HiMedia MV1294-100G Основа селективного HiCrome ECC HiVeg агара

Основа селективного HiCrome ECC HiVeg агара HiMedia MV1294-100G для одновременного выявления Escherichia coli и общих колиформ в пробах воды и пищевых продуктах. Среда разработана на основе растительных пептонов для исключения рисков BSE/TSE, связанных с использованием компонентов животного происхождения.

Принцип измерения

HiCrome® ECC Selective HiVeg® Agar является селективной хромогенной средой. В её состав входят два хромогенных субстрата:

1. Фермент $\beta$-D-галактозидаза, вырабатываемый колиформами, расщепляет один из хромогенов, в результате чего образуются колонии от лососевого до красного цвета.
2. Фермент $\beta$-D-глюкуронидаза, вырабатываемый E. coli, расщепляет X-глюкуронид (второй хромоген).

Колонии E. coli приобретают темно-синий или фиолетовый цвет за счёт расщепления обоих хромогенов. Добавление L-триптофана улучшает индольную реакцию, что повышает надёжность идентификации. Специальный пептон, пируват натрия и сорбитол обеспечивают азот, ферментируемые углеводы и другие питательные вещества. Фосфаты поддерживают pH среды. Тергитол подавляет рост грамположительных и некоторых грамотрицательных бактерий, не относящихся к колиформам.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 26,48 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Для приготовления селективного варианта среды после охлаждения стерильного раствора до 45–50 °C асептически добавьте содержимое одной ампулы селективной добавки ECC Selective Supplement (FD190).
5. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри. Примечание: возможная опалесценция (мутность) среды не влияет на её функциональные свойства.

Посев и интерпретация

Посев осуществляется методом посева в глубокий агар (pour plate), методом посева на поверхность или с использованием мембранного фильтра. Для подтверждения E. coli на темно-синие или фиолетовые колонии наносят каплю реактива Ковача: появление вишнёво-красного окрашивания указывает на положительную реакцию.

Технические характеристики

• Назначение: основа питательной среды
• Вес: 100 г
• Внешний вид: светло-жёлтый или розовый гомогенный свободнотекущий порошок
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-розовый, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• pH готового раствора (при 25 °C): 6,8 $\pm$ 0,2
• Диапазон pH: 6,60–7,00
• Желирование: плотный гель (сопоставимо с 1,0 % агаром)

Состав

Состав на 1 литр среды:

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

*Соответствующие номера WDCM. Примечание: Klebsiella aerogenes ранее была известна как Enterobacter aerogenes.

Область применения и ограничения

Применяется для анализа проб пищевых продуктов и воды. Сбор и обработка образцов должны проводиться в соответствии с установленными руководствами и местными стандартами.

Ограничения:

• $\beta$-глюкуронидаза присутствует в 97 % штаммов E. coli; отдельные штаммы могут быть отрицательными.
• Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре +15…+25 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре +2…+8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен, после вскрытия флакон следует плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания.

Меры предосторожности и утилизация

При работе со средой и культурами необходимо использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, защитная одежда, очки/экран) и соблюдать правила микробиологической безопасности. Загрязнённые материалы и использованные среды подлежат обязательной стерилизации в автоклаве или сжиганию перед утилизацией.