HiMedia MV173-100G HiVeg агар Мюллера-Хинтона

Питательная агаровая среда HiMedia MV173-100G HiVeg агар Мюллера—Хинтона производства HiMedia предназначена для определения чувствительности микроорганизмов к противомикробным препаратам. HiMedia MV173-100G применяется для чистых культур, выделенных из клинических образцов, и поставляется в виде порошка массой 100 г.

Назначение

Среда рекомендована для определения чувствительности микроорганизмов к противомикробным препаратам, выделенных из клинических образцов.

Тип образца: чистые культуры, выделенные из мочи, кала, крови и других клинических образцов.

HiVeg агар Мюллера—Хинтона отличается от стандартного агара Мюллера—Хинтона полной заменой пептонов животного происхождения растительными пептонами для исключения рисков, связанных с BSE/TSE.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных эксплуатационных параметров.

Примечание: сухие вещества настоя HiVeg® эквивалентны настою бычьего сердца.

Принцип действия и интерпретация

Формула агара Мюллера—Хинтона первоначально была разработана как простая прозрачная агаровая среда для культивирования патогенных видов Neisseria. Впоследствии для культивирования патогенных видов Neisseria были разработаны другие среды, однако агар Мюллера—Хинтона получил широкое применение при определении устойчивости гонококков и других микроорганизмов к сульфонамидам. В настоящее время агар Мюллера—Хинтона используется в качестве тестовой среды для определения чувствительности микроорганизмов к противомикробным препаратам.

Среда предназначена для диффузии противомикробных препаратов, нанесённых на бумажные диски, через агаровый гель в соответствии с утверждённым стандартом CLSI. Среда выбрана CLSI по следующим причинам:

1. Обеспечивает хорошую воспроизводимость результатов тестирования чувствительности от партии к партии.
2. Содержит низкие концентрации ингибиторов сульфонамидов, триметоприма и тетрациклина.
3. Поддерживает рост большинства неприхотливых патогенных бактерий.
4. Для среды накоплен значительный объём данных и практического опыта оценки рабочих характеристик.

Kirby—Bauer рекомендовали эту среду для выполнения тестов чувствительности к антибиотикам с использованием одного диска с высокой концентрацией антибиотика. Комитет ВОЗ по стандартизации тестирования чувствительности принял агар Мюллера—Хинтона для определения чувствительности микроорганизмов благодаря его воспроизводимости.

Агар Мюллера—Хинтона с 5 % крови овцы и агар Мюллера—Хинтона с гемоглобином рекомендованы для определения чувствительности Streptococcus pneumoniae и Haemophilus influenzae к противомикробным препаратам.

Настой HiVeg® и кислотный гидролизат HiVeg® обеспечивают среду азотистыми соединениями, углеродом, серой и другими необходимыми питательными веществами. Крахмал действует как защитный коллоид против токсичных веществ, присутствующих в среде. При гидролизе крахмала образуется декстроза, служащая источником энергии. Компоненты отобраны с низким содержанием тимина и тимидина, определяемым по значениям минимальной ингибирующей концентрации (МИК) для Enterococcus faecalis при использовании сульфаметоксазола и триметоприма (SXT).

Методика определения чувствительности методом дисковой диффузии

Метод Kirby—Bauer основан на диффузии противомикробных веществ, нанесённых на бумажные диски, в агаровой среде. Используются диски с одной концентрацией противомикробного препарата; измеряемые диаметры зон задержки роста сопоставляют со значениями минимальной ингибирующей концентрации (МИК).

1. Приготовьте стандартизованную суспензию исследуемого микроорганизма.
2. Равномерно нанесите суспензию тампоном на всю поверхность среды.
3. Разместите на поверхности среды бумажные диски, содержащие заданное количество противомикробных препаратов.
4. Инкубируйте посевы.
5. Измерьте зоны задержки роста вокруг каждого диска.
6. Определите чувствительность сравнением результатов с нормативами CLSI.

На результаты диско-диффузионного тестирования влияют глубина агара, активность диска, концентрация посевного материала, pH среды и продукция β-лактамазы исследуемыми микроорганизмами.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 38,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,10 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Рабочие характеристики партии проверены и стандартизированы в соответствии с действующим документом CLSI M6 и протоколами оценки обезвожденного агара Мюллера—Хинтона.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MV173-100G
• Назначение изделия: агар
• Тип продукта: HiVeg™
• Происхождение пептонов: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: HDPE
• Масса: 100 г
• Расход при приготовлении: 38,0 г на 1000 мл
• Конечный pH при 25 °C: 7,3 ± 0,1
• Диапазон pH: 7,20–7,40
• Температура стерилизации: 121 °C
• Время стерилизации: 15 мин
• Давление при автоклавировании: 15 фунтов/дюйм² (≈0,10 МПа)
• Температура охлаждения перед разливом: 45–50 °C

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем, содержащим 1,7 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 3,8 % масс./об. при 25 °C: pH 7,3 ± 0,1.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды ожидаются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Культуральные характеристики и контрольные штаммы

Тесты на чувствительность к антибиотикам выполняют в соответствии с действующим ISO/TS 16782; результаты должны соответствовать установленным пределам приемки. Рабочие характеристики среды проверяют в соответствии с руководствами CLSI и EUCAST.

Для тестирования Streptococcus pneumoniae среду дополняют 5 % крови лошади и 20 мг/л NAD; инкубируют при 34–36 °C в течение 18–20 ч в атмосфере с 5 % CO₂.

Для тестирования Haemophilus influenzae среду дополняют 5 % крови лошади и 20 мг/л NAD; инкубируют при 34–36 °C в течение 18–20 ч в атмосфере с 5 % CO₂.

Для теста на чувствительность к антибиотикам используют различные диски и стандартные штаммы ATCC. Диаметры зон задержки роста измеряют после инкубации при 30–35 °C в течение 18 ч в соответствии с последним протоколом CLSI M6 и стандартами действующего документа CLSI M100.

Зоны для дисков, обозначенных символом #, используются для оценки содержания тимина/тимидина в среде.

Зоны для дисков, обозначенных символом $, используются для оценки содержания двухвалентных катионов в среде.