Питательная агаризованная среда HiMedia MV317-500G EMB HiVeg агар с растительными пептонами, не содержащая компонентов животного происхождения. HiMedia MV317-500G EMB HiVeg агар предназначен для дифференциального выделения грамотрицательных кишечных бацилл из образцов пищевых продуктов и воды; готовую среду хранят при 20–30 °C, сухой порошок — при 10–30 °C.

Назначение

Среда рекомендована для дифференциального выделения грамотрицательных кишечных бацилл из различных образцов, включая пищевые продукты и воду.

• Назначение изделия: агар
• Масса: 500 г
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Материал упаковки: ПНД (полиэтилен высокой плотности)

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 35,96 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Перемешайте до получения однородной суспензии.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Не допускайте перегрева.
6. Охладите среду до 45–50 °C.
7. Встряхните среду для окисления метиленового синего, то есть восстановления его синего цвета, и суспендирования хлопьевидного осадка.

Если посев на EMB HiVeg агар выполняется в тот же день, среду допускается использовать без автоклавной стерилизации.

Принцип действия и интерпретация

EMB HiVeg агар приготовлен с использованием растительных пептонов вместо пептонов животного происхождения, что исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE).

Эозин и метиленовый синий в ограниченной степени подавляют рост грамположительных бактерий. Эти красители выполняют функцию дифференциальных индикаторов при ферментации углеводов. Соотношение эозина и метиленового синего составляет приблизительно 6:1.

Сахароза добавлена в среду как альтернативный источник углеводов для типичных лактозоферментирующих грамотрицательных бацилл, которые иногда не ферментируют лактозу или ферментируют её медленно.

Колонии колиформных бактерий приобретают пурпурно-чёрную окраску вследствие поглощения комплекса метиленового синего и эозина при снижении pH. Комплекс красителей абсорбируется колонией. Неферментирующие микроорганизмы, вероятно, повышают pH окружающей среды за счёт окислительного дезаминирования белка; это приводит к растворению комплекса метиленового синего и эозина и формированию бесцветных колоний.

Некоторые штаммы видов Salmonella и Shigella не растут в присутствии эозина и метиленового синего. Для подтверждения выделенных изолятов требуются дополнительные тесты.

Функции компонентов

• Пептон HiVeg®: источник углерода, азота и других необходимых питательных веществ для роста.
• Лактоза и сахароза: источники энергии в форме ферментируемых углеводов.
• Эозин Y и метиленовый синий: дифференциальные индикаторы.
• Фосфат: буфер среды.

Посев и инкубация

Исследуемый образец можно непосредственно штрихом нанести на чашки с подготовленной средой.

• Инкубация засеянных чашек: проводить в защищённом от света месте.
• Для получения изолированных колоний: соблюдать стандартные процедуры посева и инкубации.
• Параллельная среда: одновременно с EMB HiVeg агаром следует инокулировать неселективную питательную среду.
• Подтверждение идентификации: для выделенных колоний необходимо дополнительно выполнить подтверждающие тесты.

Тип образца

• Образцы пищевых продуктов.
• Образцы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для образцов воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

Храните среду вдали от света во избежание фотоокисления.

Ограничения применения

Из-за вариаций питательных свойств некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-розовый или фиолетовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри формируется красновато-фиолетовый опалесцирующий гель с зеленоватым оттенком и мелкодисперсным осадком.

Реакция

Реакция водного раствора концентрацией 3,6 % м/о при 25 °C:

• pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия: хранить продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон.
• Причина необходимости плотного закрывания: гигроскопичность продукта и предотвращение образования комков.
• Требования к помещению: сухое, проветриваемое место, защищённое от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования: плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики: оптимальны при использовании в течение установленного срока годности.

Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Оценка рабочих характеристик

Ожидаемые рабочие характеристики обеспечиваются при использовании среды в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах установленного срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюда