HiMedia MV1220-500G Основа ITC HiVeg бульона (TTC HiVeg бульона)

Основа питательной среды HiMedia MV1220-500G Основа ITC HiVeg бульона (TTC HiVeg бульона) производства HiMedia с полной заменой пептонов животного происхождения на растительные пептоны. Среда предназначена для селективного обогащения и количественного определения Yersinia enterocolitica в пищевых продуктах и кормах для животных.

Назначение

Среда предназначена для селективного обогащения и количественного определения Yersinia enterocolitica в пищевых продуктах и кормах для животных.

Продукт относится к безживотным питательным средам растительного происхождения. Пептоны животного происхождения полностью заменены растительными пептонами для исключения рисков, связанных с BSE/TSE.

Состав

Среда ITC по спецификации ISO

Иргасан, тикарциллин и хлорат калия (ITC), содержание компонентов приведено в г/л.

Основа ITC HiVeg® (TTC HiVeg®)

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия показателям эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Род Yersinia относится к семейству Enterobacteriaceae. Представители рода обычно положительны по нитратредуктазе и характеризуются ферментативным типом метаболизма. Род включает 11 видов; наиболее важное значение как возбудитель пищевых инфекций человека имеет Yersinia enterocolitica.

Для выделения Y. enterocolitica из пищевых продуктов описаны различные методы обогащения. Наиболее эффективные процедуры выделения энтеропатогенных бактерий из пищевых продуктов включают как минимум один, а часто два этапа обогащения перед высевом на селективные дифференциальные агаровые среды.

Бульон ITC разработан на основе рекомендаций APHA и рекомендован комитетом ISO в качестве селективной среды обогащения для выделения Y. enterocolitica из пищевых продуктов. Бульон ITC разработан Wauters и соавторами как новая обогатительная среда, производная модифицированного бульона Раппапорта, с использованием селективных агентов иргасана (тикарциллина) и хлората калия.

Гидролизат HiVeg® и дрожжевой экстракт обеспечивают среду азотистыми и углеродсодержащими соединениями, аминокислотами с длинной углеродной цепью и другими необходимыми питательными веществами для роста микроорганизмов.

• Тикарциллин подавляет рост грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов.
• Иргасан подавляет рост грамположительных микроорганизмов.
• Хлорат калия обладает дезинфицирующими свойствами.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 44,12 г обезвоженной среды в 988 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при 121 °C в течение 15 мин. Давление при стерилизации — 15 фунтов на квадратный дюйм, приблизительно 0,10 МПа.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки Tic (FD102) и одного флакона селективной добавки PC (FD103).
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные пробирки или колбы необходимого объёма.

Тип образца

• Пищевые продукты.
• Корма для животных.

Подготовка и обработка образцов

Первое обогащение

1. Для приготовления исходной суспензии внесите образец в известный объём бульона PSB (M9411), чтобы получить разведение 1/10 по массе/объёму или объёму/объёму.
2. Гомогенизируйте суспензию в перистальтическом гомогенизаторе в течение 2 мин.
3. Инкубируйте при 22–25 °C в течение 2–3 суток при перемешивании или 5 суток без перемешивания.

Второе обогащение

1. Приготовьте вторую исходную суспензию аналогичным способом с использованием бульона ITC (M1220), чтобы получить соотношение исследуемой порции к обогатительной среде 1/100 по массе/объёму или объёму/объёму.
2. Инкубируйте при 25 °C в течение 48 ч.

Выделение

1. Выполните поверхностный посев культуры, полученной из культуры PSB, на чашку с агаром CIN и инкубируйте при 30 °C в течение 24–48 ч.
2. Для щелочной обработки стерильной пипеткой перенесите 0,5 мл культуры PSB в 4,5 мл раствора KOH и перемешивайте только 20 с. Немедленно выполните посев на чашку с агаром CIN. Инкубируйте при 30 °C в течение 24–48 ч.
3. Выполните поверхностный посев культуры ITC на чашку с агаром CIN (M843I). Инкубируйте при 30 °C в течение 24–48 ч.

Очистка культуры

Пересевайте выбранные колонии штриховым методом на поверхность питательного агара (M561A). Инкубируйте при 30 °C в течение 24 ч.

Подтверждение

Для подтверждения выполняют биохимические и серологические тесты.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MV1220-500G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Тип продукта: HiVeg™
• Происхождение пептонов: без компонентов животного происхождения, растительное
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: HDPE (полиэтилен высокой плотности)
• Масса: 500 г
• Эквивалентная масса обезвоженной среды: 44,12 г на 988 мл воды
• Температура хранения: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Конечный pH при 25 °C: 6,9 ± 0,2
• Диапазон pH по контролю качества: 6,70–7,10

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, легко сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-голубого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Раствор павлинье-зелёного цвета, прозрачный, без осадка.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 4,41 % масс./объём при 25 °C:

• pH: 6,9 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Показатели продуктивности определяют после добавления селективных добавок Tic (FD102) и PC (FD103) и инкубации при 25 ± 1 °C в течение 44 ± 4 ч. Выделение проводят на агаре CIN (M843I), после чего регистрируют характерную реакцию.

Показатели селективности определяют после добавления селективных добавок Tic (FD102) и PC (FD103) и инкубации при 25 ± 1 °C в течение 44 ± 4 ч. Выделение проводят на соево-казеиновом агаре (M290).