HiMedia MV1465-500G Быстрый HiColiform HiVeg агар

Агарная питательная среда HiMedia MV1465-500G Быстрый HiColiform HiVeg агар — сухой порошок для микробиологического анализа с хромогенным и флуорогенным субстратами. Среда предназначена для обнаружения и подтверждения Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды на основе фермент-субстратной реакции; рабочую среду стерилизуют автоклавированием при 121 °C в течение 15 мин.

Назначение

Среда рекомендована для обнаружения и подтверждения Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды на основе фермент-субстратной реакции с использованием комбинации хромогенного и флуорогенного субстратов.

Среда также может применяться для исследования клинических образцов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими характеристиками среды.

Принцип действия и интерпретация результатов

Быстрый агар HiColiform представляет собой модификацию бульона LMX, описанного Manafi и Kneifel. Среда используется для одновременного обнаружения общих колиформных бактерий и Escherichia coli в пробах воды на основе хромогенных и флуорогенных субстратов.

Агар HiColiform HiVeg® приготовлен с полной заменой пептонов животного происхождения на растительный пептон, что позволяет избежать рисков, связанных с BSE/TSE. Специальный пептон HiVeg®, богатый триптофаном, обеспечивает необходимые питательные вещества для роста и позволяет одновременно выявлять образование индола.

Назначение компонентов среды:

• сорбитол служит источником углерода;
• фосфатные соли обеспечивают буферное действие, необходимое для быстрого роста колиформных бактерий;
• лаурилсульфат натрия придаёт среде селективность за счёт подавления сопутствующей микрофлоры, особенно грамположительных микроорганизмов;
• флуорогенный субстрат расщепляется ферментом β-D-глюкуронидазой, специфично присутствующим у Escherichia coli;
• реакция с флуорогенным субстратом проявляется голубой флуоресценцией колоний при ультрафиолетовом освещении;
• наличие общих колиформных бактерий определяется по сине-зелёному окрашиванию колоний вследствие расщепления хромогенного субстрата;
• IPTG усиливает синтез ферментов и повышает активность β-D-галактозидазы.

Для подтверждения присутствия Escherichia coli нанесите 2–3 капли реактива Ковача на подозрительную колонию. При положительной реакции колония окрашивается в красный цвет в течение 2 мин.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 31,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм и температуре 121 °C в течение 15 мин. Давление 15 фунтов на квадратный дюйм соответствует примерно 0,103 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Тип образцов

• Пищевые образцы.
• Пробы воды.

Отбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора образцов и обработки проб согласно действующим руководствам и локальным стандартам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

97 % штаммов Escherichia coli являются β-D-глюкуронидазоположительными, однако у некоторых штаммов флуоресценция может отсутствовать.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Образуется плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель светло-жёлтого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция

Реакция 3,1%-ного водного раствора по массе при 25 °C:

• pH: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

• pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Ранее Klebsiella aerogenes была известна как Enterobacter aerogenes.

Обозначение * соответствует номерам WDCM.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Храните сухой порошок при температуре 15–25 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду храните при температуре 2–8 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.
• Ожидаемые рабочие характеристики обеспечиваются при приготовлении среды согласно инструкции на этикетке, использовании продукта до окончания срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительное техническое отличие

В агаре HiColiform HiVeg® пептоны животного происхождения полностью заменены растительным пептоном HiVeg®, а одновременное выявление общих колиформных бактерий и Escherichia coli выполняется с применением комбинации хромогенного и флуорогенного субстратов.