HiMedia MV1293-500G HiCrome ECC HiVeg агар

Хромогенный агар HiMedia MV1293-500G HiCrome ECC HiVeg агар предназначен для предположительной идентификации Escherichia coli и других колиформных бактерий в пищевых пробах и пробах объектов окружающей среды. Питательная среда применяется для микробиологического контроля образцов; содержит растительный пептон HiVeg® вместо пептонов животного происхождения и обеспечивает дифференциацию колоний по окраске.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для предположительной идентификации Escherichia coli и других колиформных бактерий в пищевых пробах и пробах объектов окружающей среды.

Тип образца: пищевые продукты и образцы окружающей среды.

Среда предназначена только для диагностики вне организма (in vitro).

Состав

Расчётный состав на 1 л очищенной или дистиллированной воды:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация результатов

Escherichia coli, относящаяся к семейству Enterobacteriaceae, входит в состав нормальной микрофлоры кишечного тракта человека и различных животных. Хотя большинство штаммов E. coli не вызывает желудочно-кишечных заболеваний, отдельные группы E. coli могут быть причиной тяжёлой диареи и серьёзных последствий, включая инвалидизацию.

HiCrome® ECC HiVeg® агар является дифференциальной средой для предположительной идентификации E. coli и других колиформных бактерий в пищевых пробах и пробах окружающей среды.

В составе среды используются два хромогена:

• один хромоген расщепляется ферментом глюкуронидазой, продуцируемым E. coli, с образованием колоний синего или фиолетового цвета;
• второй хромоген расщепляется ферментом галактозидазой, продуцируемым большинством колиформных бактерий, с образованием колоний розового или розово-красного цвета.

Специальный пептон HiVeg® и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами группы B и другими необходимыми питательными веществами. Лактоза является сбраживаемым углеводом и используется для выявления лактозосбраживающих бактерий; нейтральный красный служит индикатором. Гидрофосфат натрия и дигидрофосфат калия обеспечивают буферную ёмкость среды. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

В среде HiCrome® ECC HiVeg® агар пептоны животного происхождения полностью заменены растительным пептоном для исключения рисков, связанных с BSE/TSE.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 55,83 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при температуре 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 psi (≈0,103 МПа).
4. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика анализа пищевых проб

1. Высушите поверхность приготовленной агаризованной среды.
2. Разведите пищевую пробу в соотношении 1:5 или 1:10 с использованием 0,1%-ной стерильной пептонной воды HiVeg® (MV028).
3. Гомогенизируйте пробу в лабораторном блендере или аппарате для гомогенизации проб.
4. Нанесите 0,5 или 1,0 мл гомогената на поверхность агара.
5. Распределите гомогенат по поверхности стерильным стеклянным шпателем.
6. Инкубируйте чашки при 37 °C в течение 18–24 ч.
7. Подсчитайте синие и фиолетовые колонии.
8. Умножьте полученное количество колоний на коэффициент разведения.
9. Количество E. coli указывайте в расчёте на 1 г пищевой пробы.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется мутный гель красновато-розового цвета.

Реакция среды

Реакция: реакция 5,58%-ного водного раствора при 25 °C.

pH: 6,8 ± 0,2.

Дополнительный диапазон pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых проб применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно действующим методическим указаниям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы E. coli могут быть отрицательными по этому признаку.
2. Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 15–25 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере, в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После вскрытия: хранить в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности продукта.
• Приготовленную среду хранить при 2–8 °C.
• После каждого использования плотно закрывать контейнер.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков