HiMedia MV1293-100G HiCrome ECC HiVeg агар

Агар HiMedia MV1293-100G HiCrome ECC HiVeg предназначен для предположительной идентификации Escherichia coli и других колиформных бактерий в пищевых продуктах и образцах окружающей среды. HiCrome ECC HiVeg агар содержит два хромогена, обеспечивающих дифференциацию колоний по окраске, и поставляется в виде порошка массой 100 г.

Назначение

HiCrome ECC HiVeg агар — дифференциальная питательная среда для предположительной идентификации Escherichia coli и других колиформных бактерий в пищевых и экологических образцах.

Тип образца: пищевые продукты и образцы окружающей среды.

Среда предназначена только для диагностики in vitro.

Состав

HiCrome ECC HiVeg агар изготовлен с полной заменой пептонов животного происхождения на растительный пептон для исключения рисков BSE/TSE — губчатой энцефалопатии крупного рогатого скота и трансмиссивных губчатых энцефалопатий.

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация результатов

Escherichia coli относится к семейству Enterobacteriaceae и входит в состав нормальной микрофлоры кишечника человека и многих животных. Большинство штаммов E. coli не вызывает желудочно-кишечных заболеваний, однако отдельные группы могут быть причиной тяжёлой диареи, опасной для жизни, а также последствий в виде осложнений или инвалидности.

HiCrome ECC HiVeg агар является дифференциальной средой для предположительной идентификации E. coli и других колиформных бактерий в пищевых продуктах и образцах окружающей среды.

Среда содержит два хромогена:

• один хромоген расщепляется ферментом глюкуронидазой, продуцируемой E. coli, с образованием колоний синего или фиолетового цвета;
• другой хромоген расщепляется ферментом галактозидазой, продуцируемой большинством колиформных бактерий, с образованием колоний розового или розово-красного цвета.

Специальный пептон HiVeg® и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами группы B и другими необходимыми питательными веществами. Лактоза служит сбраживаемым углеводом для выявления лактозосбраживающих микроорганизмов, а нейтральный красный используется как индикатор. Гидрофосфат натрия и дигидрофосфат калия обеспечивают буферные свойства среды. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Приготовление среды

1. Приготовьте суспензию из 55,83 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на кв. дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика анализа пищевых образцов

1. Высушите поверхность приготовленной агаризованной среды.
2. Разведите пищевой образец в соотношении 1:5 или 1:10 с использованием 0,1%-ной стерильной пептонной воды HiVeg® (MV028).
3. Гомогенизируйте образец в блендере или лабораторном гомогенизаторе.
4. Нанесите 0,5 или 1,0 мл гомогената на поверхность агара стерильным стеклянным шпателем.
5. Инкубируйте чашки при 37 °C в течение 18–24 ч.
6. Подсчитайте синие и фиолетовые колонии.
7. Умножьте полученное количество колоний на коэффициент разведения.
8. Результат выражают как количество E. coli на 1 г пищевого продукта.

Требования к образцам и обращению

Для отбора и обработки пищевых образцов применяйте соответствующие методики согласно действующим руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

• β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы E. coli могут быть отрицательными по этому признаку.
• Некоторые виды могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.

Контроль качества

Внешний вид: однородный, хорошо сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется непрозрачный гель красновато-розового цвета.

Реакция: реакция 5,58%-ного водного раствора при 25 °C.

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Сухую среду храните в плотно закрытой ёмкости при 15–25 °C.
• Приготовленную среду храните при 2–8 °C.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом состоянии, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте ёмкость.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Меры безопасности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с сухим продуктом используйте маску и избегайте контакта с глазами.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками обращения с инфекционными материалами.

Оценка рабочих характеристик

Рабочие характеристики среды ожидаются при применении в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.