HiMedia MV317-100G EMB HiVeg агар

Питательная агаризованная среда HiMedia MV317-100G EMB HiVeg агар производства HiMedia предназначена для дифференциального выделения грамотрицательных кишечных палочек из различных образцов. HiMedia MV317-100G применяют для анализа пищевых продуктов и воды; хранение сухой среды выполняют при 10–30 °C.

Назначение

Среда рекомендована для дифференциального выделения грамотрицательных энтеробактерий из различных образцов.

Типы исследуемых образцов

• Пищевые продукты.
• Вода.

Состав

Расчётный состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Принцип действия и интерпретация результатов

EMB HiVeg агар изготовлен с использованием пептонов растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения, благодаря чему среда не связана с рисками BSE/TSE.

Эозин-метиленовый синий (EMB) агар первоначально разработан Holt-Harris и Teague, а позднее модифицирован Levine. Состав среды объединяет формулы Levine и Holt-Harris и Teague:

• пептон и фосфат добавлены в соответствии с формулой Levine;
• два углевода включены согласно формуле Holt-Harris и Teague;
• соотношение эозина и метиленового синего составляет приблизительно 6:1.

Метиленовый синий и эозин Y в ограниченной степени подавляют рост грамположительных бактерий. Оба красителя служат дифференциальными индикаторами, реагирующими на ферментацию углеводов.

Сахароза добавлена как альтернативный источник углеводов для типичных лактозоферментирующих грамотрицательных палочек, которые иногда не ферментируют лактозу или ферментируют её медленно.

Колонии колиформных бактерий приобретают пурпурно-чёрную окраску за счёт поглощения комплекса метиленового синего и эозина при снижении pH. Комплекс красителей абсорбируется колонией. Неферментирующие микроорганизмы, вероятно, повышают pH окружающей среды за счёт окислительного дезаминирования белка; это приводит к растворению комплекса метиленового синего и эозина и образованию бесцветных колоний.

Некоторые штаммы видов Salmonella и Shigella не растут в присутствии эозина и метиленового синего. Для подтверждения выделенных микроорганизмов требуются дополнительные тесты.

Функции компонентов среды:

• Пептон HiVeg: источник углерода, азота и других необходимых питательных веществ для роста.
• Лактоза и сахароза: источники энергии в форме ферментируемых углеводов.
• Эозин Y и метиленовый синий: дифференциальные индикаторы.
• Фосфат: буферный компонент среды.

Методика приготовления и применения

1. Приготовьте суспензию из 35,96 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Перемешайте до получения однородной суспензии.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин. Не допускайте перегрева.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Встряхните среду для окисления метиленового синего, то есть восстановления синей окраски, и суспендирования хлопьевидного осадка.

Если посев на EMB агар выполняется в тот же день, среду можно использовать без автоклавирования.

Исследуемую пробу можно непосредственно штрихом наносить на чашки со средой. Для получения изолированных колоний следует соблюдать стандартные процедуры посева. Одновременно с EMB HiVeg агаром необходимо инокулировать неселективную среду. Для идентификации изолированных колоний проводят дополнительные подтверждающие тесты.

Инокулированные чашки следует инкубировать в защищённом от света месте.

Пробоотбор и обращение с образцами

• Для пищевых продуктов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам.
• Для воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и местным нормативным требованиям.
• После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой. При работе используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

Храните среду вдали от света во избежание фотоокисления.

Ограничения применения

Из-за различий в питательных потребностях отдельные штаммы могут демонстрировать слабый рост.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-розовый или пурпурный однородный свободно сыпучий порошок.

Гелеобразование

Прочный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется красновато-пурпурный опалесцирующий гель с зеленоватым оттенком и мелкодисперсным осадком.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 3,6 % мас./об. при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.
# Ранее организм был известен как Enterobacter aerogenes.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 20–30 °C.
• Контейнер должен быть плотно закрыт.
• Используйте продукт до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.