HiMedia MV277-100G Основа HiVeg бульона с маннитом для коагулазы

Питательная среда HiMedia MV277-100G Основа HiVeg бульона с маннитом — порошковая основа без компонентов животного происхождения с конечным pH 7,4 ± 0,2. Основа применяется с кроличьей плазмой для одновременного выявления продукции коагулазы и ферментации маннита при дифференциации стафилококков; среда общего назначения может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Назначение

Основа HiVeg бульона с маннитом HiMedia MV277-100G предназначена для приготовления среды с добавлением плазмы при одновременном выявлении продукции коагулазы и ферментации маннита в процессе дифференциации стафилококков.

Среда используется для выделения Staphylococcus aureus из клинических образцов и дифференциации Staphylococcus aureus от других видов по продукции коагулазы и ферментации маннита. Тип исследуемых образцов: пищевые продукты и молочные образцы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Среда основана на рецептуре Esber и Faulconer. В составе используются пептоны растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения; это исключает риски BSE/TSE, связанные с компонентами животного происхождения.

Основа одновременно выявляет ферментацию маннита и продукцию коагулазы стафилококками. Наблюдаемая продукция коагулазы и ферментация маннита являются предположительным признаком патогенных стафилококков.

Продукция коагулазы зависит от наличия сбраживаемого сахара, в данном случае маннита, а также белкового фактора в настое HiVeg®™ и плазме крови. При ферментации маннита pH среды снижается. Изменение pH определяется по изменению цвета фенолового красного: среда желтеет.

Рост коагулазоположительных микроорганизмов вызывает коагуляцию плазмы и образование мутного бульона. Staphylococcus epidermidis — коагулазонегативный вид, не ферментирующий маннит, поэтому цвет среды не изменяет. Коагулазонегативные виды могут ферментировать маннит и вызывать появление жёлтой окраски, но помутнение вследствие коагуляции плазмы при этом не образуется.

Образование газа определяют, помещая небольшую перевёрнутую трубку Дюрхема в пробирку со средой.

Мутантные или старые культуры Staphylococcus aureus могут продуцировать коагулазу слабо. Такие культуры необходимо повторно пересеять на свежую среду и провести проверку повторно. Escherichia coli ферментирует маннит и может давать слабоположительную реакцию на коагулазу.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 35,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте среду автоклавированием при 118–121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Непосредственно перед использованием добавьте в базовую среду 7–15 % об./об. стерильной предварительно проверенной кроличьей плазмы (коагулазной плазмы).
6. Тщательно перемешайте среду и разлейте в стерильные пробирки.

Методика проведения анализа

1. Используйте среду в объёме 2–5 мл после добавления приблизительно 12–15 % плазмы.
2. Инокулируйте среду добавлением приблизительно 2 капель исследуемого микроорганизма.
3. Инкубируйте при 37 °C.
4. Проведите оценку через 2–3 ч инкубации, а затем повторно через 4–5 ч.
5. Параллельно с ферментационными тестами используйте неинокулированные контрольные пробирки.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный свободно сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-розового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор красного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий, в пробирках.

Реакция среды

Реакция 3,5 % масс./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 7–15 % об./об. стерильной предварительно проверенной коагулазной плазмы и инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными процедурами. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Условия хранения и срок годности

Храните продукт при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков. Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После каждого использования плотно закрывайте контейнер. Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности при работе с образцами и культурами. Руководствуйтесь требованиями безопасности, приведёнными в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов автоклавированием и/или сжиганием. При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззаразить и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Ограничения применения

Среда является средой общего назначения и может не поддерживать рост требовательных микроорганизмов.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.