HiMedia MV1465-100G Быстрый HiColiform HiVeg агар

Быстрый хромогенно-флуорогенный агар HiMedia MV1465-100G HiColiform HiVeg для обнаружения и подтверждения Escherichia coli и общих колиформ. Применяется для анализа проб воды и клинических образцов на основе ферментативных реакций с использованием растительного пептона (HiVeg®) для исключения рисков БМЭ/ТСЭ.

Принцип измерения

Среда Rapid HiColiform™ HiVeg® является модификацией бульона LMX. Она предназначена для одновременного выявления общих колиформ и Escherichia coli с помощью хромогенных и флуорогенных субстратов.

Основные компоненты и их функции:

• Специальный растительный пептон HiVeg®: заменяет животные пептоны для исключения рисков заражения прионными болезнями (БМЭ/ТСЭ). Высокое содержание триптофана обеспечивает питательную среду и позволяет определять продукцию индола.
• Сорбитол: служит источником углерода.
• Фосфатные соли: поддерживают pH-баланс для быстрого роста колиформ.
• Лаурилсульфат натрия: обеспечивает селективность среды, подавляя рост сопутствующей микрофлоры, особенно грамположительных организмов.
• Флуорогенный субстрат: расщепляется ферментом $\beta$-D-глюкуронидазой, специфичным для Escherichia coli, что проявляется синей флуоресценцией под УФ-светом.
• Хромогенный субстрат: расщепление приводит к образованию сине-зелёных колоний, что указывает на наличие общих колиформ.
• IPTG (1-изопропил-$\beta$-D-1-тиогалактопиранозид): усиливает синтез ферментов и повышает активность $\beta$-D-галактозидазы.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворить 31,03 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx 0,1$ МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Интерпретация результатов

• Общие колиформы: колонии сине-зелёного цвета.
• Escherichia coli: колонии сине-зелёного цвета с положительной синей флуоресценцией под УФ-светом.
• Подтверждение E. coli: нанести 2–3 капли реактива Ковакса на подозрительную колонию. Положительная реакция (образование красного кольца) проявляется в течение 2 минут.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5% агаром.
• Цвет и прозрачность: светло-жёлтый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• pH (водный раствор 3,1% при 25 °C): 6,60–7,00 (номинал 6,8 $\pm$ 0,2).

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

Область применения

• Анализ проб воды (согласно местным стандартам и руководствам по сбору и обработке проб).
• Анализ пищевых продуктов.
• Исследование клинических образцов.

Ограничения и меры предосторожности

• Ограничения: около 97 % штаммов E. coli являются $\beta$-D-глюкуронидаза-положительными; отдельные штаммы могут демонстрировать отрицательную флуоресценцию.
• Меры безопасности: использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. Соблюдать стандартные правила микробиологической работы с культурами.
• Утилизация: загрязнённые материалы подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию перед утилизацией.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре +15…+25 °C в сухом вентилируемом помещении. Из-за гигроскопичности продукта следует избегать попадания влаги для предотвращения комкования.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.