HiMedia MV248-500G Основа KF стрептококкового HiVeg агара

Питательная микробиологическая среда HiMedia MV248-500G Основа KF стрептококкового HiVeg агара — порошковая основа массой 500 г. Применяется для селективного выделения и количественного определения фекальных стрептококков в поверхностной воде методом прямого посева или мембранной фильтрации; приготовленную среду нельзя автоклавировать.

Назначение

Основа KF стрептококкового HiVeg агара рекомендована для селективного выделения и количественного определения фекальных стрептококков в образцах поверхностной воды методом прямого посева или методом мембранной фильтрации.

Типы образцов:

• пищевые продукты;
• вода.

Технические характеристики

Состав

Формула, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Стрептококки — шаровидные грамположительные бактерии, входящие в состав нормальной микрофлоры ротовой полости, кожи, кишечника и верхних дыхательных путей человека. Стрептококки, обнаруживаемые в фекалиях, относятся к фекальным стрептококкам и включают стрептококки с антигенами группы D по классификации Лэнсфилда. К этой группе относятся, в частности, Streptococcus faecalis, Streptococcus faecium, Streptococcus bovis и Streptococcus duran.

Фекальные стрептококки являются патогенами низкой степени опасности и редко вызывают заболевания, однако могут быть причиной:

• инфекций мочевыводящих путей у пациентов с катетерами;
• смешанных инфекций брюшных ран после хирургических операций на кишечнике;
• эндокардита при наличии патологически изменённых клапанов сердца.

Среда Кеннера—Фекаля (KF) разработана для выявления стрептококков в воде и пищевых продуктах. Основа KF стрептококкового агара рекомендована APHA для количественного определения фекальных стрептококков в пищевых продуктах. В основе KF стрептококкового HiVeg®™ агара пептоны животного происхождения полностью заменены растительным пептоном, что исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Специальный пептон HiVeg®™ и дрожжевой экстракт обеспечивают фекальные стрептококки источниками азота, углерода, серы, аминокислот, витаминов и микроэлементов. Лактоза и мальтоза являются сбраживаемыми углеводами и служат источниками энергии. Азид натрия действует как селективный агент и подавляет рост грамотрицательных бактерий.

2,3,5-трифенилтетразолий хлорид (TTC) восстанавливается активно метаболизирующими клетками до нерастворимого формазана, в результате чего образуются колонии от розового до красного цвета. Бактерии, устойчивые к азиду, утилизируют лактозу и/или мальтозу. Образующаяся при этом кислота изменяет цвет индикаторных красителей на жёлтый. Восстановление TTC бактериальными клетками до нерастворимого формазана приводит к образованию колоний от розового до красного цвета.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 76,4 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте восстановленное содержимое одного флакона бромкрезолового пурпурного (FD093).
3. Нагрейте среду до кипения и полностью растворите её.
4. Не автоклавируйте среду.
5. Не допускайте перегрева: перегрев снижает pH и ухудшает продуктивность среды.
6. Охладите среду до 45–50 °C.
7. В асептических условиях добавьте 10 мл 1%-ного раствора 2,3,5-трифенилтетразолий хлорида (TTC) (FD057).
8. Тщательно перемешайте.
9. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Посев и инкубация

Образцы можно непосредственно наносить штриховым посевом на среду. При использовании метода мембранной фильтрации стерильные мембранные фильтры, через которые пропущены образцы воды, асептически помещают на поверхность среды.

Инкубируйте посевы при 35–37 °C в течение 24–48 ч. Энтерококки после инкубации проявляются в виде колоний от розового до красного цвета. После предварительной идентификации необходимо провести дополнительные подтверждающие тесты.

Сбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

Для водных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам и местным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Из-за различий в питательных потребностях отдельные штаммы могут демонстрировать слабый рост.
2. Для подтверждения идентификации необходимо выполнить дополнительные биохимические тесты.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• С питательной средой должны работать только обученные сотрудники.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду и средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные соответствующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в индивидуальных паспортах безопасности.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета с лёгким зеленоватым оттенком.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 2,0%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Основная среда: светло-жёлтая.
• После добавления FD093 (бромкрезолового пурпурного): в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-фиолетового цвета.

Реакция среды

Реакция 7,64%-ного водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления FD057 и FD093 и инкубации при 35–37 °C в течение 48–72 ч.

Обозначения:

• (*): соответствующие номера WDCM.
• (#): ранее организм обозначался как Enterobacter aerogenes.

Хранение