HiMedia MV272-100G Основа HiVeg агара с маннитом для коагулазы

Питательная среда HiMedia MV272-100G Основа HiVeg агара с маннитом для коагулазы — порошковая основа без компонентов животного происхождения. Основа предназначена для выделения и дифференциации стафилококков из образцов или классификации чистых культур с добавлением плазмы; рабочий диапазон хранения продукта составляет 10–30 °C.

Назначение

Основа HiVeg агара с маннитом для коагулазы с плазмой применяется для выделения и дифференциации стафилококков из образцов, а также для классификации чистых культур. Среда используется для выделения Staphylococcus aureus из клинических образцов и дифференциации S. aureus от других видов по продукции коагулазы и ферментации маннита.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими характеристиками среды.

Принцип действия и интерпретация

Род Staphylococcus включает 28 принятых или предлагаемых видов, 14 из которых могут встречаться в клинических образцах человека. Стафилококки обычно обнаруживаются на коже и слизистых оболочках человека и других животных.

Некоторые патогенные стафилококки человека и животных продуцируют фермент коагулазу. Обнаружение этого фермента используется в лаборатории для идентификации микроорганизмов.

Среда основана на рецептуре Esber и Faulconer. Для приготовления используются растительные пептоны вместо пептонов животного происхождения, благодаря чему среда не содержит рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE). Реакция также зависит от присутствия белкового фактора в специальном настое HiVeg® и плазме крови.

При ферментации маннита снижается pH среды вокруг колоний, продуцирующих коагулазу. Изменение pH определяется по изменению окраски индикатора бромкрезолового пурпурного: индикатор становится жёлтым, вокруг колоний появляются жёлтые зоны.

Вокруг колоний микроорганизмов, продуцирующих коагулазу, образуется непрозрачная зона свернувшейся плазмы. Staphylococcus epidermidis является коагулазоотрицательным видом, не ферментирует маннит и не изменяет цвет среды. Коагулазоотрицательные виды могут ферментировать маннит и образовывать жёлтую зону вокруг колоний, но непрозрачная зона при этом не формируется.

Мутантные или старые культуры S. aureus могут слабо продуцировать коагулазу. Такие культуры необходимо повторно пересевать на свежую среду и проводить повторную проверку. Escherichia coli ферментирует маннит и может давать слабоположительную реакцию на коагулазу. Продукция коагулазы зависит от присутствия ферментируемого сахара, в данном случае маннита.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 47,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при 118–121 °C в течение 15 мин; соответствующее давление составляет приблизительно 0,083–0,103 МПа (12–15 фунтов на кв. дюйм).
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Добавьте к базовой среде 7–15 % об./об. стерильной предварительно проверенной кроличьей плазмы.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Тип образца

В данных производителя конкретные типы образцов не указаны.

Обращение с образцами и биологическими материалами

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными методическими указаниями.
• При необходимости обращайтесь к инструкциям по безопасности, приведённым в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

1. Некоторые мутантные штаммы S. aureus могут давать слабую или отрицательную реакцию на коагулазу. При сомнительном результате культуру необходимо исследовать повторно.
2. Некоторые штаммы E.coli могут ферментировать маннит и давать слабоположительную реакцию на коагулазу.
3. Окраска по Граму может помочь в дифференциации видов.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или светло-серый однородный сыпучий порошок без комков.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,45%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель пурпурного цвета со слабой опалесценцией.

Реакция

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 4,7 % при 25 °C.

pH

7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления 7–15 % об./об. стерильной предварительно проверенной кроличьей плазмы и инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения порошка: 10–30 °C.
• Условия хранения порошка: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности продукта.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Для сохранения рабочих характеристик используйте продукт в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.