HiMedia MV179-100G Основа олеинового HiVeg агара Дюбо

Порошковая основа питательной среды HiMedia MV179-100G Основа олеинового HiVeg агара Дюбо с растительными пептонами, предназначенная для приготовления агара без компонентов животного происхождения. Применяется для посевов микобактерий на чашках Петри или в пробирках; при инкубации требуются аэробные условия и повышенное содержание CO₂, иначе возможен отрицательный результат.

Назначение

Основа предназначена для приготовления твёрдых агаризованных питательных сред для культивирования микобактерий в чашках Петри или пробирках.

Тип образца: клинические образцы, мокрота.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами рабочих характеристик.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 4 г основы в 180 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте к стерильным охлаждённым 180 мл среды 20 мл стерильной олейно-альбуминовой добавки FD020 и 5 000–10 000 единиц пенициллина.
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные пробирки или чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Возбудитель туберкулёза у человека, Mycobacterium tuberculosis, переносится в воздушных частицах — капельных ядрах, образующихся при кашле пациентов с лёгочным туберкулёзом. Заражение происходит при вдыхании восприимчивым человеком капельных ядер, содержащих бактерии.

Микобактерии обычно выделяют на средах с основой из коагулированного яйца или на агаризованных средах. Среды Middlebrook и Dubos содержат агар, тогда как среды Lowenstein содержат яйцо. Преимущество агара заключается в том, что сопутствующие протеолитические микроорганизмы не разжижают среду. Агаризованные среды обычно рекомендуются для анализа образцов, полученных из нестерильных локусов.

Агаризованные среды можно сделать селективными добавлением антибиотиков, поскольку их отвердение обеспечивается агаром, а не уплотнением яичной основы. Dubos и Middlebrook рекомендовали основу олеинового бульона Дюбо для первичного выделения и последующего культивирования туберкулёзных микобактерий. В сравнительных исследованиях различных сред основа олеинового агара Дюбо показала более высокую пригодность для первичного выделения бактерии по сравнению с другими средами.

Основа олеинового HiVeg® агара Дюбо приготовлена с использованием пептонов растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения; состав не содержит компонентов животного происхождения и не связан с рисками BSE/TSE. Среды Дюбо содержат триптон и L-аспарагин как источники азота. Фосфаты совместно с хлоридом кальция буферируют среду и служат источниками фосфатов. Сульфат магния, сульфат цинка, сульфат меди и цитрат аммония железа обеспечивают среду микроэлементами и сульфатами. Олеиновый агар Дюбо приготовлен без глицерина и декстрозы для предотвращения роста комменсальных микроорганизмов.

Для выделения микобактерий из исследуемых образцов следует применять стандартные процедуры. Перед культивированием образец необходимо надлежащим образом деконтаминировать стандартным методом.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до желтовато-коричневого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: гель светло-янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий, формируется в чашках Петри.

Реакция: реакция 2,0%-ного водного раствора при 25 °C.

pH: 6,40–6,80.

Расчётный pH: 6,6 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают в присутствии 5–10 % CO₂, после добавления стерильной олейно-альбуминовой добавки FD020 и 5 000–10 000 единиц пенициллина, при температуре 35–37 °C в течение до 7 суток. Дополнительный рост может наблюдаться в течение 2–4 недель.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для выделения микобактерий из исследуемых образцов следует применять стандартные процедуры. Перед культивированием образец необходимо надлежащим образом деконтаминировать стандартным методом.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

При отсутствии надлежащих аэробных условий и повышенного содержания CO₂ во время инкубации возможен отрицательный результат.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухой основы: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом состоянии.
• Продукт гигроскопичен; нарушение условий хранения может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности и при соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Требования безопасности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. При обращении с образцами и культурами соблюдайте