HiMedia MV277-500G Основа HiVeg бульона с маннитом для коагулазы

Основа сухой питательной среды HiMedia MV277-500G HiVeg бульона с маннитом для коагулазы. Применяется для одновременного определения продукции коагулазы и ферментации маннита при дифференциации стафилококков; вес упаковки 500 г.

Принцип измерения

Бульон HiVeg с маннитом и коагулазой используется для выделения Staphylococcus aureus из клинических образцов и дифференциации S. aureus от других видов стафилококков на основании способности продуцировать коагулазу и ферментировать маннит.

В данной среде растительные пептоны заменяют пептоны животного происхождения, что исключает риски заражения БОВГЕ/ТГЭ (BSE/TSE). При ферментации маннита pH среды снижается, что фиксируется индикатором феноловым красным (цвет среды меняется на жёлтый). Рост коагулазоположительных организмов приводит к коагуляции плазмы, в результате чего прозрачный бульон становится опалесцирующим (непрозрачным).

Продукция коагулазы зависит от наличия ферментируемого сахара (маннита) и белкового фактора, содержащегося в инфузории HiVeg и добавленной плазме крови.

Область применения

Среда предназначена для анализа проб пищевых продуктов и молочной продукции. Используется для предварительной идентификации патогенных стафилококков.

Методика проведения анализа

1. Приготовление основы:
   • Суспендируйте 35,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
   • При необходимости нагрейте до полного растворения.
   • Стерилизуйте в автоклаве при температуре 118–121 °C в течение 15 минут.
   • Охладите до 45–50 °C.
2. Подготовка рабочей среды:
   • Непосредственно перед использованием добавьте в базовую среду 7–15 % (об/об) стерильной, предварительно протестированной кроличьей плазмы (коагулязионной плазмы).
   • Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным пробиркам.
3. Процедура тестирования:
   • Используйте среду в объёме 2–5 мл на пробу.
   • Инокулируйте среду, добавив около 2 капель исследуемого организма.
   • Инкубируйте при температуре 37 °C.
   • Проведите осмотр через 2–3 часа, а также через 4–5 часов инкубации.
   • Параллельно с тестами на ферментацию необходимо использовать неинокулированные контрольные пробирки.
   • Для определения продукции газа в пробирку с whoever средой поместите маленькую перевернутую трубку Дурхама.

Интерпретация результатов

• Положительный результат (S. aureus): изменение цвета среды на жёлтый (ферментация маннита) и образование сгустка/непрозрачности (продукция коагулазы).
• Отрицательный результат (S. epidermidis): отсутствие изменения цвета среды и отсутствие сгустка.
• Коагулазоотрицательные виды: могут ферментировать маннит (среда станет жёлтой), но сгусток не образуется.
• Особенности: мутантные или старые культуры S. aureus могут проявлять слабую коагулазную активность; такие культуры следует перепосеять на свежий субстрат и проверить повторно. Escherichia coli ферментирует маннит и может давать слабую положительную реакцию на коагулазу.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 7–15 % (об/об) стерильной протестированной коагулязионной плазмы после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом помещении, защищённом от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования.

Ограничения и меры предосторожности

• Среда является универсальной и может не поддерживать рост некоторых требовательных (fastidious) микроорганизмов.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте стандартные правила микробиологической безопасности.
• Используйте защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Загрязнённые материалы перед утилизацией должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.