HiMedia MV1295-500G HiCrome E. coli HiVeg агар

Питательная агаровая среда HiMedia MV1295-500G HiCrome E. coli HiVeg агар производства HiMedia выпускается в виде порошка для выявления и количественного определения Escherichia coli в пищевых продуктах. Среда применяется для анализа проб воды, пищевых и клинических образцов с визуальным обнаружением колоний E. coli сине-зелёного цвета.

Назначение

Среда предназначена для выявления и количественного определения Escherichia coli в пищевых продуктах без дополнительного подтверждения на мембранном фильтре или с помощью индольного реагента.

Области применения:

• анализ проб воды;
• микробиологический контроль пищевых продуктов;
• исследование клинических образцов;
• выделение Escherichia coli в лабораторной практике.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

HiCrome® E. coli агар основан на триптон-жёлчном агаре и предназначен для выявления Escherichia coli в пищевых продуктах. Большинство штаммов E. coli можно дифференцировать от других колиформных микроорганизмов по наличию фермента β-глюкуронидазы, который обладает высокой специфичностью для E. coli.

Хромогенный агент X-глюкуронид используется для выявления активности β-глюкуронидазы E. coli. Клетки E. coli поглощают X-глюкуронид, после чего внутриклеточный фермент β-глюкуронидаза расщепляет связь между хромофором и глюкуронидом. Высвободившийся хромофор придаёт колониям E. coli сине-зелёную окраску.

Гидролизат HiVeg® и специальный пептон HiVeg® обеспечивают микроорганизмы источниками углерода, азотистых соединений, аминокислот с длинной цепью, витаминов и других необходимых питательных веществ. Синтетическое моющее вещество ингибирует грамположительные микроорганизмы. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а фосфаты обеспечивают буферное действие.

Пептоны животного происхождения полностью заменены растительными пептонами, что исключает риски BSE/TSE, связанные с использованием пептонов животного происхождения.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 36,57 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно ≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Подготовка образцов и проведение анализа

1. Перед использованием подсушите поверхность разлитой питательной среды.
2. Разведите пищевой образец в соотношении 1:5 или 1:10 стерильной 0,1%-ной (масс./об.) пептонной водой M028.
3. Гомогенизируйте разведённый образец в блендере или гомогенизаторе-стомачере.
4. Внесите пипеткой 0,5 или 1,0 мл гомогенизированного пищевого образца на поверхность чашки.
5. Распределите образец стерильным стеклянным шпателем.
6. Инкубируйте чашки при 30 °C в течение 4 ч.
7. Продолжите инкубацию при 44 °C в течение 18 ч.
8. Интерпретируйте результаты по росту и окраске колоний.

Культуральные характеристики учитывают после инкубации при 44 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Типы образцов

• Пробы воды.
• Пищевые образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для проб воды используйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно руководствам и местным стандартам.

Для пищевых образцов используйте соответствующие методы отбора и обработки согласно руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако некоторые штаммы E. coli могут давать отрицательную реакцию.
2. Некоторые виды Salmonella являются β-глюкуронидаза-положительными.
3. У некоторых видов микроорганизмов может наблюдаться слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем 1,2%-ного агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция среды

Реакция 3,66%-ного (масс./об.) водного раствора при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Технические характеристики

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения закрытого контейнера: 15–25 °C.
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в течение указанного срока годности и соблюдении рекомендованной температуры хранения.

Требования безопасности

Перед открытием контейнера ознакомьтесь с этикеткой. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов и материалов, контактировавших с образцами, необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры: материалы должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими методами лабораторной работы.

Сравнительное техническое отличие

HiCrome E. coli HiVeg агар использует хромогенную реакцию β-глюкуронидазы с образованием сине-зелёных колоний и растительные пептоны HiVeg® вместо пептонов животного происхождения.