HiMedia MV299-500G Сорбитолово-железный HiVeg агар

Дифференциально-диагностическая среда HiMedia MV299-500G Сорбитолово-железный HiVeg агар для идентификации энтеропатогенных штаммов Escherichia coli. Применяется для выделения штаммов E. coli, не ферментирующих сорбитол; состав среды основан на растительных пептонах (HiVeg), что исключает риски BSE/TSE.

Принцип измерения

Среда представляет собой модификацию железо-глюкозного агара Клиглера, в которой декстроза и лактоза заменены на D-сорбитол. Идентификация патогенных штаммов E. coli проводится на основании их неспособности ферментировать сорбитол и отсутствия продукции сероводорода (H₂S).

• Источники питания: HiVeg-экстракт и HiVeg-пептон № 3 обеспечивают необходимые углерод, азот, витамины и минералы.
• Углевод: D-сорбитол служит ферментируемым источником углеводов.
• Индикатор pH: Феноловый красный определяет ферментацию сорбитола и последующее закисление среды.
• Детекция H₂S: Комбинация цитрата железа-аммония и тиосульфата натрия позволяет обнаружить образование сероводорода, что проявляется в виде почернения среды.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Растворить 46,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлить по пробиркам и стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. Оставить пробирки остывать в наклонном положении для формирования скоса.

Процедура посева и интерпретация

1. Посев: Бесцветные колонии с сорбитолового HiVeg-агара (MV298) инокулируют в среду, выполняя укол в столбик и посев на скос.
2. Инкубация: 18–24 часа при температуре 35–37 °C.
3. Оценка результатов:
   • Патогенные штаммы E. coli: не вызывают ни закисления (изменения цвета), ни почернения среды.
   • Обычные штаммы E. coli: вырабатывают кислоту и газ.
   • Виды Proteus: могут или не могут вызвать почернение среды, могут вырабатывать кислоту в столбике; для дифференциации требуется перенос на среду для определения уреазы (положительный тест).
   • Примечание: Некоторые патогенные штаммы после лабораторного культивирования могут приобрести способность ферментировать сорбитол. В таких случаях рекомендуется перенос культур на железо-глюкозный HiVeg-агар (MV078), трёхсахарный железный HiVeg-агар (MV021) или среду для определения уреазы.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 2,0% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: красный прозрачный или слегка опалесцирующий гель (в пробирках со скосом).
• Реакция: pH 4,6% водного раствора при 25 °C составляет 7,6 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 7,40–7,80.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Область применения

Рекомендуется для анализа проб пищевых продуктов. Используется для культурной идентификации и дифференциации энтеропатогенных штаммов E. coli (включая ETEC, EIEC, VTEC и EPEC).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания.
• Хранение готовой среды: при температуре 20–30 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования.

Ограничения и меры предосторожности

• Ограничения: для окончательного подтверждения результатов необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.
• Меры безопасности: использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. Соблюдать стандартные правила микробиологической работы с образцами и культурами.
• Утилизация: уничтожение использованных сред осуществляется путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.