HiMedia MV266-500G Основа микоплазменного HiVeg агара (PPLO HiVeg)

Основа микоплазменного HiVeg агара (PPLO HiVeg) HiMedia MV266-500G для изоляции и культивирования видов Mycoplasma (PPLO). Применяется для анализа фармацевтических образцов; основа среды изготовлена из растительных пептонов, что исключает риски заражения BSE/TSE.

Принцип измерения

Среда PPLO HiVeg® Agar Base разработана для выращивания микоплазм, которые характеризуются отсутствием клеточной стенки и требуют специфических питательных компонентов. Растительный настой и пептон HiVeg® служат источниками азота, углерода, длинноцепочечных аминокислот и витаминов. Хлорид натрия обеспечивает осмотический баланс. Для полноценного роста большинства видов Mycoplasma в среду необходимо добавлять сыворотку или специализированные добавки, а также антибиотики для подавления сопутствующей микрофлоры.

Микоплазмы растут в толще агара, формируя характерные колонии с плотным центром и менее плотной периферией, напоминающие «глазунью» (fried egg). Диаметр колоний варьируется от 10 до 500 мкм (0,01–0,5 мм).

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 36,0 г порошка в 700 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 300 мл сыворотки лошади (RM1239) или 10 флаконов добавки HPYT Enrichment Supplement (FD075). Примечание: вместо сыворотки лошади можно использовать 25 % асцитической жидкости.
6. Тщательно перемешайте перед розливом.

Инкубация и интерпретация

• Условия: Чашки или пробирки инкубируют в атмосфере с содержанием 5–10 % CO₂.
• Температурный режим: Сапрофитные микоплазмы лучше растут при 22–35 °C, патогенные штаммы — при 35 °C.
• Сроки: Первичный осмотр проводится через 48 часов. Образцы не считаются отрицательными до истечения 3 недель инкубации.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: Гомогенный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: Плотный гель, сопоставимый с 1,5 % агаром.
• Цвет и прозрачность: Желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 3,6 % (масса/объем) водного раствора при 25 °C составляет 7,8 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 7,60–8,00.

Культуральные характеристики

Характеристики определены при инкубации в атмосфере с 10 % CO₂, с добавлением 1 % сыворотки лошади (RM1239) или 10 флаконов добавки HPYT Enrichment Supplement (FD075) при температуре 22–35 °C в течение 48 часов.

Область применения и ограничения

Применяется для анализа фармацевтических образцов.

Ограничения:

• Для оптимального восстановления микроорганизмов необходимо строго соблюдать режим инкубации (учитывая микроаэрофильные свойства некоторых видов).
• Требуется точное поддержание температуры (22–35 °C или 35 °C в зависимости от штамма).
• Из-за высокого содержания питательных веществ среда склонна к контаминации; требуется особая осторожность при инокуляции.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение основы: В плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, вдали от источников возгорания.
• Хранение готовой среды: При температуре 2–8 °C.
• Особенности: Продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования.

Утилизация и безопасность

• Безопасность: При работе использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдать стандартные микробиологические правила работы с клиническими образцами.
• Утилизация: Загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию перед утилизацией.