HiMedia MV298-500G Сорбитоловый HiVeg агар (агар МакКонки с сорбитолом)

Питательная микробиологическая среда HiMedia MV298-500G Сорбитоловый HiVeg агар (агар МакКонки с сорбитолом) — сухой порошок массой 500 г для выделения и идентификации энтеропатогенных штаммов Escherichia coli. Среда предназначена для анализа пищевых и молочных образцов, при этом подтверждение патогенных штаммов Escherichia coli O157:H7 требует проведения дополнительных биохимических тестов.

Назначение

Среда рекомендована для выделения и идентификации энтеропатогенных штаммов Escherichia coli, связанных с диареей у детей грудного возраста.

Тип образца: пищевые продукты и молочные образцы.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MV298-500G
• Назначение изделия: агар
• Тип продукта: HiVeg™
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 500 г
• Происхождение пептонов: растительное, без компонентов животного происхождения
• Тип упаковки: HDPE — полиэтилен высокой плотности
• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 20–30 °C
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,90–7,30

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия заданным рабочим параметрам среды.

Принцип действия и интерпретация

Сорбитоловый агар МакКонки основан на рецептуре, описанной Раппапортом и Хенигом.

Среда предназначена для выделения энтеропатогенной Escherichia coli O157:H7, которая ферментирует лактозу, но не ферментирует сорбитол, вследствие чего образует бесцветные колонии. Escherichia coli O157:H7 является патогенным для человека микроорганизмом, связанным с геморрагическим колитом, возникающим под действием шигоподобного токсина (SLT).

На стандартном агаре МакКонки с лактозой этот штамм невозможно отличить от других лактозоферментирующих штаммов Escherichia coli. В основе агара МакКонки с сорбитолом лактоза заменена сорбитолом. В отличие от большинства штаммов Escherichia coli, Escherichia coli O157:H7 медленно ферментирует сорбитол либо не ферментирует его вообще.

При росте Escherichia coli O157:H7 на агаре МакКонки с сорбитолом образуются бесцветные колонии, тогда как большинство представителей кишечной флоры ферментируют сорбитол и формируют розовые колонии. Такое различие позволяет распознавать Escherichia coli O157:H7 по цвету колоний.

Сорбитоловый HiVeg® агар изготовлен с использованием пептонов растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения, что исключает риски BSE/TSE, связанные с компонентами животного происхождения.

• Пептон HiVeg®™ и пептон HiVeg®™ № 3 обеспечивают микроорганизмы необходимыми питательными веществами: азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, минералами, витаминами и микроэлементами.
• Кристаллический фиолетовый и синтетическое моющее вещество подавляют рост грамположительных бактерий.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Нейтральный красный выполняет функцию индикатора.
• D-сорбитол является ферментируемым углеводом.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 50,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Не допускайте перегрева.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Сбор и обработка образцов

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные соответствующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в индивидуальных паспортах безопасности.

Ограничения применения

• Сорбитоловый агар МакКонки не следует использовать как единственный метод обнаружения патогенных штаммов Escherichia coli O157:H7, поскольку некоторые нетоксигенные штаммы также не ферментируют сорбитол.
• Для окончательного подтверждения необходимо провести дополнительные биохимические тесты.

Контроль качества

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Внешний вид порошка

Однородный свободнотекучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель пурпурно-красного цвета.

Реакция

Реакция 5,0%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,1 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Храните сухую среду в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C.
• Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.
• После вскрытия тщательно закрывайте флакон и храните продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Для сохранения рабочих характеристик используйте продукт в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, соприкасавшиеся с образцами, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.