HiMedia MV1294-500G Основа селективного HiCrome ECC HiVeg агара

Основа селективного HiCrome ECC HiVeg агара HiMedia MV1294-500G для одновременного обнаружения Escherichia coli и общих колиформ в пробах воды и пищевых продуктов. Среда разработана на основе растительных пептонов для исключения рисков, связанных с БЭП/ТЭП (болезнь КРС и трансмиссивные губчатые энцефалопатии), и имеет массу 500 г.

Принцип измерения

HiCrome® ECC Selective HiVeg® Agar представляет собой селективную хромогенную среду. В её состав входят два хромогенных субстрата:

1. Фермент $\beta$-D-галактозидаза, вырабатываемый колиформами, расщепляет один из хромогенов, в результате чего образуются колонии от лососевого до красного цвета.
2. Фермент $\beta$-D-глюкуронидаза, вырабатываемый E. coli, расщепляет второй хромоген (X-глюкуронид).

Колонии E. coli приобретают тёмно-синий или фиолетовый цвет за счёт расщепления обоих хромогенов. Добавление L-триптофана улучшает реакцию на индол, что повышает надёжность идентификации. Специальный пептон, пируват натрия и сорбитол обеспечивают азот, ферментируемые углеводы и другие питательные вещества. Фосфаты поддерживают pH среды. Тергитол (гептадецилсульфат натрия) подавляет рост грамположительных и некоторых грамотрицательных бактерий, не относящихся к колиформам.

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 26,48 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Для получения селективного варианта среды: после охлаждения стерильного агара до 45–50 °C асептически добавьте содержимое 1 флакона селективной добавки ECC (FD190).
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри. Примечание: возможная опалесценция (мутность) среды не влияет на её функциональные свойства.

Посев и интерпретация

Посев осуществляется методом глубокого посева, поверхностного посева или с использованием мембранного фильтра. Для подтверждения E. coli на тёмно-синие или фиолетовые колонии наносят каплю реактива Ковакса: образование вишнёво-красного окрашивания указывает на положительную реакцию.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Контроль качества

• Внешний вид: светло-жёлтый или розовый гомогенный свободнотекущий порошок.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,0% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-розовый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель.
• Реакция: pH 6,60–7,00 (для 2,65% водного раствора при 25 °C).

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Область применения

• Анализ проб пищевых продуктов.
• Анализ проб воды.

Ограничения и предостережения

• $\beta$-глюкуронидаза присутствует в 97% штаммов E. coli; отдельные штаммы могут давать отрицательный результат.
• Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.
• При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности и использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом вентилируемом месте.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования.
• Утилизация: загрязнённые материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.