HiMedia MV1145-500G Основа HiVeg среды Листерия Оксфорд

Основа селективной питательной среды HiVeg Листерия Оксфорд HiMedia MV1145-500G для изоляции и идентификации видов Listeria. Применяется для анализа клинических образцов (ткани, жидкости организма), а также проб пищевых продуктов и молочной продукции.

Принцип измерения и интерпретация

Среда основана на рецептуре Кёртиса и др. для выделения L. monocytogenes из клинических и пищевых образцов. В данной модификации HiVeg® животные пептоны заменены растительными, что исключает риски заражения BSE/TSE (болезнь коровьего this-спонгиформного и трансмиссибельного губчатого энцефалопатий).

Механизм селекции и индикации

• Питание: Специальный растительный пептон HiVeg® служит источником основных питательных веществ.
• Нейтрализация: Кукурузный крахмал нейтрализует токсичные метаболиты.
• Ингибирование: Хлорид лития и антибиотики подавляют рост грамотрицательных и большинства грамположительных бактерий (хотя некоторые штаммы стафилококков могут расти, образуя эскулин-отрицательные колонии). Циклогексимид снижает грибковую контаминацию; цефотетан и фосфомицин подавляют избыточный бактериальный рост. Акрифлавин, сульфат колистина и хлорид лития ингибируют бактерии, отличные от видов Listeria.
• Индикация: L. monocytogenes гидролизует эскулин до эскулетина и декстрозы. Эскулетин взаимодействует с ионами железа, что приводит к образованию чёрных зон вокруг колоний.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. {Растворить 27,75 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды}.
2. {Нагреть до кипения для полного растворения}.
3. {Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx$0,1 МПа (15 psi) в течение 15 минут}.
4. {Охладить до 45–50 °C}.
5. {Асептически добавить содержимое 1 флакона селективной добавки Oxford (FD071) или 1 флакона селективной добавки CM (FD126)}.
6. {Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри}.

Схема работы с образцами

• Фекальные и биологические пробы: Гомогенизировать образец в 0,1 % растительной пептонной воде HiVeg® (MV028). 0,1 мл пробы высевают либо непосредственно на селективную среду, либо инокулируют в селективный бульон с инкубацией при 30 °C в течение 7 дней с последующим пересевом на селективную среду.
• Пищевые и экологические пробы: Рекомендуется селективное обогащение.
• Молочные продукты: 25 мл или 25 г образца добавить в 225 мл бульона для обогащения Listeria UVM (MV890A). Гомогенизировать, инкубировать 48 часов при 30 °C. Обогащенную культуру пересевать на основу среды Listeria Oxford и инкубировать аэробно 48 часов при 37 °C. 5 типичных (эскулин-положительных) колоний пересевают на соевый агар HiVeg® (MV290), инкубируют 24 часа и используют для биохимического подтверждения.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Физико-химические свойства и контроль качества

• Внешний вид: Гомогенный свободнотекучий порошок от светло-жёлтого до тёмно-жёлтого цвета.
• Желирование: Плотное, сопоставимо с 1,0 % агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность готовой среды: Темно-янтарный прозрачный или слегка опалесцирующий гель с голубоватым оттенком.
• Реакция: pH 5,55 % (масса/объем) водного раствора при 25 °C составляет 7,0 $\pm$ 0,2.
• Диапазон pH: 6,80–7,20.

Дополнительные параметры

Культуральные характеристики

Характеристики наблюдаются при использовании селективной добавки Oxford (FD071) или селективной добавки CM (FD126) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Температура хранения порошка: 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
• Особенности: Продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать для предотвращения образования комков. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Ограничения и предупреждения

1. Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативные паттерны на данной среде.
2. Каждая партия тестируется на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа (COA). При необходимости использования для специфических микроорганизмов, не указанных в COA, рекомендуется провести валидацию среды.
3. Для окончательной идентификации изолированных организмов требуются дополнительные биохимические тесты.
4. Меры безопасности: Только для профессионального использования (In Vitro диагностика). Использовать средства индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица). Загрязненные материалы перед утилизацией подлежат стерилизации в автоклаве.