HiMedia MV172-500G Основа цистинового HiVeg агара

Питательная среда HiMedia MV172-500G Основа цистинового HiVeg агара производства HiMedia — порошковая основа без компонентов животного происхождения. Основа применяется для выращивания грамотрицательных кокков и других патогенных микроорганизмов, а после обогащения 2 % стерильным раствором гемоглобина — для культивирования Francisella tularensis.

Назначение

Основа цистинового HiVeg агара предназначена для приготовления питательной среды для выращивания грамотрицательных кокков и других патогенных микроорганизмов. После добавления гемоглобина среда используется для культивирования Francisella tularensis.

Продукт представляет собой растительную альтернативу основе Cystine H Agar Base: пептоны животного происхождения полностью заменены растительными пептонами для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE). Среда имеет богатый питательный состав и может использоваться для культивирования других микроорганизмов, трудно поддающихся выращиванию.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Francisella tularensis является возбудителем туляремии — заболевания грызунов и других мелких организмов, напоминающего чуму. Микроорганизм относится к строгим аэробам. Свежевыделенные культуры Francisella tularensis не растут на обычных питательных средах и требуют сложной среды, содержащей кровь либо тканевые экстракты и цистин.

Для выделения этого микроорганизма применяли различные составы питательных сред. Кровяной декстрозо-цистиновый агар, описанный Francis, оказался пригодным для культивирования Francisella tularensis. Для выращивания Francisella tularensis также может использоваться сердечно-мозговой агар с добавлением 0,05 % цистина и 1 % декстрозы. Позднее в основу Cystine Heart Agar добавили гемоглобин, чтобы получить среду, пригодную для культивирования Francisella tularensis. Среда также известна как Cystine Glucose Blood Agar и используется для выделения Francisella tularensis.

Гемоглобин обеспечивает дополнительные питательные вещества и факторы роста. Среда поддерживает рост грамотрицательных кокков и других патогенных микроорганизмов без дополнительного обогащения. Основа Cystine Heart Agar может быть дополнительно обогащена кровью кролика и противомикробными препаратами.

Функции компонентов среды:

• настой HiVeg® и пептон HiVeg® № 3 служат источниками углерода, азота, витаминов и минеральных веществ;
• декстроза является источником энергии;
• L-цистин служит источником аминокислот;
• хлорид натрия обеспечивает среду необходимыми ионами.

Для снижения риска чрезмерного роста загрязняющих микроорганизмов в среду можно добавить пенициллин в концентрации 100–500 ЕД/мл.

Francisella tularensis относится к патогенам уровня биобезопасности 2 и может передаваться аэрозольным путём или проникать через неповреждённую кожу. При работе с предположительно инфицированным материалом рекомендуется использовать халат, перчатки и маску.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 51,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Для приготовления среды с обогащением гемоглобином суспендируйте 10,2 г порошка в 100 мл дистиллированной воды.
5. Простерилизуйте приготовленную среду в автоклаве в указанном выше режиме.
6. Охладите среду до 45–50 °C.
7. В асептических условиях добавьте 100 мл 2 % стерильного раствора гемоглобина.
8. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет: от кремового до жёлтого. Порошок однородный, легко пересыпающийся.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 1,5 % агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• базовая среда: прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета;
• после добавления 2 % раствора гемоглобина: в чашках Петри образуется непрозрачный гель шоколадно-коричневого цвета.

Реакция среды

Реакция 5,1 % массово-объёмного водного раствора при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

Диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации среды с добавлением 2 % гемоглобина при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

Технические характеристики

Пробоподготовка и обращение с материалом

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

При работе с образцами и культурами необходимо:

• ознакомиться с маркировкой перед открыванием контейнера;
• использовать защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица;
• соблюдать правила надлежащей микробиологической работы;
• применять стандартные меры предосторожности, установленные для обращения с образцами;
• руководствоваться требованиями безопасности, указанными в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для окончательной идентификации микроорганизмов необходимо дополнительно провести биохимические и серологические исследования.

Условия хранения и срок годности

Храните порошок при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере. Приготовленную среду храните при температуре 20–30 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия фла