HiMedia MV1552-500G Основа подтверждающего HiVeg агара для L. monocytogenes

Порошкообразная основа подтверждающего агара HiMedia MV1552-500G для L. monocytogenes — питательная среда HiVeg® для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и других образцов. Основа применяется для микробиологического контроля пищевых образцов; хранение продукта требуется при 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.

Назначение

Основа рекомендована для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и других образцов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Технические характеристики

Приготовление среды

1. Суспендируйте 38,5 г основы в 470 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (примерно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильно восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки OA (FD212A) и стерильное содержимое одного флакона обогатительной добавки LM II (FD227).
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Listeria monocytogenes — грамположительный пищевой патоген человека, способный вызывать тяжёлые инфекции у беременных, включая выкидыш, мертворождение, рождение ребёнка с неонатальным листериозом и менингитом, а также первичную бактериемию у взрослых и детей. Патогенность Listeria ivanovii для человека остаётся неопределённой.

L. monocytogenes и L. innocua обладают сходными биохимическими свойствами и не могут быть дифференцированы на традиционных средах PALCAM и Oxford. Подтверждающая агаровая основа для L. monocytogenes представляет собой модификацию состава Ottaviani и Agosti (1, 2), предназначенную для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes. В подтверждающей агаровой основе HiVeg® для L. monocytogenes используются пептоны растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения, благодаря чему среда не связана с рисками BSE/TSE.

Специальный пептон HiVeg® и дрожжевой экстракт служат источниками азота и обеспечивают питательные вещества, необходимые для роста Listeria. α-Метил-D-маннозид является ферментируемым углеводом. Хлорид лития и добавляемые селективные добавки (FD212 и FD213) подавляют сопутствующую микрофлору и повышают селективность среды для видов Listeria. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие, а гидрофосфат динатрия выполняет буферную функцию.

Дифференциация L. monocytogenes от других видов Listeria основана на активности фосфатидилинозитол-специфичной фосфолипазы C (PIPLC) и ферментации α-метил-D-маннозида. Фосфолипаза C является важным фактором вирулентности и специфична только для L. monocytogenes и L. ivanovii. Фосфолипаза C, продуцируемая L. monocytogenes и L. ivanovii, гидролизует очищенный субстрат (FD227), добавленный в среду, что приводит к образованию непрозрачного ореола вокруг колоний.

Различение L. monocytogenes и L. ivanovii выполняют по утилизации α-метил-D-маннозида и активности PIPLC. L. monocytogenes ферментирует α-метил-D-маннозид, образуя жёлтые колонии с ореолом, тогда как L. ivanovii не ферментирует α-метил-D-маннозид и образует колонии светло-фиолетового цвета с ореолом. Другие виды Listeria не проявляют активности PIPLC и поэтому образуют фиолетовые или жёлтые колонии без ореола.

Тип образца

Пищевые образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным рекомендациям. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения

Другие виды Listeria не проявляют активности PIPLC и поэтому образуют фиолетовые или жёлтые колонии без ореола.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, легко сыпучий порошок от бежевого до фиолетового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется фиолетовый опалесцирующий гель.

Реакция

Реакция 7,7%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Значение pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют с добавлением селективной добавки OA (FD212A) и обогатительной добавки LM II (FD227) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Хранение основы: при 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение приготовленной среды: при 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывать контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.