащие микробиологические лабораторные практики и стандартные меры предосторожности. Дополнительные требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками обращения с инфекционными материалами.

Технические особенности состава

Использование пептонов растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения является конструктивным отличием этой модификации среды C.L.E.D.; состав не содержит компонентов животного происхождения и основан на компонентах HiVeg®.

Комплект поставки

• Сухая питательная среда HiMedia MV352-100G C.L.E.D. HiVeg с индикатором Андраде, 100 г.