HiMedia MV272-500G Основа HiVeg агара с маннитом для коагулазы

Основа HiVeg агара с маннитом для коагулазы HiMedia MV272-500G — сухая питательная среда на растительной основе. При добавлении плазмы используется для изоляции и дифференциации стафилококков из клинических образцов или для классификации чистых культур.

Принцип измерения и интерпретация

Среда предназначена для выделения Staphylococcus aureus из клинических образцов и его дифференциации от других видов на основании способности ферментировать маннит и вырабатывать коагулазу.

В основе лежит рецептура Эсбера и Фолконера. Использование растительных пептонов вместо животных делает среду безопасной (отсутствие рисков BSE/TSE).

Интерпретация результатов:

• Ферментация маннита: при расщеплении маннита pH среды вокруг колоний коагулаза-положительных микроорганизмов снижается. Индикатор бромкрезоловый пурпурный меняет цвет с фиолетового на жёлтый, образуя жёлтые зоны вокруг колоний.
• Продукция коагулазы: вокруг колоний коагулаза-положительных организмов формируется непрозрачная зона коагулированной плазмы.
• Staphylococcus epidermidis является коагулаза-отрицательным и не ферментирует маннит, поэтому цвет среды вокруг него не меняется.
• Коагулаза-отрицательные виды могут ферментировать маннит (жёлтая зона), но непрозрачная зона коагуляции при этом не образуется.

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 47,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 118–121 °C (давление $\approx$ 0,08–0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте в базовую среду 7–15 % (об/об) стерильной, предварительно проверенной кроличьей плазмы.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от светло-жёлтого до светло-серого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,45 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды: фиолетовый, слегка опалесцирующий гель в чашках Петри.
• Реакция: pH 4,7 % (масса/объем) водного раствора при 25 °C составляет 7,4 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Характеристики определены при добавлении 7–15 % (об/об) стерильной проверенной кроличьей плазмы, инкубация при 35–37 °C в течение 18–48 часов.

*Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Некоторые мутантные штаммы S. aureus могут давать слабую или отрицательную реакцию на коагулазу. В случае сомнений культуру следует перепосеять и проверить повторно.
2. Некоторые штаммы E. coli могут ферментировать маннит и давать слабую коагулаза-положительную реакцию.
3. Для дифференциации видов может потребоваться дополнительное окрашивание по Граму.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.

Меры предосторожности и утилизация

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой. Используйте защитные перчатки, спецодежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте стандартные правила микробиологической безопасности при работе с образцами и культурами.
• Утилизация: все загрязненные материалы, включая использованные среды, должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.