HiMedia MV118-500G Основа HiVeg агара с маннитом и солью

Порошкообразная питательная среда HiMedia MV118-500G «Основа HiVeg агара с маннитом и солью» предназначена для селективного выделения патогенных стафилококков из различных образцов. Основа содержит 7,5 % хлорида натрия, подавляющего рост бактерий, отличных от стафилококков, и применяется для анализа пищевых, молочных и водных проб.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения патогенных стафилококков из различных образцов, включая:

• пищевые продукты;
• молочные продукты;
• воду;
• косметические средства;
• другие образцы.

Состав

Масса компонентов для приготовления 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с параметрами эффективности.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 111,02 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. При необходимости добавьте селективную добавку PRTC (FD045).
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Среда содержит 7,5 % хлорида натрия. При многократном контакте с воздухом и поглощении влаги хлорид натрия может образовывать комки, поэтому порошок следует хранить в плотно закрытой ёмкости, в сухом месте, защищённом от яркого света.

Принцип действия и интерпретация

Стафилококки широко распространены в природе и преимущественно обнаруживаются на коже, в кожных железах и на слизистых оболочках млекопитающих и птиц. Коагулазоположительные виды, включая Staphylococcus aureus, являются установленными условно-патогенными микроорганизмами человека.

Способность свёртывать плазму остаётся наиболее широко используемым и признанным критерием идентификации патогенных стафилококков, связанных с острыми инфекциями. Стафилококки обладают способностью расти на средах с высоким содержанием соли. Для выделения коагулазоположительных стафилококков применяется маннитно-солевой агар с феноловым красным и добавлением 7,5 % NaCl.

Основа маннитно-солевого агара HiVeg® рекомендована для выделения коагулазоположительных стафилококков из косметических средств, молока, пищевых продуктов и других образцов. Дополнительную липазную активность Staphylococcus aureus можно выявить добавлением эмульсии яичного желтка PRTC (FD045). Липазная активность проявляется в виде жёлтых непрозрачных зон вокруг колоний.

В основе маннитно-солевого агара HiVeg® животные пептоны полностью заменены растительными пептонами, что исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Пептон HiVeg® № 3 и экстракт HiVeg® обеспечивают растущие бактерии необходимыми факторами роста и микроэлементами. Хлорид натрия действует как ингибирующий компонент, подавляющий бактерии, отличные от стафилококков. Маннит является ферментируемым углеводом; его ферментация приводит к образованию кислоты, которое выявляется индикатором феноловым красным.

S. aureus ферментирует маннит, образуя жёлтые колонии, окружённые жёлтыми зонами. Коагулазонегативные штаммы S. aureus обычно не ферментируют маннит и поэтому формируют колонии от розового до красного цвета, окружённые красно-фиолетовыми зонами.

Предположительно коагулазоположительные жёлтые колонии S. aureus необходимо подтверждать коагулазным тестом в пробирочном или предметно-стекольном варианте. Липазную активность S. aureus выявляют добавлением к среде эмульсии яичного желтка.

Предположительный S. aureus необходимо подтверждать коагулазным тестом. Кроме того, микроорганизм следует пересевать на менее ингибирующую среду без избытка соли, чтобы исключить возможное влияние соли на коагулазный тест и другие диагностические тесты, например на питательный бульон HiVeg® (MV002).

Некоторые штаммы S. aureus могут демонстрировать замедленную ферментацию маннита. Поэтому отрицательные результаты перед выбраковкой следует повторно инкубировать ещё 24 ч.

Тип образца

• Пищевые и молочные образцы.
• Водные образцы.

Сбор и обработка образцов

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

Перед вскрытием ёмкости ознакомьтесь с маркировкой.

При работе с образцами и культурами используйте:

• защитные перчатки;
• защитную одежду;
• средства защиты глаз;
• средства защиты лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы и стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения метода

1. Предположительный S. aureus необходимо подтверждать коагулазным тестом.
2. Микроорганизм следует пересевать на менее ингибирующую среду без избытка соли, чтобы исключить возможное влияние соли на коагулазный тест и другие диагностические тесты, например на питательный бульон HiVeg® (MV002).
3. Некоторые штаммы S. aureus могут демонстрировать замедленную ферментацию маннита. Отрицательные результаты следует повторно инкубировать ещё 24 ч перед окончательной оценкой.

Контроль качества

Ожидаемые характеристики среды

• Внешний вид: порошок от светло-жёлтого до розового цвета, однородный, с хорошей сыпучестью.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красного цвета.
• Реакция: реакция водного раствора с массово-объёмной концентрацией 11,1 % при 25 °C; pH 7,4 ± 0,2.
• Диапазон pH: 7,20–7,60.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–72 ч. Степень восстановления для роста бактерий на соево-казеиновом агаре принимают за 100 %.