HiMedia MV144A-500G Основа колумбийского кровяного агара с 1% агара, HiVeg

Основа колумбийского кровяного агара с 1% агара HiMedia MV144A-500G HiVeg используется как базальная среда для изоляции и культивирования требовательных бактерий. Среда предназначена для приготовления кровяных и селективных питательных сред; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения и интерпретация

Основа колумбийского кровяного агара представляет собой универсальную питательную среду, разработанную для обеспечения быстрого и обильного роста как требовательных, так и нетребовательных микроорганизмов. Сочетание гидролизата казеина и мясного настоя в составе позволяет получать крупные колонии и четко выраженные гемолитические реакции.

В данной модификации (HiVeg®™) животные пептоны заменены растительными, что исключает риски заражения губчатой энцефалопатией коров (BSE) и трансмиссивными spongiform-энцефалопатиями (TSE). Кукурузный крахмал служит источником энергии и нейтрализует токсичные метаболиты.

При добавлении овечьей крови среда позволяет обнаруживать гемолиз и обеспечивает гемом (X-фактор), необходимым для многих бактерий. Однако среда не содержит V-фактор (никотинамидадениндинуклеотид), поэтому Haemophilus influenzae, требующий обоих факторов (X и V), на ней не растет.

Особенности интерпретации:

• Из-за относительно высокого содержания углеводов бета-гемолитические стрептококки могут проявлять зеленоватую реакцию гемолиза, которую можно ошибочно принять за альфа-гемолиз. Требуется проведение подтверждающих тестов всех колоний.
• При добавлении стерильной сыворотки среда становится эффективной для теста на вирулентность Corynebacterium diphtheriae (линии преципитации токсин-антитоксин становятся видимыми через 48 часов).

Методика приготовления

Приготовление базовой среды

1. Суспендировать 39 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагреть до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C перед добавлением термолабильных компонентов.

Приготовление специализированных сред

• Кровяной агар: к стерильной охлажденной основе добавить 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови овцы.
• Шоколадный агар: к стерильной охлажденной основе добавить 10 % (об/об) стерильной дефибринированной крови овцы. Нагревать при 80 °C в течение 10 минут при постоянном перемешивании.

Приготовление селективных сред

Среда становится селективной при добавлении антимикробных агентов к стерильной основе:

• Для видов Brucella: добавить содержимое 1 регидратированного флакона добавки NPBCVN Selective Supplement (FD005) на 500 мл стерильной расплавленной основы.
• Для видов Campylobacter: добавить содержимое 1 регидратированного флакона добавки Blaser-Wang (FD006), Butzler (FD007), Skirrow (FD008), VTCA (FD090) или Butzler VI (FD106) на 500 мл стерильной расплавленной основы вместе с содержимым 1 флакона Minerals Growth Supplement (FD009).
• Для видов Gardnerella: добавить содержимое 1 регидратированного флакона GNA Selective Supplement (FD056) на 500 мл стерильной расплавленной основы.
• Для кокков: добавить содержимое 1 регидратированного флакона добавки NC (FD030), NNP (FD031) или CO (FD119) на 500 мл стерильной расплавленной основы.

Область применения

Применяется для анализа клинических образцов:

• Спинномозговая жидкость (CSF).
• Образцы крови.

Условия инкубации:

• Многие патогены требуют CO₂; чашки следует инкубировать в атмосфере с содержанием CO₂ примерно 3–10 %.
• Культуры Brucella высокоинфекционны; инкубировать в 5–10 % CO₂.
• Виды Campylobacter лучше всего растут при 42 °C в микроаэрофильной атмосфере.
• Среды с добавками для Gardnerella инкубировать при 35 °C в течение 48 часов в атмосфере 7 % CO₂.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Контроль качества

• Внешний вид: от кремового до желтого гомогенного свободнотекущего порошка.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,0 % агаром.
• Цвет и прозрачность:
  • Базальная среда: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления 5 % крови: вишнево-красный непрозрачный гель.
• Реакция: pH 7,10–7,50 (водный раствор 3,9 % мас/об при 25 °C).

Характеристики роста и восстановления

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищенном от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Ограничения: приготовленные чашки с добавками следует использовать в течение 18 часов после приготовления для обеспечения максимальной селективности.
• Меры предосторожности: продукт гигроскопичен; после вскрытия плотно закрывать бутылку во избежание образования комков.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты должны быть утилизированы путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.