HiMedia MV272-500G Основа HiVeg агара с маннитом для коагулазы

Основа питательной среды HiMedia MV272-500G Основа HiVeg агара с маннитом для коагулазы — порошковая среда на растительной основе для выделения и дифференциации стафилококков. Применяется с плазмой для анализа образцов и классификации чистых культур; рабочая среда готовится с добавлением 7–15 % стерильной предварительно протестированной кроличьей плазмы и хранится при 10–30 °C в плотно закрытой таре.

Назначение

С плазмой среда предназначена для выделения и дифференциации стафилококков из образцов, а также для классификации чистых культур.

Среда используется для выделения Staphylococcus aureus из клинических образцов и дифференциации S. aureus от других видов по продукции коагулазы и ферментации маннита.

Состав

Состав скорректирован и стандартизирован для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Род Staphylococcus включает 28 принятых или предложенных видов, 14 из которых могут встречаться в клинических образцах человека. Стафилококки обычно обнаруживаются на коже и слизистых оболочках человека и животных.

Некоторые патогенные стафилококки человека и животных продуцируют фермент коагулазу. Выявление коагулазы используется в лаборатории для идентификации таких микроорганизмов.

Среда основана на рецептуре Esber и Faulconer. В составе используются растительные пептоны вместо пептонов животного происхождения; среда не содержит компонентов животного происхождения и, согласно спецификации продукта, не связана с рисками BSE/TSE. Реакция также зависит от наличия белкового фактора в специальном настое HiVeg® и плазме крови.

Ферментация маннита приводит к снижению pH среды вокруг колоний, продуцирующих коагулазу. Бромкрезоловый пурпурный изменяет цвет на жёлтый, вокруг колоний появляются жёлтые зоны. Вокруг колоний коагулазоположительных микроорганизмов формируется непрозрачная зона свернувшейся плазмы.

Staphylococcus epidermidis является коагулазоотрицательным видом, не ферментирует маннит и не изменяет цвет среды. Коагулазоотрицательные виды могут ферментировать маннит и образовывать жёлтую зону вокруг колоний, однако непрозрачная зона не формируется.

Мутантные или старые культуры S. aureus могут слабо продуцировать коагулазу. Такие культуры необходимо заново пересевать на свежую среду и повторно исследовать. Продукция коагулазы зависит от присутствия ферментируемого сахара, в данном случае маннита.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 47,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при 118–121 °C в течение 15 мин; соответствующее давление составляет приблизительно 0,083–0,103 МПа.
4. Охладите основу до 45–50 °C.
5. Добавьте к основной среде 7–15 % об./об. стерильной предварительно протестированной кроличьей плазмы.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Тип образца

Тип образца производителем не указан.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MV272-500G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Масса: 500 г
• Тип продукта: HiVeg™
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Рабочий диапазон хранения сухого продукта: 10–30 °C
• Хранение приготовленной среды: 2–8 °C
• Конечное значение pH: 7,4 ± 0,2 при 25 °C
• Диапазон pH: 7,20–7,60
• Концентрация раствора для определения реакции: 4,7 % мас./об. водного раствора при 25 °C
• Условия культурального исследования: добавление 7–15 % об./об. стерильной предварительно протестированной кроличьей плазмы, инкубация при 35–37 °C в течение 18–48 ч

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-серого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем 1,45 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель пурпурного цвета, слегка опалесцирующий.

Реакция

Реакция 4,7 % мас./об. водного раствора при 25 °C: pH 7,4 ± 0,2.

Значение pH

pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 7–15 % об./об. стерильной предварительно протестированной кроличьей плазмы и инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Некоторые мутантные штаммы S. aureus могут давать слабую или отрицательную реакцию на коагулазу. При сомнительном результате культуру необходимо исследовать повторно.
2. Некоторые штаммы E. coli могут ферментировать маннит и давать слабоположительную реакцию на коагулазу.
3. Окраска по Граму может помочь различить виды.

Обращение с образцами и биобезопасность

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Перед открыванием контейнера следует ознакомиться с маркировкой. При работе с образцами и культурами необходимо использовать защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Следует соблюдать надлежащие правила микробиологической работы и стандартные меры предосторожности, установленные для обращения с образцами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Условия хранения и срок годности

• Сухой продукт хранить при 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду хранить при 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и при соблюдении рекомендованных условий хранения.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.