HiMedia MV189-500G TCBS HiVeg агар

Питательная селективная агаризованная среда HiMedia MV189-500G TCBS HiVeg агар представляет собой сухой порошок массой 500 г для приготовления тиосульфат-цитрат-жёлчно-сахарозного агара. Среда предназначена для селективного выделения и культивирования Vibrio cholerae и других энтеропатогенных видов Vibrio из клинических, пищевых и водных образцов; автоклавирование приготовленной среды не допускается.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и культивирования Vibrio cholerae и других энтеропатогенных видов Vibrio, вызывающих пищевые отравления, из следующих типов образцов:

• клинические образцы: фекалии и другие;
• пищевые образцы;
• образцы воды.

Состав

Состав, г/л:

Рецептура скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

TCBS-агар разработан Kobayashi и соавторами, модифицировавшими селективную среду Nakanishi. Изначально среда предназначалась для выделения Vibrio cholerae и Vibrio parahaemolyticus, однако большинство видов Vibrio образуют на ней крупные хорошо развитые колонии с различной морфологией.

TCBS-агар также рекомендован Американской ассоциацией общественного здравоохранения (APHA) для селективного выделения Vibrio cholerae и Vibrio parahaemolyticus. Для выделения Vibrio cholerae обычно применяют обогащение в щелочной пептонной воде HiVeg® (MV618) с последующим высевом на агар TCBS HiVeg®.

Вместо пептонов животного происхождения используются растительные пептоны, поэтому среда не содержит компонентов животного происхождения. Пептон HiVeg® № 3 и дрожжевой экстракт обеспечивают поступление азотистых соединений, витаминов группы B и других необходимых питательных веществ.

Синтетическое моющее средство № II и цитрат натрия подавляют грамположительные бактерии и колиформные микроорганизмы. Тиосульфат натрия служит источником серы, которая в сочетании с цитратом железа позволяет выявлять образование сероводорода (H₂S). Сахароза добавлена как ферментируемый углевод для оценки метаболизма видов Vibrio.

Виды Vibrio, способные утилизировать сахарозу, образуют жёлтые колонии. Бромтимоловый синий и тимоловый синий используются как индикаторы pH. Щелочной pH среды улучшает восстановление Vibrio cholerae.

• Штаммы Vibrio cholerae образуют жёлтые колонии вследствие ферментации сахарозы.
• Vibrio alginolyticus также образует жёлтые колонии.
• Vibrio parahaemolyticus не ферментирует сахарозу и образует сине-зелёные колонии.
• Vibrio vulnificus также образует сине-зелёные колонии.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 89,08 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Не автоклавируйте.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным лабораторным руководствам.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам. Для образцов воды используйте методы отбора и обработки проб, предусмотренные руководствами и местными нормативами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Среду следует инокулировать большим количеством фекального материала, поскольку рост некоторых видов может подавляться вследствие ферментации сахарозы и накопления кислот.
2. Отдельные изоляты Pseudomonas и Aeromonas также могут образовывать на агаре TCBS HiVeg® сине-зелёные колонии.
3. Ферментирующие сахарозу виды Proteus могут образовывать жёлтые колонии.
4. Агар TCBS HiVeg® не подходит для проведения оксидазного теста видов Vibrio.
5. Некоторые штаммы Vibrio cholerae могут образовывать на TCBS-агаре зелёные или бесцветные колонии вследствие замедленной ферментации сахарозы.
6. Агар TCBS HiVeg® обладает высокой селективностью в отношении видов Vibrio. Любая колония на агаре TCBS HiVeg®, не образующая H₂S, может рассматриваться как предположительно положительная на Vibrio.
7. Для полной идентификации необходимо выполнить дополнительные биохимические и серологические тесты.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-коричневого цвета без комков.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель сине-зелёного цвета.

Реакция среды

Реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 8,9 % при 25 °C.

• pH: 8,6 ± 0,2
• Диапазон pH: 8,40–8,80

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.