HiMedia MV1293-500G HiCrome ECC HiVeg агар

Хромогенный агар HiMedia MV1293-500G HiCrome ECC HiVeg для презумптивного определения Escherichia coli и других колиформ в пищевых и environmental-пробах. Среда разработана на основе растительных пептонов (HiVeg®) для исключения рисков BSE/TSE; вес упаковки составляет 500 г.

Принцип измерения и интерпретация

HiCrome® ECC HiVeg® агар представляет собой дифференциальную среду. В её состав входят два хромогена:

1. Первый хромоген расщепляется ферментом глюкуронидазой, вырабатываемым E. coli, что приводит к образованию колоний синего или фиолетового цвета.
2. Второй хромоген расщепляется ферментом галактозидазой, вырабатываемым большинством колиформ, в результате чего формируются розовые колонии.

Лактоза служит ферментируемым углеводом, позволяющим выявлять лактозоположительные микроорганизмы с помощью индикатора нейтрального красного. Специальный растительный пептон HiVeg® и экстракт дрожжей обеспечивают азот, углерод, длинноцепочечные аминокислоты, витамины комплекса B и другие необходимые питательные вещества. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а гидрофосфаты натрия и калия стабилизируют pH среды.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендируйте 55,83 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$0,07 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C, тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.
5. Дождитесь полного высыхания поверхности агара.

Процедура анализа

1. Разбавьте пищевой образец в соотношении 1:5 или 1:10 стерильной 0,1% пептонной водой HiVeg® (MV028).
2. Гомогенизируйте пробу в блендере или стомачере.
3. Распределите 0,5 мл или 1,0 мл гомогената по поверхности агара с помощью стерильного стеклянного шпателя.
4. Инкубируйте чашки при 37 °C в течение 18–24 часов.
5. Подсчитайте количество синих/фиолетовых колоний и умножьте на коэффициент разведения. Результат выражается в количестве E. coli на 1 г продукта.

Технические характеристики

Состав, г/л:

Общие параметры:

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-желтого до розового цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: красно-розовый непрозрачный гель в чашках Петри.
• Реакция: pH 6,8 $\pm$ 0,2 для 5,58% (масса/объем) водного раствора при 25 °C.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Область применения и ограничения

Среда предназначена исключительно для диагностики in vitro. Применяется для анализа пищевых продуктов и проб окружающей среды.

Ограничения:

• $\beta$-глюкуронидаза присутствует в 97 % штаммов E. coli; отдельные штаммы могут давать отрицательный результат.
• Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого продукта: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания. Из-за гигроскопичности продукта неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Меры предосторожности: при работе с сухим порошком использовать маску, избегать контакта с глазами. Использовать защитные перчатки и спецодежду.

Утилизация

Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации в соответствии с установленными лабораторными правилами по обращению с инфекционными материалами.