HiMedia MV268-500G Основа микоплазменного HiVeg бульона с CV (PPLO)

Основа микоплазменного бульона HiVeg с кристаллическим фиолетовым (PPLO) HiMedia MV268-500G на растительной основе. Применяется для изоляции и культивирования видов Mycoplasma (PPLO) из различных образцов и смешанных культур при добавлении обогащающих добавок.

Принцип измерения

Среда разработана на основе классических рецептур PPLO (по Мортону, Смиту и Леберману). Для обеспечения роста микоплазм все компоненты и добавки должны быть свободны от токсических веществ. Многие виды Mycoplasma требуют наличия сыворотки для полноценного роста и антибиотиков для подавления сопутствующей микрофлоры. Кристаллический фиолетовый ингибирует рост многих грамположительных и грамотрицательных бактерий.

Большинство видов микоплазм являются аэробными или факультативно анаэробными, некоторые — микроаэрофильными. Сапрофитные штаммы лучше растут при 22–35 °C, патогенные — при 35 °C. При пересеве на агар PPLO культуры из бульона образуют колонии с типичной морфологией («глазунья»).

Основа HiVeg®™ изготовлена с использованием растительных пептонов вместо животных, что исключает риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией).

Область применения

Используется для анализа фармацевтических образцов.

Методика приготовления и использования

1. Растворите 21,0 г порошка в 700 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 2,85 мл селективной добавки PTe 1% (FD052) и 300 мл сыворотки лошади (RM1239) или 10 флаконов обогащающей добавки HPYT (FD075). Примечание: вместо сыворотки лошади можно использовать 25 % асцитической жидкости.
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным пробиркам.
7. Инкубируйте в атмосфере с содержанием 5–10 % CO₂.
8. Проведите осмотр через 48 часов. Среду нельзя считать отрицательной до истечения 3 недель инкубации.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный раствор в пробирках, желтого цвета, может иметь пурпурный оттенок.
• Реакция: pH 7,8 ± 0,2 для 2,1 % (масса/объем) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 7,60–8,00.

Культуральные характеристики

Характеристики определены в присутствии 10 % CO₂ с добавлением селективной добавки PTe 1% (FD052), 1 % сыворотки лошади (RM1239) и обогащающей добавки HPYT (FD075) после инкубации при 22–35 °C в течение 48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение основы: в плотно закрытом контейнере при температуре +10…+30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и меры предосторожности

• Ограничения: из-за различной потребности видов микоплазм в кислороде (аэробы, факультативные анаэробы, микроаэрофилы) необходимо строго соблюдать режим инкубации для оптимального восстановления культур.
• Риски: среда является высокообогащенной, что требует особой осторожности при приготовлении и инокуляции для предотвращения контаминации.
• Безопасность: при работе с образцами и культурами следует использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица, соблюдая стандартные микробиологические правила лаборатории.
• Утилизация: загрязненные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.