HiMedia MV112-500G Основа мочевинного HiVeg агара (Кристенсен)

Питательная микробиологическая среда HiMedia MV112-500G Основа мочевинного HiVeg агара (Кристенсен) — порошковая основа без компонентов животного происхождения для приготовления мочевинного агара. Применяется для выявления продукции уреазы, особенно у представителей рода Proteus, при работе с выделенными микроорганизмами из пищевых, молочных и водных проб; требует добавления стерильного 40%-ного раствора мочевины и не допускает перегрева или повторного нагревания.

Назначение

Среда рекомендована для выявления продукции уреазы, особенно у представителей рода Proteus. Тип образца: выделенный микроорганизм из проб.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных параметров эффективности.

Принцип действия и интерпретация

Мочевинный агар применяют для выявления продукции уреазы. Мочевинный агар по Кристенсену позволяет обнаруживать активность уреазы у всех быстро уреазоположительных микроорганизмов рода Proteus, а также у других представителей семейства Enterobacteriaceae, для которых характерна замедленная уреазная реакция.

Повышенная чувствительность метода обеспечивается:

1. добавлением глюкозы в питательную среду;
2. снижением концентрации пептона;
3. снижением буферной ёмкости среды, благодаря чему выявляется даже небольшое количество образовавшейся щёлочи.

Основа мочевинного HiVeg® агара имеет тот же состав по принципу действия, что и основа мочевинного агара, однако пептоны животного происхождения полностью заменены пептонами растительного происхождения. Это исключает риски, связанные с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE), характерные для применения пептонов животного происхождения.

Функции компонентов:

• Пептон HiVeg® — источник необходимых питательных веществ.
• Декстроза — источник энергии.
• Хлорид натрия — поддерживает осмотическое равновесие среды.
• Фосфаты — выполняют буферную функцию.
• Мочевина — гидролизуется с выделением аммиака.
• Индикатор феноловый красный — выявляет образующуюся щёлочность по видимому изменению окраски от оранжевой до розовой.

Продолжительная инкубация может вызвать щелочную реакцию среды. Для исключения ложноположительных результатов используют среду без мочевины в качестве отрицательного контроля. Все среды для уреазного теста основаны на выявлении образования щёлочи и поэтому не предназначены для определения абсолютной скорости уреазной активности. Утилизация белков может повышать pH до щелочных значений вследствие гидролиза белков, а высвобождение избытка аминокислот может приводить к ложноположительной реакции.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 24,01 г сухой основы в 950 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 10 фунтов (≈0,069 МПа) и температуре 115 °C в течение 20 мин.
4. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте 50 мл стерильного 40%-ного раствора мочевины (FD048) и тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные пробирки.
7. Оставьте пробирки для застывания в наклонном положении.

Не допускайте перегрева и повторного нагревания среды, поскольку мочевина легко разлагается.

Пробоподготовка и обращение с образцами

Для пищевых и молочных проб применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно установленным методическим руководствам.

Для водных проб применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно методическим руководствам и местным нормативам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Модель и фасовка: MV112-500G
• Назначение изделия: основа питательной среды
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Компоненты животного происхождения: отсутствуют; растительная основа
• Упаковка: полиэтилен высокой плотности (HDPE)
• Масса: 500 г
• Конечный pH при 25 °C: 6,8 ± 0,2
• pH 2,4%-ного водного раствора: 6,60–7,00
• Температура хранения основы: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Температура инкубации при контроле культуральных характеристик: 35–37 °C
• Время инкубации при контроле культуральных характеристик: 18–24 ч
• Дополнительный компонент для приготовления среды: стерильный 40%-ный раствор мочевины FD048, 50 мл на 950 мл основы
• Условия стерилизации: автоклавирование при 115 °C в течение 20 мин

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или светло-розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В пробирках, установленных под углом, образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель желтовато-оранжевого цвета.

Реакция

Реакция 2,4%-ного водного раствора при 25 °C: pH 6,8 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после добавления стерильного 40%-ного раствора мочевины (FD048) и инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.
# Ранее обозначался как Enterobacter aerogenes.
$ Ранее обозначался как Proteus vulgariserogenes.

Ограничения метода

1. Продолжительная инкубация может вызвать щелочную реакцию среды.
2. Все среды для уреазного теста основаны на образовании щёлочи и не являются специфичными для определения абсолютной скорости уреазной активности.
3. Гидролиз белков может повышать pH до щелочных значений, а высвобождение избытка аминокислот может приводить к ложноположительной реакции.

Условия хранения и срок годности

Храните сухую основу при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости, а приготовленную среду — при 2–8 °C. Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков вследствие гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков. Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования плотно закрывайте ёмкость. Рабочие характеристики продукта обеспечиваются при использовании в пределах установленного срока годности.

Меры предосторожности

Перед открытием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. Соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики при обращении с образцами и культурами. При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов и материалов, контактировавших с образцами, соблюдайте установленные лабораторные процедуры: материалы должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими методами лабораторной работы.

Сравнительное техническое отличие

В основе мочевинного HiVeg® агара пептоны животного происхождения полностью заменены пептонами растительного происхождения, в отличие от основы мочевинного агара с пептонами животного происхождения.