HiMedia MV145-500G Основа Columbia бульона, HiVeg

Порошкообразная основа питательной среды HiMedia MV145-500G Основа Columbia бульона, HiVeg с пептонами растительного происхождения и массой 500 г. HiMedia MV145-500G предназначена для культивирования требовательных микроорганизмов из различных образцов; температура хранения продукта составляет 10–30 °C.

Назначение

Основа Columbia бульона, HiVeg предназначена для приготовления жидкой питательной среды для культивирования требовательных микроорганизмов из различных образцов. Животные пептоны полностью заменены растительными пептонами, поэтому среда не содержит компонентов животного происхождения и не связана с рисками BSE/TSE.

Тип образца

• Изолированный микроорганизм

Состав

Состав указан для приготовления 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Технические характеристики

Приготовление среды

1. Взвесьте 35,01 г порошка и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. При необходимости добавьте SPS — полинэтолсульфонат натрия — до конечной концентрации 0,01 %.
4. Разлейте среду по пробиркам.
5. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
6. Охладите среду до 45–50 °C.

Принцип действия и интерпретация

В 1969 году Morello и Ellner разработали жидкую среду для выделения микроорганизмов из гемокультур. Среда была создана на основе Columbia Blood Agar Base, ранее разработанной Ellner и соавторами.

Columbia Broth обеспечивала более быстрый рост Staphylococcus aureus, Escherichia coli, стрептококков группы viridans и энтерококков по сравнению с широко применяемым универсальным бульоном. Повышенная концентрация цистина в составе улучшает выделение аэробных и анаэробных микроорганизмов. Присутствие CO₂ стимулирует рост многих микроорганизмов.

От агаровой основы среда отличается отсутствием кукурузного крахмала, что снижает опалесценцию, и наличием солей. Основа Columbia бульона, HiVeg изготовлена с использованием растительных пептонов вместо пептонов животного происхождения.

Специальный пептон HiVeg®, пептон HiVeg® № 5 и настой HiVeg® обеспечивают обильный рост микроорганизмов. Декстроза служит источником углерода и энергии. Буферная система на основе триса поддерживает заданное значение pH. Добавление солей способствует выделению микроорганизмов. Гидрохлорид L-цистеина выполняет функцию восстановителя. Магний и железо способствуют росту микроорганизмов.

Методика инокуляции и выявления роста

1. Пробирочную среду инокулируйте 1–2 каплями жидкого образца с помощью стерильной пипетки.
2. Образцы, взятые тампоном, можно помещать в бульон после инокуляции чашек с плотной питательной средой.
3. Для анаэробной инкубации жидкую среду предварительно восстановите: поместите пробирки с ослабленными крышками в анаэробные условия на 18–24 ч до инокуляции.
4. В качестве альтернативы непосредственно перед использованием восстановите среду кипячением с ослабленными крышками.
5. После кипячения охладите среду до комнатной температуры и плотно закройте крышки перед инокуляцией.
6. Рост в пробирках определяйте по появлению мутности по сравнению с неинокулированным контролем.
7. При появлении роста выполните пересев культур на соответствующие питательные среды.

Пробоподготовка и обращение с образцами

При работе с образцами и культурами соблюдайте правила микробиологической лабораторной практики. Используйте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: раствор светло-янтарного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий; допускается наличие мелкодисперсного осадка.
• Условия определения реакции: водный раствор с концентрацией 3,5 % масс./об. при 25 °C.
• pH приготовленной среды: 7,5 ± 0,2.
• Рабочий диапазон pH: 7,30–7,70.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

*Соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

• Хранение порошка: при 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Хранение приготовленной среды: при 15–30 °C.
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте ёмкость.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Ограничения применения

1. Разные микроорганизмы имеют различные требования к условиям роста и могут демонстрировать неодинаковые характеристики роста на этой среде.
2. Каждая серия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA).
3. Для любого конкретного микроорганизма, не указанного в COA, рекомендуется валидировать среду с учётом специфических требований пользователя.

Ожидаемые рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила микробиологической лабораторной практики.
• Применяйте стандартные меры предосторожности согласно действующим руководствам.
• При необходимости обращайтесь к индивидуальным паспортам безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов и материалов, контактировавших с образцами, соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими методами лабораторной работы.

Сравнительное техническое отличие

В отличие от классической основы Columbia бульона, состав HiVeg использует растительные пептоны вместо пептонов животного происхождения, а отсутствие кукурузного крахмала снижает опалесценцию среды.