HiMedia MV1220-500G Основа ITC HiVeg бульона (TTC HiVeg бульона)

Основа питательной среды HiMedia MV1220-500G ITC HiVeg бульона (TTC HiVeg бульона) на растительной основе. Рекомендуется для селективного обогащения и количественного учета Yersinia enterocolitica в пищевых продуктах и кормах для животных.

Принцип измерения

Среда предназначена для выделения бактерий рода Yersinia (семейство Enterobacteriaceae), которые характеризуются положительной реакцией на нитратредуктазу и ферментативным метаболизмом. Бульон ITC разработан на основе модифицированного бульона Раппапорта с использованием селективных агентов: тикарциллина, иргазана (триклозана) и хлората калия.

• HiVeg® гидролизат и дрожжевой экстракт: обеспечивают азот- и углеродсодержащие соединения, длинноцепочечные аминокислоты и другие необходимые питательные вещества.
• Тикарциллин: оказывает ингибирующее действие на грамположительные и грамотрицательные микроорганизмы.
• Иргазан (триклозан): подавляет рост грамположительных организмов.
• Хлорат калия: обладает дезинфицирующими свойствами.

Использование растительных пептонов в серии HiVeg® полностью исключает риск заражения губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными spongiform-энцефалопатиями (TSE).

Состав

Спецификация ISO — бульон с иргазаном, тикарциллином и хлоратом калия (ITC)

MV1220 — Основа ITC HiVeg® бульона (TTC HiVeg® бульона)

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Суспендируйте 44,12 г сухого остатка среды в 988 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое одного регидратированного флакона селективной добавки Tic (FD102) и одного флакона селективной добавки PC (FD103).
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные пробирки или колбы.

Обработка образцов и процедура анализа

Обогащение:

1. Первичная суспензия: поместите образец (x) в известный объем бульона PSB (M9411) для получения разведения 1/10 (по массе/объему или объему/объему). Гомогенизируйте смесь с помощью перистальтического блендера в течение 2 мин. Инкубируйте при 22–25 °C от 2 до 3 суток (с перемешиванием) или до 5 суток (без перемешивания).
2. Вторичная суспензия: аналогичным образом используйте бульон ITC (M1220) для получения разведения тестовой порции к среде обогащения 1/100. Инкубируйте при 25 °C в течение 48 часов.

Изоляция:

1. Посейте культуру, полученную из бульона PSB, на поверхность агара CIN; инкубируйте при 30 °C в течение 24–48 часов.
2. Щелочная обработка: перенесите стерильной пипеткой 0,5 мл культуры PSB в 4,5 мл раствора KOH, перемешивайте строго 20 секунд. Немедленно посейте на агар CIN. Инкубируйте при 30 °C в течение 24–48 часов.
3. Посейте культуру из бульона ITC на поверхность агара CIN (M843I). Инкубируйте при 30 °C в течение 24–48 часов.

Очистка и подтверждение:

• Выберите колонии и проведите штрих-посев на поверхность питательного агара (M561A). Инкубируйте при 30 °C в течение 24 часов.
• Для окончательного подтверждения проведите биохимические и серологические тесты.

Технические характеристики

• Происхождение: без содержания компонентов животного происхождения (растительная основа)
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)
• Вес: 500 г
• Внешний вид: гомогенный свободнотекущий порошок от светло-желтого до светло-голубого цвета
• Цвет и прозрачность готовой среды: прозрачный раствор павлиньего зеленого цвета без осадка
• Реакция: pH 6,9 ± 0,2 (для 4,41 % w/v водного раствора при 25 °C)
• Диапазон pH: 6,70–7,10
• Температура хранения: 10–30 °C (сухая среда), 2–8 °C (готовая среда)

Контроль качества и эффективность

Характеристики оцениваются при использовании добавок Tic (FD102) и PC (FD103) после инкубации при 25 ± 1 °C в течение 44 ± 4 часов.

Культуральные характеристики

Условия эксплуатации и хранения

Хранить в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищенном от экстремальных температур и источников возгорания.

Меры предосторожности и утилизация

При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. Используйте защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз и лица. Утилизация использованных препаратов должна осуществляться путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с установленными лабораторными процедурами по обращению с инфекционными материалами.