HiMedia MV277-100G Основа HiVeg бульона с маннитом для коагулазы

Основа HiVeg бульона с маннитом для коагулазы HiMedia MV277-100G предназначена для одновременного выявления продукции коагулазы и ферментации маннита. Среда используется для дифференциации стафилококков, в частности для выделения Staphylococcus aureus из клинических образцов, проб пищевых продуктов и молочной продукции.

Принцип измерения

Основа Coagulase Mannitol HiVeg®™ Broth Base позволяет дифференцировать Staphylococcus aureus от других видов стафилококков на основании способности продуцировать коагулазу и ферментировать маннит.

При ферментации маннита pH среды снижается, что фиксируется индикатором феноловым красным: цвет среды меняется с красного на жёлтый. Продукция коагулазы приводит к коагуляции плазмы, в результате чего прозрачный бульон становится опаковым.

Процесс продукции коагулазы зависит от наличия ферментируемого сахара (маннита) и белкового фактора, присутствующего в инфузии HiVeg®™ и добавляемой плазме крови.

Интерпретация результатов:

• Staphylococcus aureus: рост, изменение цвета среды на жёлтый (ферментация маннита) и образование сгустка (положительная коагулазная активность).
• Staphylococcus epidermidis: рост, отсутствие изменения цвета среды и отсутствие сгустка.
• Коагулаза-отрицательные виды: могут ферментировать маннит (жёлтый цвет), но сгусток не образуется.
• Escherichia coli: ферментирует маннит и может проявлять слабую коагулазную активность.

Методика проведения анализа

1. Приготовление основы:
   • Суспендируйте 35,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
   • При необходимости нагрейте до полного растворения компонентов.
   • Стерилизуйте в автоклаве при температуре 118–121 °C в течение 15 минут.
   • Охладите до 45–50 °C.
2. Подготовка к использованию:
   • Непосредственно перед применением добавьте в базовую среду 7–15 % (об/об) стерильной, предварительно протестированной кроличьей плазмы (коагулазная плазма).
   • Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным пробиркам.
3. Процедура теста:
   • Используйте среду в объёме 2–5 мл на одну пробу.
   • Внесите около 2 капель исследуемого организма.
   • Инкубируйте при 37 °C.
   • Проведите осмотр через 2–3 часа, а также через 4–5 часов инкубации.
   • Параллельно с тестами на ферментацию следует использовать неинокулированные контрольные пробирки.
   • Для определения продукции газа в пробирку с средой можно поместить маленькую перевернутую трубку Дюрхама.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

• Происхождение компонентов: без использования продуктов животного происхождения (вегетарианская среда, Animal Free), что исключает риски BSE/TSE.
• Физическая форма: порошок.
• Цвет и прозрачность готовой среды: красный цвет, от прозрачного до слегка опалесцирующего раствора.
• pH водного раствора 3,5 % (вес/об) при 25 °C: 7,4 ± 0,2 (диапазон 7,20–7,60).
• Внешний вид порошка: светло-жёлтый или светло-розовый однородный свободнотекущий порошок.
• Материал упаковки: ПНД (HDPE).

Культуральные характеристики

Характеристики определены при добавлении 7–15 % (об/об) стерильной протестированной коагулазной плазмы после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

Область применения и ограничения

Применяется для анализа проб пищевых продуктов и молочной продукции. Среда является универсальной и может не поддерживать рост некоторых требовательных (fastidious) организмов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, спецодежду и средства защиты глаз/лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности при работе с образцами и культурами.
• Загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию перед утилизацией.