HiMedia MV1295-100G HiCrome E. coli HiVeg агар

Хромогенная питательная среда HiMedia MV1295-100G HiCrome E. coli HiVeg агар — сухой агаровый порошок массой 100 г для выявления и количественного определения Escherichia coli. Среда применяется для анализа пищевых продуктов, воды и клинических образцов; большинство штаммов E. coli образует на ней сине-зелёные колонии, однако отдельные штаммы могут быть отрицательными по β-глюкуронидазе, а некоторые виды Salmonella — положительными.

Назначение

Среда предназначена для выявления и количественного определения Escherichia coli в пищевых продуктах без дополнительного подтверждения на мембранном фильтре или с помощью индольного реагента.

Среда также рекомендована для выделения E. coli из проб воды и клинических образцов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация результатов

HiCrome® E. coli HiVeg агар создан на основе триптон-желчного агара для выявления Escherichia coli в пищевых продуктах. Восстановление E. coli на этой среде основано на специфической ферментативной реакции.

Большинство штаммов E. coli можно отличить от других колиформных бактерий по наличию фермента β-глюкуронидазы, который обладает высокой специфичностью для E. coli. Хромогенный компонент X-глюкуронид используется для выявления активности β-глюкуронидазы:

• клетки E. coli поглощают X-глюкуронид;
• внутриклеточная β-глюкуронидаза расщепляет связь между хромофором и глюкуронидом;
• высвободившийся хромофор придаёт колониям E. coli сине-зелёную окраску.

Гидролизат HiVeg® и специальный пептон HiVeg® обеспечивают микроорганизмы источниками углерода, азотистыми соединениями, аминокислотами с длинной углеродной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Животные пептоны полностью заменены растительными, что позволяет избежать рисков BSE/TSE, связанных с использованием пептонов животного происхождения.

Синтетическое моющее вещество ингибирует грамположительные микроорганизмы. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а фосфаты обеспечивают буферное действие.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 36,57 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Методика подготовки и анализа проб

Перед использованием поверхность приготовленной среды высушивают.

Для пищевых проб:

1. Разведите пробу пищевого продукта в соотношении 1:5 или 1:10 стерильной 0,1 %-ной (масс./об.) пептонной водой M028.
2. Гомогенизируйте разведённую пробу в блендере или стомакере.
3. Перенесите на поверхность чашки 0,5 или 1,0 мл гомогенизированной пищевой пробы.
4. Распределите пробу по поверхности стерильным стеклянным шпателем.
5. Инкубируйте чашки при 30 °C в течение 4 ч.
6. Затем продолжайте инкубацию при 44 °C в течение 18 ч.

Типы образцов

• Пробы воды.
• Пробы пищевых продуктов.
• Клинические образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с установленными руководствами и местными нормативными требованиями.

Для пищевых продуктов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности, установленные действующими руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы E. coli могут быть отрицательными по этому ферменту.
2. Некоторые виды Salmonella являются положительными по β-глюкуронидазе.
3. Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,2 %-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 3,66 % (масс./об.) при 25 °C.

• pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 44 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM