HiMedia MV189-100G TCBS HiVeg агар

Селективная агаровая питательная среда HiMedia MV189-100G TCBS HiVeg агар производства HiMedia с конечным pH 8,6 ± 0,2. HiMedia MV189-100G TCBS HiVeg агар предназначен для выделения и культивирования Vibrio cholerae и других энтеропатогенных видов Vibrio из клинических, пищевых и водных образцов; среда предназначена для профессионального применения и диагностики in vitro.

Назначение и область применения

TCBS HiVeg агар рекомендуется для селективного выделения и культивирования Vibrio cholerae и других энтеропатогенных видов Vibrio, вызывающих пищевые отравления, из следующих типов образцов:

• клинические образцы: фекалии и другие материалы;
• пищевые образцы;
• образцы воды.

Среда предназначена для диагностики in vitro и профессионального применения.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных параметров эффективности.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 89,08 г среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Не стерилизуйте в автоклаве.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация результатов

TCBS-агар разработан Kobayashi и соавторами на основе селективной среды Nakanishi. Первоначально среда предназначалась для выделения Vibrio cholerae и Vibrio parahaemolyticus, однако большинство видов Vibrio на ней образуют крупные хорошо развитые колонии различной морфологии.

Американская ассоциация общественного здравоохранения (APHA) также рекомендует TCBS-агар для селективного выделения Vibrio cholerae и Vibrio parahaemolyticus. Обогащение в щелочной пептонной воде HiVeg® (MV618) с последующим выделением на TCBS HiVeg агар регулярно применяется для изоляции Vibrio cholerae.

В TCBS HiVeg агар вместо пептонов животного происхождения используются растительные пептоны, благодаря чему среда не содержит рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE).

• Пептон HiVeg® № 3 и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми соединениями, витаминами группы B и другими необходимыми питательными веществами.
• Синтетическое моющее средство № II и цитрат натрия подавляют грамположительные бактерии и колиформные микроорганизмы.
• Тиосульфат натрия служит источником серы и в сочетании с цитратом железа позволяет выявлять образование сероводорода H₂S.
• Сахароза добавлена как ферментируемый углевод для метаболизма видов Vibrio.
• Виды Vibrio, способные утилизировать сахарозу, образуют жёлтые колонии.
• Бромтимоловый синий и тимоловый синий выполняют функцию индикаторов pH.
• Щелочной pH среды повышает выделение Vibrio cholerae.
• Штаммы Vibrio cholerae образуют на TCBS HiVeg агар жёлтые колонии вследствие ферментации сахарозы.
• Vibrio alginolyticus также образует жёлтые колонии.
• Vibrio parahaemolyticus не ферментирует сахарозу и поэтому образует сине-зелёные колонии, как и Vibrio vulnificus.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным методическим рекомендациям.

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно методическим рекомендациям. Для образцов воды используйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с методическими рекомендациями и местными нормативными требованиями.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Только для диагностики in vitro.
• Только для профессионального применения.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным методическим рекомендациям.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

1. При посеве фекальных образцов необходимо использовать большое количество материала, поскольку рост некоторых видов может подавляться из-за ферментации сахарозы и накопления кислот.
2. Отдельные изоляты Pseudomonas и Aeromonas также могут образовывать на TCBS HiVeg агар сине-зелёные колонии.
3. Виды Proteus, ферментирующие сахарозу, могут образовывать жёлтые колонии.
4. TCBS HiVeg агар не подходит для проведения оксидазного теста у видов Vibrio.
5. Некоторые штаммы Vibrio cholerae могут иметь зелёный или бесцветный вид на TCBS-агаре вследствие замедленной ферментации сахарозы.
6. TCBS HiVeg агар обладает высокой селективностью в отношении видов Vibrio. Любая колония на TCBS HiVeg агар, не образующая H₂S, может рассматриваться как предположительно положительная на Vibrio.
7. Для полной идентификации необходимо провести дополнительные биохимические и серологические исследования.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текущий порошок от светло-жёлтого до светло-коричневого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель сине-зелёного цвета.

Реакция среды

Реакция 8,9%-ного водного раствора при 25 °C: pH 8,6 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 8,40–8,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.