HiMedia MV144-100G Основа колумбийского кровяного агара, HiVeg

Сухая питательная среда HiMedia MV144-100G Основа колумбийского кровяного агара, HiVeg. Используется в качестве эффективной основы для приготовления кровяного агара, шоколадного агара, а также различных селективных и идентификационных сред.

Принцип измерения

Основа колумбийского кровяного агара HiVeg® разработана с использованием растительных пептонов вместо пептонов животного происхождения, что исключает риски заражения губчатой энцефалопатией (BSE/TSE). Специальный пептон обеспечивает быстрый и обильный рост как привередливых, так и непривередливых микроорганизмов, способствует формированию типичной морфологии колоний, усиленной продукции пигмента и более четко выраженным гемолитическим реакциям.

В состав среды входят специальный пептон HiVeg® и дрожжевой экстракт, которые служат источниками углерода, азота, витаминов, аминокислот и основных питательных веществ. Кукурузный крахмал выступает в качестве энергетического ресурса и нейтрализует токсичные метаболиты. Добавление овечьей крови позволяет обнаруживать гемолиз и обеспечивает гем (X-фактор), необходимый для роста многих бактерий.

Область применения

Среда предназначена для работы с клиническими образцами. Применяется для:

• Выделения микроорганизмов из клинического материала (в том числе из верхних дыхательных путей при добавлении бацитрацина для изоляции видов Haemophilus).
• Проведения теста на вирулентность Corynebacterium diphtheriae (при добавлении стерильной сыворотки).
• Создания селективных сред путем добавления антимикробных агентов.

Методика приготовления

Приготовление базовой среды

1. Суспендировать 44,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревать до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа / 15 lbs) в течение 15 минут.
4. Охладить до 45–50 °C перед добавлением термолабильных компонентов.

Приготовление специализированных сред

• Кровяной агар: к стерильной охлажденной основе добавить 5 % (об/об) стерильной дефибринированной крови овцы.
• Шоколадный агар: к стерильной охлажденной основе добавить 10 % (об/об) стерильной дефибринированной крови овцы. Нагревать при постоянном перемешивании до 80 °C в течение 10 минут.
• Селективные среды:
  • Для видов Brucella: добавить содержимое 1 флакона селективной добавки NPBCVN (FD005) на 500 мл стерильной расплавленной основы.
  • Для видов Campylobacter: добавить содержимое 1 флакона селективной добавки Blaser-Wang (FD006), Butzler (FD007), Skirrow (FD008), VTCA (FD090) или Butzler VI (FD106) на 500 мл стерильной расплавленной основы вместе с содержимым 1 флакона добавки Minerals Growth Supplement (FD009) и 5–7 % (об/об) крови лошади или овцы.
  • Для видов Gardnerella: добавить содержимое 1 флакона селективной добавки GNA (FD056) на 500 мл стерильной расплавленной основы.
  • Для кокков: добавить содержимое 1 флакона селективной добавки NC (FD030), NNP (FD031) или CO (FD119) на 500 мл стерильной расплавленной основы.

Условия эксплуатации и инкубации

• Общие требования: многие патогены требуют углекислого газа, поэтому посевы следует инкубировать в атмосфере с содержанием 3–10 % CO₂.
• Особые режимы:
  • Brucella: инкубировать в атмосфере 5–10 % CO₂ (культуры высокоинфекционны, требуют осторожного обращения).
  • Campylobacter: оптимальный рост при 42 °C в микроаэрофильной атмосфере.
  • Gardnerella (с добавками): инкубировать при 35 °C в течение 48 часов в атмосфере 7 % CO₂.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5 % раствором агара.
• Цвет и прозрачность:
  • Базовая среда: светло-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
  • После добавления 5 % стерильной дефибринированной крови: непрозрачный гель вишневого цвета.
• Реакция: pH 7,10–7,50 (водный раствор 4,4 % при 25 °C: 7,3 ± 0,2).

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при добавлении 5 % (масс/об) стерильной дефибринированной крови после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Ограничения применения

1. Некоторые привередливые организмы, такие как Haemophilus influenzae, могут не расти на данной среде без дополнительного обогащения кровью (среда не содержит V-фактор / никотинамидадениндинуклеотид).
2. Из-за относительно высокого содержания углеводов бета-гемолитические стрептококки могут давать зеленоватую реакцию гемолиза, которую можно ошибочно принять за альфа-гемолиз.
3. Для всех колоний необходимо проводить подтверждающие тесты.

Хранение и утилизация

• Хранение: порошок хранить в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C; готовую среду — при 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, следует избегать попадания влаги для предотвращения комкования. Хранить в сухом проветриваемом месте, вдали от источников возгорания.
• Утилизация: загрязненные материалы и использованные среды подлежат обязательному автоклавированию или инсинерации перед утилизацией.