HiMedia MV317-100G EMB HiVeg агар

Дифференциально-диагностическая среда EMB HiVeg агар HiMedia MV317-100G для изоляции грамотрицательных энтеробактерий из различных проб. Используется для анализа образцов пищевой продукции и воды; содержит растительные пептоны, что исключает риски BSE/TSE.

Принцип измерения

Среда EMB HiVeg (эозин-метиленовый синий агар) представляет собой комбинацию формул Левина, а также Холта-Харриса и Тига. Метиленовый синий и эозин-Y в определенном соотношении (примерно 6:1) частично подавляют рост грамположительных бактерий и служат дифференциальными индикаторами ферментации углеводов.

• Колиформы: при падении pH поглощают комплекс красителей метиленового синего и эозина, в результате чего образуются пурпурно-черные колонии.
• Неферментирующие микроорганизмы: повышают pH окружающей среды за счет окислительного дезаминирования белков, что приводит к растворению комплекса красителей и образованию бесцветных колоний.
• Особенности: некоторые штаммы Salmonella и Shigella могут не расти в присутствии данных красителей, что требует проведения дополнительных подтверждающих тестов.

Лактоза и сахароза выступают в качестве источников энергии (ферментируемых углеводов), растительный пептон HiVeg обеспечивает углеродом, азотом и питательными веществами, а фосфат служит буфером.

Методика приготовления и использования

1. Приготовление: суспендируйте 35,96 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Растворение: перемешайте до однородности и нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизация: стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут. Избегайте перегрева.
4. Подготовка к посеву: охладите среду до 45–50 °C и встряхните для окисления метиленового синего (восстановления синего цвета) и распределения хлопьевидного осадка.
5. Посев: образец можно наносить непосредственно на поверхность агаризованной среды.
6. Инкубация: посеянные чашки следует инкубировать в защищенном от света месте.

Примечание: если посев производится в день приготовления, среду можно использовать без автоклавирования.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от светло-розового до пурпурного цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,35 % раствором агара.
• Цвет и прозрачность готовой среды: красно-пурпурный опалесцирующий гель с зеленоватым оттенком и мелкодисперсным осадком.
• Реакция (pH): 7,00–7,40 (при 25 °C значение pH 3,6 % водного раствора составляет 7,2 $\pm$ 0,2).

Состав (г/л)

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Область применения и ограничения

Среда рекомендуется для дифференциального выделения грамотрицательных энтеробактерий из проб пищевых продуктов и воды.

Ограничения: из-за вариаций в питательном составе некоторые штаммы могут демонстрировать слабый рост. Для полноценной идентификации изолятов рекомендуется использовать данную среду в сочетании с неселективными питательными средами и проводить подтверждающие тесты.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: 20–30 °C.
• Особенности: хранить в сухом вентилируемом месте, вдали от источников света (для предотвращения фотоокисления) и источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта плотно закрывайте крышку во избежание комкования.

Меры предосторожности и утилизация

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой. Используйте средства индивидуальной защиты: перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.