HiMedia MV201-500G Casman HiVeg агар

Питательная агаризованная среда HiMedia MV201-500G Casman HiVeg агар — порошкообразный агар массой 500 г для микробиологических исследований. HiMedia MV201-500G применяется для выделения требовательных микроорганизмов из клинических образцов при пониженном содержании кислорода; температура хранения продукта составляет 10–30 °C.

Назначение

Casman HiVeg агар рекомендован для выделения требовательных микроорганизмов из клинических образцов в условиях пониженного парциального давления кислорода.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Требовательным микроорганизмам, таким как Haemophilus и Neisseria, для культивирования in vitro необходимо добавление факторов роста X и V.

Casman описал обогащённую кровью среду для культивирования Haemophilus и гонококков. Среда разработана как замена ранее описанным составам, требовавшим трудоёмкой подготовки с использованием свежей и прогретой крови, а также мясного настоя для обеспечения требовательных микроорганизмов необходимыми питательными веществами.

Кровь поставляет фактор X — гемин — и фактор V — никотинамидадениндинуклеотид (НАД), необходимый для роста Haemophilus influenzae. В крови овец отсутствует фактор V из-за наличия НАДазы — фермента, разрушающего фактор V. Кровь лошади и кролика содержит оба фактора — X и V — и характеризуется относительно низкой активностью НАДазы, поэтому предпочтительнее крови овцы.

Никотинамид добавляют в среду для ингибирования нуклеотидазы эритроцитов, которая может разрушать фактор V. Модифицированный агар Casman HiVeg® приготовлен с использованием пептонов растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения, поэтому не содержит рисков, связанных с BSE/TSE.

Пептон HiVeg® № 3, гидролизат HiVeg® № 1 и экстракт HiVeg® обеспечивают поступление аминокислот и других сложных азотистых питательных веществ. Декстроза улучшает рост патогенных кокков. Кукурузный крахмал препятствует ингибированию роста Neisseria gonorrhoeae жирными кислотами, не мешая гемолитической реакции. Кукурузный крахмал также нейтрализует ингибирующее действие декстрозы.

Посев среды следует выполнять сразу после поступления образца в лабораторию. После инкубации H. influenzae образует бесцветные или серые колонии с характерным мышиным запахом, а N. gonorrhoeae — небольшие бесцветные или серовато-белые колонии.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 43,6 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,10 МПа).
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Асептически добавьте 0,15 % об./об. стерильной крови, лизированной водой, приготовленной в соотношении вода:кровь = 3:1, из 5%-ной стерильной крови.
6. В качестве альтернативы добавьте 5 % частично лизированной крови.
7. Тщательно перемешайте и разлейте среду в необходимом объёме.

Контроль качества

Внешний вид

Кремовый или жёлтый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем 1,4%-ного агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• После добавления 5 % м/о стерильной дефибринированной крови: образуется гель вишнёво-красного цвета.
• После добавления 5 % м/о стерильной дефибринированной крови в чашках Петри: образуется непрозрачный гель.

Реакция среды

Реакция 4,36%-ного м/о водного раствора при 25 °C.

• pH: 7,3 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,10–7,50.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяли после добавления крови, лизированной водой, и инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

Тип образца

В документации производителя тип образца не указан.

Обращение с образцами и обеззараживание

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие микробиологические лабораторные практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• При необходимости обращайтесь к требованиям безопасности, приведённым в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для дальнейшей идентификации необходимо дополнительно провести биохимические и серологические исследования.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Для сохранения рабочих характеристик рекомендуется использовать продукт в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Сравнительный технический контекст

В отличие от составов на основе пептонов животного происхождения, Casman HiVeg® агар содержит пептоны растительного происхождения и предназначен для выделения требовательных микроорганизмов с использованием факторов роста, поступающих из крови.

Комплект поставки

• Порошкообразная питательная среда HiMedia MV201-500G массой 500 г в упаковке из полиэтилена высокой плотности.