HiMedia MV1552-100G Основа подтверждающего HiVeg агара для L. monocytogenes

Сухая питательная среда HiMedia MV1552-100G «Основа подтверждающего HiVeg агара для L. monocytogenes» на растительной основе. Рекомендуется для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и других образцов.

Принцип измерения

Среда представляет собой модификацию состава по Оттовиани и Агости для селективного выделения Listeria monocytogenes. Использование растительных пептонов (HiVeg®) вместо компонентов животного происхождения исключает риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией).

Дифференциация L. monocytogenes от других видов листерий основана на активности фосфатидилинозитол-специфической фосфолипазы C (PIPLC) и ферментации $\alpha$-метил-D-маннозида:

• $\alpha$-метил-D-маннозид: служит ферментируемым углеводом.
• Хлорид лития и селективные добавки: подавляют рост сопутствующей микрофлоры.
• Фосфолипаза C: фермент, специфичный для L. monocytogenes и L. ivanovii. Он гидролизует очищенный субстрат (добавка FD227), что приводит к образованию матового (непрозрачного) ореола вокруг колоний.

Интерпретация результатов:

• L. monocytogenes: ферментирует $\alpha$-метил-D-маннозид $\rightarrow$ желтые колонии с матовым ореолом.
• L. ivanovii: не ферментирует $\alpha$-метил-D-маннозид $\rightarrow$ пурпурные колонии с матовым ореолом.
• Другие виды Listeria: не обладают активностью PIPLC $\rightarrow$ желтые или пурпурные колонии без ореола.

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 38,5 г порошка в 470 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx 0,1$ МПа / 15 фунтов) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильное содержимое одной виалы селективной добавки OA (FD212A) и одной виалы добавки LM Enrichment Supplement II (FD227).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от бежевого до пурпурного цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,2% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурный опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 7,2 $\pm$ 0,2 (7,7% водный раствор при 25 °C).
• Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при использовании добавок OA Selective Supplement (FD212A) и LM Enrichment Supplement II (FD227) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Область применения и ограничения

• Тип образцов: пищевые продукты.
• Ограничения: другие виды Listeria не проявляют активности PIPLC, поэтому образуют желтые или пурпурные колонии без ореола.
• Сбор образцов: следует использовать стандартные методики сбора и обработки пищевых проб.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Утилизация: использованные или непригодные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации согласно лабораторным протоколам работы с инфекционными материалами.