HiMedia MV1552-100G Основа подтверждающего HiVeg агара для L. monocytogenes

Компонент питательной среды HiMedia MV1552-100G Основа подтверждающего HiVeg агара для L. monocytogenes — порошковая основа массой 100 г для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и других образцов. Применяется для микробиологического контроля пищевых образцов; дифференциация колоний основана на активности фосфатидилинозитол-специфичной фосфолипазы C и ферментации α-метил-D-маннозида.

Назначение

Основа рекомендована для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и других образцов.

Тип образца: пищевые продукты.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация результатов

Listeria monocytogenes — грамположительный пищевой патоген человека, вызывающий тяжёлые инфекции у беременных женщин, которые могут привести к самопроизвольному аборту, мертворождению, рождению ребёнка с неонатальным листериозом и менингитом, а также к первичной бактериемии у взрослых и детей. Патогенность Listeria ivanovii для человека остаётся неопределённой.

L. monocytogenes и L. innocua обладают сходными биохимическими свойствами и не могут быть дифференцированы на традиционных средах PALCAM и Oxford. Основа подтверждающего агара для L. monocytogenes представляет собой модификацию состава Ottaviani и Agosti для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes. Основа подтверждающего агара HiVeg® для L. monocytogenes изготовлена с использованием пептонов растительного происхождения вместо пептонов животного происхождения, благодаря чему среда не содержит рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE).

Функции компонентов:

• специальный пептон HiVeg® и дрожжевой экстракт служат источниками азота и обеспечивают необходимые питательные вещества для роста Listeria;
• α-метил-D-маннозид является ферментируемым углеводом;
• хлорид лития и добавляемые селективные добавки FD212 и FD213 подавляют сопутствующую микрофлору и повышают селективность среды для видов Listeria;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• гидрофосфат динатрия буферизует среду.

Дифференциация L. monocytogenes от других видов Listeria основана на активности фосфатидилинозитол-специфичной фосфолипазы C (PIPLC) и ферментации α-метил-D-маннозида. Фосфолипаза C является важным фактором вирулентности и специфична только для L. monocytogenes и L. ivanovii. Фосфолипаза C, продуцируемая L. monocytogenes и L. ivanovii, гидролизует очищенный субстрат FD227, добавленный в среду, в результате чего вокруг колоний образуется непрозрачный ореол.

Дифференциация L. monocytogenes и L. ivanovii выполняется по утилизации α-метил-D-маннозида и активности PIPLC:

• L. monocytogenes ферментирует α-метил-D-маннозид и образует жёлтые колонии с ореолом;
• L. ivanovii не ферментирует α-метил-D-маннозид и образует светло-фиолетовые колонии с ореолом;
• другие виды Listeria не проявляют активности PIPLC и образуют фиолетовые или жёлтые колонии без ореола.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 38,5 г порошка в 470 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении приблизительно 0,103 МПа (15 фунтов на кв. дюйм).
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильное регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки OA (FD212A) и стерильное содержимое одного флакона добавки для обогащения LM II (FD227).
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MV1552-100G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Масса: 100 г
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительная основа
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: HDPE, полиэтилен высокой плотности
• Температура хранения продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Конечный pH при 25 °C: 7,2 ± 0,2
• pH: 7,00–7,40
• Концентрация водного раствора для оценки реакции: 7,7 % масс./об.
• Условия инкубации при оценке культуральных характеристик: 35–37 °C, 24–48 ч

Контроль качества

Внешний вид

Цвет: от бежевого до фиолетового.

Состояние: однородный сыпучий порошок без комков.

Гелеобразование

Гель плотный, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется фиолетовый опалесцирующий гель.

Реакция

Реакция 7,7%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Значение pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления селективной добавки OA (FD212A) и добавки для обогащения LM II (FD227), последующей инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.