HiMedia MV267-500G Основа микоплазменного HiVeg бульона без CV

Основа микоплазменного бульона HiMedia MV267-500G HiVeg без кристаллического фиолетового (CV) на растительной основе. Применяется в качестве базовой питательной среды для обогащения культур видов Mycoplasma (включая плевропневмоподобные организмы); вес упаковки 500 г.

Принцип измерения и интерпретация

Среда подготовлена по формуле Мортона и Лечче. Из состава исключен кристаллический фиолетовый из-за его ингибирующего действия на некоторые виды Mycoplasma, что делает данную основу подходящей для исследовательских целей.

Для культивирования микоплазм все компоненты и добавки должны быть полностью очищены от токсичных веществ. Большинство видов Mycoplasma являются аэробами или факультативными анаэробами, однако некоторые из них микроаэрофильны. Сапрофитные виды лучше растут при температуре 22–35 °C, в то время как патогенные штаммы — при 35 °C.

Использование растительных пептонов в серии HiVeg®™ исключает риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией). При посеве на чашки с данной основой колонии микоплазм приобретают типичную морфологию, напоминающую «глазунью» (fried egg appearance).

Состав

Приготовление и стерилизация

1. Суспендировать 21,0 г порошка в 700 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагреть до полного растворения среды.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C и в асептических условиях добавить 300 мл конской сыворотки (RM1239).
   • Примечание: Если в качестве селективного агента используется кристаллический фиолетовый, вместо конской сыворотки следует добавить асцитную жидкость. Также возможно добавление 10 флаконов добавки HPYT (FD075) вместо сыворотки.
5. Тщательно перемешать и разлить по стерильным пробиркам или колбам.

Инкубация и использование

• Тип образцов: Фармацевтические образцы.
• Условия: Инкубировать в атмосфере, содержащей 5–10% углекислого газа (CO₂).
• Сроки: Осматривать через 48 часов, однако не считать культуру отрицательной до истечения 3 недель инкубации.

Контроль качества

• Внешний вид: Гомогенный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Раствор: Прозрачный раствор желтого цвета.
• pH: 7,60–8,00.

Культуральный ответ (при 10% CO₂, с добавлением 1% конской сыворотки и добавки HPYT, инкубация при 22–35 °C в течение 48 часов):

Ограничения и меры предосторожности

1. Для оптимального восстановления культур необходимо строго соблюдать условия инкубации (аэробные/микроаэрофильные условия).
2. Температурный режим должен соответствовать виду микоплазмы (сапрофиты 22–35 °C, патогены 35 °C).
3. Из-за высокой питательности среды следует проявлять особую осторожность при приготовлении и инокуляции во избежание контаминации.

Хранение и утилизация

• Хранение: В плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Готовая среда хранится при 2–8 °C.
• Особенности: Продукт гигроскопичен; плотно закрывайте флакон во избежание образования комков.
• Утилизация: Все контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации.

Технические характеристики