HiMedia MV268-500G Основа микоплазменного HiVeg бульона с CV (PPLO)

Питательная среда HiMedia MV268-500G Основа микоплазменного HiVeg бульона с CV (PPLO) представляет собой порошковую основу растительного происхождения без компонентов животного происхождения. Основа предназначена для выделения и культивирования видов Mycoplasma из фармацевтических образцов и смешанных культур после добавления обогатительных добавок; для подавления сопутствующей микрофлоры требуется селективная добавка.

Назначение

После добавления обогатительных добавок среда используется для выделения и культивирования видов Mycoplasma (PPLO) из различных образцов и смешанных культур.

Тип образца: фармацевтические образцы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих параметров.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 21,0 г порошка в 700 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 2,85 мл 1%-ной селективной добавки PTe (1 мл на флакон) FD052 вместе с 300 мл сыворотки лошади RM1239 или 10 флаконами обогатительной добавки HPYT FD075.
6. Тщательно перемешайте среду.
7. Разлейте среду в стерильные пробирки.

Вместо сыворотки лошади допускается использовать 25%-ную асцитическую жидкость.

Принцип действия и интерпретация

Среды PPLO описаны Morton, Smith и Leberman и применялись для изучения требований к росту Mycoplasma, а также для идентификации и культивирования этих микроорганизмов. Для культивирования Mycoplasma компоненты среды и все добавки не должны содержать токсичных веществ даже в следовых количествах.

Для хорошего роста многие виды Mycoplasma требуют сыворотку. Для предотвращения роста загрязняющих микроорганизмов также необходим антибиотик. Кристаллический фиолетовый и теллурит калия ингибируют многие грамотрицательные и грамположительные бактерии.

Большинство видов Mycoplasma являются аэробными или факультативно-анаэробными, однако некоторые виды относятся к микроаэрофильным. Отдельные анаэробные сапрофитные виды Mycoplasma лучше всего растут при 22–35 °C, тогда как патогенные штаммы растут при 35 °C.

При росте на агаризованной среде Mycoplasma демонстрируют типичную морфологию: колонии формируются ниже поверхности агара, а без сыворотки рост не происходит. После пересева на чашки с агаром PPLO возможные культуры из бульона образуют колонии с характерной морфологией в виде «яичницы-глазуньи».

Основа микоплазменного HiVeg®™ бульона с кристаллическим фиолетовым приготовлена с использованием растительных пептонов вместо пептонов животного происхождения, поэтому не содержит рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями.

Условия культивирования и культуральные характеристики

Чашки или пробирки следует инкубировать в атмосфере, содержащей 5–10 % углекислого газа. Первичный контроль проводят после 48 ч инкубации, однако отрицательные результаты не следует фиксировать до завершения инкубации продолжительностью 3 недели.

Культуральные характеристики определяют в присутствии 10 % углекислого газа с добавлением 1%-ной селективной добавки PTe — 1 мл на флакон, FD052, 1%-ной сыворотки лошади RM1239 и обогатительной добавки HPYT FD075 после инкубации при 22–35 °C в течение 48 ч.

Контроль качества

Внешний вид: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: раствор жёлтого цвета, может иметь фиолетовый оттенок; в пробирках прозрачный.

Реакция: для 2,1%-ного водного раствора массой к объёму при 25 °C pH составляет 7,8 ± 0,2.

Диапазон pH: 7,60–8,00.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Храните продукт в плотно закрытой ёмкости при температуре 10–30 °C.
• Приготовленную среду храните при 2–8 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте ёмкость.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Ограничения применения

• Поскольку виды Mycoplasma могут быть аэробными, факультативно-анаэробными или микроаэрофильными, для оптимального выделения необходимо обеспечить соответствующий режим инкубации.
• Из-за высокой степени обогащения среды при приготовлении и внесении посевного материала необходимо принимать меры для предотвращения контаминации.

Требования безопасности

• Перед открыванием ёмкости прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила работы микробиологической лаборатории.
• При работе с образцами применяйте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Обращение с использованным материалом

После использования загрязнённые материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.

Использованные или непригодные препараты следует утилизировать безопасным способом с применением автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах установленного срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.