HiMedia MV331-500G Основа HiVeg агара Вильсона-Блэра

Основа питательной среды HiVeg агара Вильсона-Блэра HiMedia MV331-500G на растительной основе. Применяется для выделения видов Salmonella, в особенности Salmonella Typhi, из клинических образцов, проб пищевых продуктов, молочных продуктов и воды.

Принцип измерения

Среда обладает высокой селективностью в отношении Salmonella и подавляет рост колиформ, Proteus и Shigella. В составе среды используются растительные пептоны (HiVeg®), что исключает риски, связанные с БЭП/ТГЭ (BSE/TSE).

Действие компонентов:

• Специальный пептон HiVeg® и экстракт HiVeg®: источники азота, углерода и питательных веществ.
• Краситель бриллиантовый зеленый: ингибирует рост всех грамположительных бактерий.
• Декстроза: ферментируемый углевод.
• Сульфат железа (II): способствует образованию H₂S.
• Висмут: тяжелый металл, подавляющий рост большинства грамотрицательных энтеробактерий, кроме Salmonella.
• Гидрофосфат натрия: обеспечивает буферизацию среды.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.

Виды Salmonella в присутствии висмута, сульфита, декстрозы и сульфата железа восстанавливают последний до сульфида железа, что проявляется в виде черных колоний.

Методика приготовления и анализа

Приготовление базовой среды

1. Растворить 60,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. В стерильную расплавленную основу добавить 4 мл 1% раствора бриллиантового зеленого и 70 мл селективного реагента.

Приготовление селективного реагента

Реагент готовится путем смешивания четырех отдельных растворов:

• Раствор 1: 40 г сульфита натрия в 100 мл дистиллированной воды.
• Раствор 2: 21 г двухзамещенного фосфата натрия в 100 мл дистиллированной воды.
• Раствор 3: 12,5 г цитрата висмута-аммония в 100 мл дистиллированной воды.
• Раствор 4: 0,96 г сульфата железа (II) в 20 мл дистиллированной воды с добавлением 2 капель соляной кислоты.

После объединения растворов смесь необходимо прокипятить до появления сланцево-серого цвета. После этого среду тщательно перемешивают и разливают в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Вес: 500 г
• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 3,0% агаром.
• Цвет и прозрачность: базовая среда — светло-желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель; после добавления реагентов — зеленовато-желтый непрозрачный гель.
• pH водного раствора (6,0% масс./об. при 25 °C): 7,3 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 1% бриллиантового зеленого и селективных реагентов после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

*Соответствующие номера WDCM.

Область применения

Среда предназначена для анализа следующих типов образцов:

• Пищевые и молочные продукты.
• Пробы воды.

При сборе и обработке проб следует руководствоваться соответствующими методическими указаниями и местными стандартами.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения применения

1. Не хранить готовую среду в холодильнике (4 °C) более 2 суток, так как среда приобретает зеленый цвет и теряет селективность.
2. Результаты анализа требуют подтверждения с помощью дополнительных биохимических и серологических тестов.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности.
• Загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию перед утилизацией.