HiMedia MV1155-500G SDS HiVeg агар (лаурилсульфатный агар)

Питательная агаризованная среда HiMedia MV1155-500G SDS HiVeg агар (лаурилсульфатный агар) предназначена для обогащения, выделения и количественного определения Vibrio vulnificus в образцах морепродуктов и не содержит пептонов животного происхождения. Среда используется для пищевых образцов после добавления селективной добавки PolyB (FD003), а готовую среду хранят при 2–8 °C.

Назначение

Среда предназначена для обогащения, выделения и количественного определения Vibrio vulnificus в образцах морепродуктов и других пищевых продуктах. Методика применения соответствует рекомендациям APHA; среда также рекомендована для выделения и количественного определения Vibrio vulnificus из пищевых продуктов согласно ISO/TS 21872-2 и ISO 11133:2014.

Животные пептоны полностью заменены растительными пептонами. Среда не содержит компонентов животного происхождения и не связана с рисками BSE/TSE.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заявленных рабочих характеристик.

Экстракт HiVeg® эквивалентен мясному экстракту.

Принцип действия и интерпретация

Vibrio vulnificus — грамотрицательная, подвижная, изогнутая палочковидная бактерия. Бактерия встречается в морской среде, включая эстуарии, солоноватоводные пруды и прибрежные районы, и близка к Vibrio cholerae, возбудителю холеры.

Инфекция Vibrio vulnificus часто возникает после употребления морепродуктов, особенно устриц. Бактерии также могут проникать в организм через открытые раны при плавании или нахождении в воде, загрязнённой возбудителем. Vibrio vulnificus может вызывать септический шок, связанный с употреблением сырых устриц.

SDS-агар разработан по методике Bryant и соавторов для дифференциации Vibrio vulnificus от других представителей рода Vibrio. На среде Vibrio vulnificus образует характерные круглые фиолетово-зелёные колонии с непрозрачным ореолом диаметром около 2–3 мм.

Пептон HiVeg® № 3 и экстракт HiVeg® служат источниками азота и углерода, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и необходимых для роста питательных веществ. Сахароза является сбраживаемым сахаром. Хлорид натрия в концентрации 2 % обеспечивает солёность, необходимую для роста Vibrio. Бромтимоловый синий и крезоловый красный используются как индикаторы pH.

Додецилсульфат натрия и сульфат полимиксина B являются селективными агентами.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 33,04 г сухой среды в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки PolyB (FD003).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Образцы и обращение с ними

Тип образца

Пищевые образцы.

Отбор и обработка образцов

Для пищевых образцов используйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно применимым руководствам APHA, ISO/TS 21872-2 и ISO 11133:2014.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель красновато-фиолетового цвета.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 6,6 % масс./об. при 25 °C: pH 7,6 ± 0,2.

Значение pH

pH: 7,40–7,80.

Культуральные характеристики

Продуктивность

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч с добавленной селективной добавкой PolyB (FD003).

Селективность

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 37 ± 1 °C в течение 24 ± 3 ч с добавленной селективной добавкой PolyB (FD003).

Звёздочкой обозначены соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. Отдельные микроорганизмы различаются по требованиям к условиям роста и могут демонстрировать различную картину роста на этой среде.
2. Каждая партия среды протестирована на микроорганизмах, указанных в сертификате анализа (COA). При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в COA, рекомендуется провести валидацию с учётом специфических требований пользователя.

Оценка рабочих характеристик

Ожидаемые рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухого продукта: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер, сухое проветриваемое помещение, защита от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде.
• Продукт гигроскопичен; при неправильном хранении возможно образование комков.
• После каждого использования контейнер следует плотно закрывать.
• Рабочие характеристики лучше всего сохраняются при использовании в пределах установленного срока годности.

Меры предосторожности

Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку. При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. При обращении с образцами необходимо выполнять стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды посредством автоклавирования и/или сжигания. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками обращения с инфекционными материалами.

Технические характеристики

Отличие от стандартных животных пептонных сред

В составе SDS HiVeg агара пептоны животного происхождения полностью заменены растительными пептонами HiVeg®, при этом селективность обеспечивается додецилсульфатом натрия и сульфатом полимиксина B.

Совместимость

Для приготовления рабочей среды требуется селективная добавка PolyB (FD003), которую добавляют после охлаждения основы до 45–50 °C.