HiMedia MV175A-500G Основа HiVeg агара Борде-Жангу с 1.6% агара

Основа HiVeg агара Борде-Жангу с 1,6 % агара HiMedia MV175A-500G представляет собой сухую питательную среду на растительной основе. Рекомендуется для детекции и изоляции Bordetella pertussis и Bordetella parapertussis, а также для диагностики коклюша.

Принцип измерения

Среда Борде-Жангу была разработана для культивирования видов Bordetella. Основа с содержанием агара 1,6 % обеспечивает питательную базу, где настой картофеля и растительный пептон HiVeg® служат источниками углерода, азота и длинноцепочечных аминокислот, а глицерин и добавление крови обеспечивают дополнительное питание. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Использование растительных пептонов вместо компонентов животного происхождения исключает риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией). Среда поддерживает обильный рост видов Bordetella и может применяться для массового культивирования B. pertussis при производстве вакцин, а также для поддержания стоковых культур.

Область применения

Применяется для изоляции возбудителей коклюша из клинических образцов:

• экстракты глотки;
• носоглоточные секреты;
• предназальные мазки.

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 36 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C и асептически добавьте 15–20 % стерильной свежей дефибринированной крови (овечьей, кроличьей, человеческой или лошадиной).
5. Для повышения селективности асептически добавьте содержимое 2 флаконов селективной добавки Bos Selective Supplement (FD004).
6. Тщательно перемешайте, избегая образования пузырьков воздуха, и разлейте в стерильные чашки Петри.

Процедура анализа и интерпретация

1. Посейте образец на среду.
2. Инкубируйте чашки в увлажненной камере (влажность 60 %) при температуре 37 °C на срок до 7 суток.
3. Проводите ежедневный осмотр (с использованием диссекционного микроскопа и косого освещения).
4. Через 40 часов колонии B. pertussis выглядят гладкими, выпуклыми, блестящими с зоной гемолиза.
5. Если на поверхности появились колонии плесени, удалите соответствующий участок агара стерильным скальпелем или иглой.
6. Колонии B. pertussis могут быть не видны без микроскопа в течение 2–4 дней.
7. Через 7 дней инкубации образцы, не давшие роста, считаются отрицательными.

Для подтверждения результатов необходимо провести серодиагностику и биохимические тесты.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Вес: 500 г
• Физическая форма: порошок
• Цвет порошка: от кремового до желтого, однородный свободнотекучий
• Цвет и прозрачность готовой основы: светло-желтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• Цвет и прозрачность после добавления крови: вишнево-красный непрозрачный гель
• Желирование: плотное, сопоставимо с 1,6 % агаровым гелем
• Диапазон pH: 6,50–6,90
• Происхождение компонентов: без использования компонентов животного происхождения (растительный)
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 15–20 % стерильной дефибринированной свежей крови и селективной добавки Bos Selective Supplement (FD004) после инкубации при 35–37 °C в течение 3–4 суток.

Ограничения и особенности

• Некоторые виды Haemophilus могут расти на данной среде и давать перекрестную реакцию с антисыворотками к B. pertussis; рекомендуется проверить зависимость от факторов X и V.
• Колонии B. pertussis могут оставаться невидимыми без микроскопа в первые 2–4 дня.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Требования: хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания. Из-за гигроскочности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание образования комков.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности.
• Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.