HiMedia MV130-500G Rogosa SL HiVeg агар

Агар HiMedia MV130-500G Rogosa SL HiVeg агар — обезвоженная питательная среда массой 500 г для селективного культивирования лактобацилл. HiMedia MV130-500G применяется для выделения, количественного определения и идентификации лактобацилл из оральных, вагинальных, фекальных, пищевых и клинических образцов; хранение среды и приготовленного препарата — при 2–8 °C.

Назначение

Среда рекомендована для селективного культивирования оральных, вагинальных и фекальных лактобацилл. Rogosa SL HiVeg агар также применяется для выделения, количественного определения и идентификации лактобацилл из пищевых продуктов и клинических образцов.

Среда представляет собой модификацию среды Rogosa, Mitchell и Wiseman, также известную как среда RMW. В составе используются растительные пептоны вместо пептонов животного происхождения; среда не содержит компонентов животного происхождения и не связана с рисками BSE/TSE.

Состав

Состав приведён из расчёта на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Гидролизат HiVeg® № 1 и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми соединениями, серой, микроэлементами и витаминами группы B, необходимыми для роста лактобацилл.

Декстроза, арабиноза и сахароза являются сбраживаемыми углеводами. Полисорбат 80 служит источником жирных кислот.

Цитрат аммония и ацетат натрия подавляют рост плесневых грибов, стрептококков и многих других микроорганизмов. Дигидрофосфат калия обеспечивает буферную способность среды. Сульфат магния, сульфат марганца и сульфат железа являются источниками неорганических ионов.

Селективность в отношении лактобацилл обеспечивается низким pH среды и добавлением уксусной кислоты, которые подавляют сопутствующую бактериальную флору. Высокая концентрация ацетата и кислая реакция среды подавляют многие штаммы других молочнокислых бактерий.

Среда непригодна для выделения молочных лактобацилл из-за содержания солей, в частности для Lactobacillus lactis, Lactobacillus bulgaricus и Lactobacillus helveticus.

Все колонии перед дальнейшей идентификацией следует проверить окраской по Граму и каталазным тестом.

Техническое отличие состава

По сравнению с классическими рецептурами Rogosa SL агар Rogosa SL HiVeg использует растительные пептоны вместо пептонов животного происхождения.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 74,72 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Добавьте 1,32 мл ледяной уксусной кислоты.
4. Тщательно перемешайте и распределите среду по пробиркам или колбам для культивирования.
5. Нагревайте при 90–100 °C в течение 2–3 мин.
6. Охладите среду до 45–50 °C для непосредственного посева.

Не автоклавировать.

Условия культивирования

Рекомендуется инкубировать посевы:

• при 30 °C в течение 5 суток;
• или при 37 °C в течение 3 суток;

в атмосфере, содержащей 95 % водорода и 5 % углекислого газа.

Если создание такой атмосферы невозможно, перед инкубацией залейте инокулированные чашки вторым слоем агара.

Для культуральных характеристик использовали атмосферу с содержанием 5 % углекислого газа (CO₂) и 95 % водорода (H₂); наблюдение проводили после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

Ограничения применения

1. Рекомендуется инкубировать чашки при 30 °C в течение 5 суток или при 37 °C в течение 3 суток в атмосфере, содержащей 95 % водорода и 5 % углекислого газа. Если это невозможно, перед инкубацией инокулированные чашки следует покрыть вторым слоем агара.
2. Высокая концентрация ацетата и кислый pH подавляют многие штаммы других молочнокислых бактерий.
3. Перед дальнейшей идентификацией все колонии следует проверить окраской по Граму и каталазным тестом.

Контроль качества

Внешний вид

Однородные мягкие комки кремового или жёлтого цвета, легко разрушающиеся до порошкообразного состояния.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется светло-жёлтый опалесцирующий гель.

Реакция

Реакция 7,5 % масс./об. водного раствора с 0,132 % об./об. уксусной кислоты при 25 °C.

• pH: 5,4 ± 0,2
• Диапазон pH: 5,20–5,60

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяли в присутствии 5 % углекислого газа (CO₂) и 95 % водорода (H₂) после инкубации при 35–37 °C в течение 40–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Тип образца

Среда предназначена для работы с оральными, вагинальными, фекальными, пищевыми и клиническими образцами.

Обращение с образцами и утилизация материалов

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды автоклавированием и/или сжиганием. При утилизации инфекционных материалов следует соблюдать утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Меры безопасности

Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку. Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

Храните обезвоженную и приготовленную среду при 2–8 °C. Используйте до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия плотно закрывайте флакон и храните продукт в сухом состоянии, поскольку гигроскопичность порошка может привести к образованию комков. Неправильное хранение также может вызвать комкование. Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте контейнер.

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.