HiMedia MV1465-100G Быстрый HiColiform HiVeg агар

Питательная среда HiMedia MV1465-100G Быстрый HiColiform HiVeg агар производства HiMedia для одновременного выявления Escherichia coli и общих колиформных бактерий по хромогенной и флуорогенной фермент-субстратной реакции. Среда применяется для анализа проб воды, пищевых и клинических образцов; подтверждение E. coli выполняют реакцией с реактивом Ковача, при которой положительная колония краснеет в течение 2 мин.

Назначение

Быстрый HiColiform HiVeg агар рекомендован для выявления и подтверждения Escherichia coli и общих колиформных бактерий в пробах воды на основе фермент-субстратной реакции с использованием комбинации хромогенного и флуорогенного субстратов. Среда также может применяться для клинических образцов.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Быстрый HiColiform агар представляет собой модификацию бульона LMX, описанную Manafi и Kneifel. Среда предназначена для одновременного выявления общих колиформных бактерий и Escherichia coli в пробах воды по реакциям с хромогенным и флуорогенным субстратами.

• Специальный пептон HiVeg® полностью заменяет пептоны животного происхождения, что позволяет исключить риски, связанные с BSE/TSE.
• Пептон HiVeg®, богатый триптофаном, обеспечивает необходимые питательные вещества для роста и позволяет одновременно выявлять образование индола.
• Сорбитол служит источником углерода.
• Фосфатные соли обеспечивают буферное действие и поддерживают быстрый рост колиформных бактерий.
• Лаурилсульфат натрия придаёт среде селективные свойства за счёт подавления сопутствующей микрофлоры, особенно грамположительных микроорганизмов.
• Флуорогенный субстрат расщепляется ферментом β-D-глюкуронидазой, характерным для Escherichia coli. Положительная реакция проявляется голубой флуоресценцией колонии в ультрафиолетовом свете.
• Наличие общих колиформных бактерий определяется по сине-зелёному окрашиванию колоний вследствие расщепления хромогенного субстрата.
• IPTG усиливает синтез ферментов и повышает активность β-D-галактозидазы.
• Для подтверждения присутствия E. coli на подозрительную колонию наносят 2–3 капли реактива Ковача. При положительной реакции колония краснеет в течение 2 мин.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 31,03 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Типы образцов

• Пищевые образцы.
• Пробы воды.
• Клинические образцы — согласно разделу о принципе действия и интерпретации результатов.

Отбор и обработка образцов

Для проб воды используйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам и местным нормативным требованиям. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности, установленные соответствующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в индивидуальных паспортах безопасности.

Ограничения применения

97 % штаммов E. coli являются β-D-глюкуронидазоположительными, однако отдельные штаммы могут демонстрировать отрицательную флуоресценцию.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 15–25 °C.
• Условия хранения сухого продукта: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок применения: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон.
• Продукт гигроскопичен; при недостаточно плотном закрытии и неправильном хранении возможно образование комков.
• Храните в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение установленного срока годности и при соблюдении рекомендуемой температуры хранения.

Технические характеристики

• Артикул: MV1465-100G
• Назначение изделия: агар, питательная среда
• Масса: 100 г
• Реакция водного раствора: 3,1 % м/о при 25 °C
• pH приготовленной среды: 6,60–7,00
• Номинальный pH: 6,8 ± 0,2
• Условия хранения сухого продукта: 15–25 °C
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция

Реакция 3,1%-ного водного раствора при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

• Ранее — Enterobacter aerogenes.
  Ключ: (*) соответствующие номера WDCM.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и применении согласно инструкции на этикетке, а также при использовании продукта в пределах срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Сравнительное техническое отличие

В составе HiColiform HiVeg агара пептоны животного происхождения полностью заменены растительным пептоном HiVeg®, при этом для одновременного выявления общих колиформных бактерий и Escherichia coli используются хромогенный и флуорогенный субстраты.