HiMedia MV277-500G Основа HiVeg бульона с маннитом для коагулазы

Порошковая питательная среда HiMedia MV277-500G Основа HiVeg бульона с маннитом для коагулазы производства HiMedia, расфасованная по 500 г, не содержит компонентов животного происхождения. Применяется с плазмой кролика для одновременного выявления продукции коагулазы и ферментации маннита при дифференциации стафилококков в пищевых и молочных образцах; готовую среду хранят при 2–8 °C.

Назначение

Основа HiVeg бульона с маннитом для коагулазы с добавлением плазмы предназначена для:

• одновременного выявления продукции коагулазы и ферментации маннита при дифференциации стафилококков;
• выделения Staphylococcus aureus из клинических образцов;
• дифференциации Staphylococcus aureus от других видов по продукции коагулазы и ферментации маннита;
• исследования пищевых и молочных образцов.

Среда является основой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Основа HiVeg бульона с маннитом для коагулазы предназначена для выделения Staphylococcus aureus из клинических образцов и дифференциации Staphylococcus aureus от других видов по двум признакам: продукции коагулазы и ферментации маннита.

Среда одновременно выявляет ферментацию маннита и продукцию коагулазы стафилококками. Наблюдаемые в среде ферментация маннита и продукция коагулазы служат признаками предполагаемой идентификации патогенных стафилококков.

Продукция коагулазы зависит от наличия ферментируемого сахара, в данном случае маннита, а также белкового фактора в настое HiVeg и плазме крови. При ферментации маннита pH среды снижается. Изменение pH определяется по феноловому красному: индикатор становится жёлтым, окрашивая среду в жёлтый цвет.

При росте коагулазоположительных микроорганизмов коагулированная плазма образует мутный бульон. Staphylococcus epidermidis, являющийся коагулазоотрицательным видом, не ферментирующим маннит, не изменяет цвет среды. Коагулазоотрицательные виды могут ферментировать маннит и вызывать появление жёлтой окраски, но помутнение из-за образования сгустка не формируется.

Образование газа можно определить, поместив небольшую перевёрнутую трубку Дюрхема в пробирку со средой.

Среда разработана на основе рецептуры Esber и Faulconer. В составе используются растительные пептоны вместо пептонов животного происхождения, что исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE). Среда также является подходящим субстратом для стафилококков и других требовательных бактерий.

Мутантные или старые культуры Staphylococcus aureus могут слабо продуцировать коагулазу. Такие культуры следует заново пересевать, используя свежую субкультуру, и повторно проверять.

Escherichia coli ферментирует маннит и может давать слабоположительную реакцию на коагулазу.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 35,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при 118–121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Непосредственно перед использованием добавьте в основу 7–15 % об./об. стерильной предварительно проверенной плазмы кролика, или коагулазной плазмы.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные пробирки.

Методика проведения теста

Для теста используют 2–5 мл среды после добавления приблизительно 12–15 % плазмы.

1. Внесите в пробирку около 2 капель исследуемого микроорганизма.
2. Инкубируйте при 37 °C.
3. Проведите первичную оценку через 2–3 ч инкубации.
4. Проведите повторную оценку через 4–5 ч инкубации.
5. Параллельно с ферментационными тестами подготовьте и исследуйте контрольные пробирки без инокуляции.

Тип образца

Пищевые и молочные образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MV277-500G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 500 г
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Тип продукта: HiVeg™
• Материал упаковки: полиэтилен высокой плотности (ПЭВП, HDPE)
• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Конечный pH при 25 °C: 7,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Концентрация водного раствора для определения реакции: 3,5 % масс./об. при 25 °C

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор красного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий, в пробирках.

Реакция среды

Реакция водного раствора концентрацией 3,5 % масс./об. при 25 °C соответствует pH 7,4 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч в среде с добавлением 7–15 % об./об. стерильной предварительно проверенной коагулазной плазмы.

* Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Храните сухой продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Приготовленную среду храните при 2–8 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом состоянии, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом