HiMedia MV1552-500G Основа подтверждающего HiVeg агара для L. monocytogenes

Основа подтверждающего HiVeg агара для L. monocytogenes HiMedia MV1552-500G представляет собой селективную дифференциальную среду на растительной основе. Применяется для выделения Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и других образцов; исключает риски BSE/TSE за счёт использования растительных пептонов.

Принцип измерения

Среда разработана на основе модификации формулы Оттовиани и Агости для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes.

• Питательная база: Специальный пептон HiVeg® и экстракт дрожжей служат источниками азота и обеспечивают необходимые питательные вещества для роста листерий.
• Дифференциация: Основана на ферментации $\alpha$-метил-D-маннозида и активности фосфатидилинозитол-специфической фосфолипазы C (PIPLC).
  • Фермент фосфолипаза C является важным фактором вирулентности и специфичен только для L. monocytogenes и L. ivanovii. Он гидролизует очищенный субстрат (добавляемый в виде добавки FD227), что приводит к образованию непрозрачного ореола вокруг колоний.
  • L. monocytogenes ферментирует $\alpha$-метил-D-маннозид, образуя жёлтые колонии с ореолом.
  • L. ivanovii не ферментирует $\alpha$-метил-D-маннозид, образуя пурпурные колонии с ореолом.
  • Другие виды Listeria не обладают активностью PIPLC и образуют пурпурные или жёлтые колонии без ореола.
• Селективность: Хлорид лития и селективные добавки (FD212 и FD213) подавляют рост сопутствующей микрофлоры. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а гидрофосфат натрия выступает в роли буфера.

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 38,5 г порошка в 470 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx 0,1$ МПа / 15 lbs) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильное регидратированное содержимое одной ампулы селективной добавки OA (FD212A) и стерильное содержимое одной ампулы добавки LM Enrichment Supplement II (FD227).
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

• Происхождение: без использования компонентов животного происхождения (Veg)
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Вес: 500 г
• Внешний вид: бежевый или пурпурный гомогенный свободнотекущий порошок
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,2% агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный опалесцирующий гель
• pH водного раствора (7,7% м/в при 25 °C): 7,00–7,40

Область применения

Среда рекомендована для анализа пищевых продуктов. При сборе и обработке проб следует руководствоваться соответствующими нормативными методиками.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при использовании добавок OA Selective Supplement (FD212A) и LM Enrichment Supplement II (FD227) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• Требуется использование средств индивидуальной защиты: перчатки, защитная одежда, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте стандартные правила микробиологической работы с образцами и культурами.
• Утилизация: загрязнённые материалы и использованные среды подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.